| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| 1.1 与果实品质相关的烯萜类主要代谢产物及其作用 | 第10-11页 |
| 1.2 GGPPS基因参与烯萜类物质合成途径及其调控机制 | 第11-14页 |
| 1.2.1 GGPPS基因参与类胡萝卜素合成 | 第12-13页 |
| 1.2.2 GGPPS基因参与叶绿素合成 | 第13页 |
| 1.2.3 GGPPS基因参与挥发性烯萜类物质合成 | 第13-14页 |
| 1.3 芒果果实品质相关烯萜类主要代谢产物的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 基因编辑技术的发展及在植物中的应用 | 第15-17页 |
| 1.5 目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.6 技术路线 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| 2.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.1 植物材料与菌种 | 第20页 |
| 2.1.2 试剂与引物合成 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-39页 |
| 2.2.1 基因克隆 | 第20-26页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.3 通过qRT-PCR分析表达特性 | 第26-28页 |
| 2.2.4 亚细胞定位质粒的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.5 基因编辑质粒的构建 | 第30-35页 |
| 2.2.6 本氏烟草遗传转化 | 第35-36页 |
| 2.2.7 芒果果肉总类胡萝卜素的提取 | 第36-37页 |
| 2.2.8 亚细胞定位 | 第37页 |
| 2.2.9 高效液相色谱检测β-胡萝卜素和番茄红素 | 第37-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-63页 |
| 3.1 研究材料 | 第39-40页 |
| 3.2 芒果GGPPS基因的克隆 | 第40-43页 |
| 3.2.1 芒果总RNA的提取质量 | 第40-41页 |
| 3.2.2 芒果GGPPS全长基因的克隆 | 第41-43页 |
| 3.3 MinGGPPS-A和MinGGPPS-B基因生物信息学分析 | 第43-51页 |
| 3.3.1 氨基酸序列的推导及其理化特征分析 | 第43-46页 |
| 3.3.2 同源序列比对和系统发育树构建 | 第46-51页 |
| 3.4 MinGGPPSlsu和MinGGPPSssu亚细胞定位 | 第51-53页 |
| 3.4.1 pCAM -MinGGPPSlsu-GFP和pCAM -MinGGPPSssu-GFP的重组质粒构建 | 第51-52页 |
| 3.4.2 亚细胞定位结果与分析 | 第52-53页 |
| 3.5 芒果果肉类胡萝卜素含量测定 | 第53-56页 |
| 3.5.1 总类胡萝卜素含量 | 第53-55页 |
| 3.5.2 果肉类胡萝卜素中的β-类胡萝卜素和番茄红素的含量变化 | 第55-56页 |
| 3.6 果肉中MinGGPPlsu和MinGGPPSssu基因表达量与分析 | 第56-60页 |
| 3.6.1 溶解曲线、扩增曲线和标准曲线方程 | 第56-58页 |
| 3.6.2 芒果未熟果和成熟果的果肉MinGGPPS表达量分析 | 第58-59页 |
| 3.6.3 后熟过程中果肉MinGGPPS表达量分析 | 第59-60页 |
| 3.7 MinGGPPSlsu和MinGGPPSlsu基因与类胡萝卜素积累相关性分析 | 第60-63页 |
| 4 讨论 | 第63-66页 |
| 4.1 MinGGPPlsu和MinGGPPSssu基因的全长和结构域分析 | 第63页 |
| 4.2 MinGGPPlsu和MinGGPPSssu与烯萜物质代谢的关系 | 第63-66页 |
| 4.2.1 MinGGPPlsu与类胡萝卜素代谢相关的探讨 | 第63-64页 |
| 4.2.2 MinGGPPssu与单萜代谢相关的探讨 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 6 后续研究 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-78页 |
| 缩略语表 | 第78-79页 |
| 附录 | 第79-89页 |
| 1 烟草GGPPS基因编辑 | 第79-84页 |
| 1.1 基因编辑表达载体的构建 | 第79-80页 |
| 1.2 GGPPS基因编辑转基因植株和愈伤组织的阳性筛选结果分析 | 第80-81页 |
| 1.3 GGPPS基因编辑转基因植株和愈伤组织的靶点检测结果分析 | 第81-84页 |
| 1.4 GGPPSlsu的缺失与植株的生长发育的关系 | 第84页 |
| 2 引物序列 | 第84-86页 |
| 3 实验室常用的培养基及药品 | 第86-87页 |
| 4 实验室常用的实验设备 | 第87页 |
| 5 个人简介 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
