| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 椎间盘退变动物模型的制备 | 第10-22页 |
| 材料和方法 | 第10-14页 |
| 1.材料及分组 | 第10-11页 |
| 1.1 实验动物 | 第10页 |
| 1.2 实验器械和试剂 | 第10页 |
| 1.3 实验分组 | 第10-11页 |
| 2.实验方法 | 第11-12页 |
| 2.1 术前准备及麻醉 | 第11页 |
| 2.2 定位及手术 | 第11-12页 |
| 2.3 术后处理 | 第12页 |
| 3.观察方法及指标 | 第12-13页 |
| 3.1 术后实验动物一般情况 | 第12页 |
| 3.2 病理学检测 | 第12页 |
| 3.3 MRI扫描检查 | 第12-13页 |
| 4.统计学分析方法 | 第13-14页 |
| 结果 | 第14-17页 |
| 1.术后实验动物一般情况 | 第14页 |
| 2.术后8周椎间盘病理改变 | 第14页 |
| 3.MRI检查结果 | 第14-17页 |
| 讨论 | 第17-18页 |
| 小结 | 第18-19页 |
| 参考文献 | 第19-22页 |
| 第二章 慢病毒介导的MMP3-siRNA和Sox9转染兔退变椎间盘的生物学效应 | 第22-50页 |
| 材料和方法 | 第23-32页 |
| 1.实验动物及实验试剂仪器 | 第23-25页 |
| 1.1 实验动物 | 第23页 |
| 1.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 实验仪器 | 第24-25页 |
| 1.4 目的基因及载体 | 第25页 |
| 2.实验分组及方法 | 第25-31页 |
| 2.1 实验分组 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-31页 |
| 2.2.1 实验动物处理 | 第25-26页 |
| 2.2.2 MRI扫描检查 | 第26页 |
| 2.2.3 Western-Blot检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达量 | 第26-29页 |
| 2.2.3.1 蛋白样品制备 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 蛋白质变性 | 第27页 |
| 2.2.3.3 制备电泳胶 | 第27-28页 |
| 2.2.3.4 上样电泳 | 第28页 |
| 2.2.3.5 切胶转膜 | 第28页 |
| 2.2.3.6 一抗孵育 | 第28页 |
| 2.2.3.7 二抗孵育 | 第28-29页 |
| 2.2.3.8 发光鉴定 | 第29页 |
| 2.2.4 RT-PCR检测MMP3 mRNA和Sox9 mRNA表达情况 | 第29-31页 |
| 2.2.4.1 总RNA提取 | 第29-30页 |
| 2.2.4.2 cDNA的反转录 | 第30页 |
| 2.2.4.3 RT-PCR | 第30-31页 |
| 3.统计学分析方法 | 第31-32页 |
| 结果 | 第32-44页 |
| 1.术后实验动物一般情况 | 第32页 |
| 2.MRI检查结果 | 第32-36页 |
| 3.Western-Blot检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达量 | 第36-40页 |
| 3.1 II型胶原表达量检测 | 第36-38页 |
| 3.2 蛋白多糖表达量检测 | 第38-40页 |
| 4.RT-PCR检测MMP3 mRNA和Sox9 mRNA表达情况 | 第40-44页 |
| 4.1 Sox9 mRNA表达情况 | 第40-42页 |
| 4.2 MMP3 mRNA表达情况 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 综述 | 第50-67页 |
| 综述参考文献 | 第59-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
