摘要 | 第2-3页 |
abstract | 第3-4页 |
1 引言 | 第7-28页 |
1.1 菠菜的病害及防治 | 第8-9页 |
1.1.1 菠菜病害及其病原物种类 | 第8页 |
1.1.2 基因水平上提高菠菜抗性的成功应用 | 第8-9页 |
1.2 植物免疫 | 第9-17页 |
1.2.1 PAMP激活的植物免疫反应 | 第9-11页 |
1.2.2 效应子激活的植物免疫反应 | 第11-15页 |
1.2.3 植物系统获得性抗性 | 第15页 |
1.2.4 植物PTI和ETI免疫防御机制 | 第15-17页 |
1.3 植物与病原体的识别模型 | 第17-18页 |
1.3.1 一般模型——配体--受体模型 | 第17-18页 |
1.3.2 卫士模型 | 第18页 |
1.4 植物免疫相关的信号分子 | 第18-23页 |
1.4.1 防卫反应的早期信号事件 | 第18-20页 |
1.4.2 依赖内源信号分子的传递途径 | 第20-21页 |
1.4.3 拟南芥中的免疫信号传导途径 | 第21-23页 |
1.5 CPR5蛋白和SIM蛋白的研究进展 | 第23-28页 |
2 实验材料与方法 | 第28-40页 |
2.1 实验材料 | 第28-31页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 质粒与菌株 | 第28页 |
2.1.3 试剂的配制 | 第28-29页 |
2.1.4 培养基的配方 | 第29-30页 |
2.1.5 抗生素配方及浓度 | 第30-31页 |
2.1.6 实验仪器与设备 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-39页 |
2.2.1 拟南芥的种植 | 第31页 |
2.2.2 基因组DNA提取 | 第31-32页 |
2.2.3 鉴定T-DNA插入的突变体背景 | 第32页 |
2.2.4 构建转基因载体 | 第32-36页 |
2.2.5 RNA的提取(TRIzol法) | 第36-37页 |
2.2.6 RNA的纯化 | 第37页 |
2.2.7 RNA反转录cDNA | 第37页 |
2.2.8 RealTimePCR | 第37页 |
2.2.9 亚细胞定位 | 第37-38页 |
2.2.10 扫描电镜分析 | 第38页 |
2.2.11 病原物侵染植株 | 第38页 |
2.2.12 离子渗透测试 | 第38-39页 |
2.3 试验中主要引物设计 | 第39-40页 |
3 结果 | 第40-53页 |
3.1 菠菜的CPR5与SIM的同源蛋白 | 第40-43页 |
3.1.1 SoCPR5与AtCPR5在蛋白结构上的同源性 | 第40-42页 |
3.1.2 SoSIM与AtSIM在蛋白结构上的同源性 | 第42-43页 |
3.2 SoCPR5与AtCPR5在蛋白功能上的同源性 | 第43-48页 |
3.2.1 SoCPR5互补拟南芥cpr5突变体表型 | 第43-45页 |
3.2.2 SoCPR5在植物免疫中的功能鉴定 | 第45-48页 |
3.3 SoSIM与AtSIM在蛋白功能上的同源性 | 第48-53页 |
3.3.1 SoSIM互补拟南芥simsmr1突变体表型 | 第48-50页 |
3.3.2 SoSIM激活了植物免疫和PCD | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
4.1 菠菜SoCPR5蛋白和同源的拟南芥AtCPR5蛋白均位于细胞核膜上并具有与相似的跨膜结构域 | 第54页 |
4.2 初步表明菠菜SoCPR5蛋白和拟南芥AtCPR5蛋白功能相似 | 第54-55页 |
4.3 菠菜SoSIM蛋白和同源的拟南芥AtSIM蛋白有相似的细胞周期蛋白结构域 | 第55页 |
4.4 初步表明菠菜SoSIM蛋白和拟南芥AtSIM蛋白功能相似 | 第55-57页 |
5 结论与展望 | 第57-58页 |
5.1 结论 | 第57页 |
5.2 进一步的工作 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |