| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第10-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-16页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第16-35页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第16-20页 |
| 2.1.1 细胞株与裸鼠 | 第16页 |
| 2.1.2 实验主要试剂 | 第16-18页 |
| 2.1.3 实验主要溶液的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.4 实验室主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 .细胞培养相关方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 细胞培养基本条件 | 第20页 |
| 2.2.2 细胞的复苏 | 第20-21页 |
| 2.2.3 细胞的换液、传代与冻存 | 第21-22页 |
| 2.3 构建高表达SGC7901细胞株 | 第22-26页 |
| 2.3.1 PRL-3引物的设计与合成 | 第22页 |
| 2.3.2 构建PRL-3过表达质粒 | 第22-23页 |
| 2.3.3 质粒小量抽提 | 第23-25页 |
| 2.3.4 质粒中量抽提 | 第25-26页 |
| 2.3.5 转染pEBG-PRL-3质粒到胃癌SGC7901细胞株 | 第26页 |
| 2.4 CCK-8试验检测LY294002抑制剂适宜浓度 | 第26-27页 |
| 2.5 WesternBlot检测 | 第27-31页 |
| 2.5.1 细胞总蛋白的制备 | 第27-28页 |
| 2.5.2 总蛋白浓度的测定(BCA法) | 第28页 |
| 2.5.3 凝胶制备 | 第28-29页 |
| 2.5.4 SDS-PAGE蛋白凝胶电泳 | 第29-30页 |
| 2.5.5 蛋白转膜 | 第30页 |
| 2.5.6 蛋白的免疫反应 | 第30-31页 |
| 2.5.7 凝胶图像分析 | 第31页 |
| 2.6 迁移侵袭实验 | 第31-33页 |
| 2.6.1 用LY294002处理的细胞的接种和培养 | 第31页 |
| 2.6.2 Transwell细胞迁移实验 | 第31-32页 |
| 2.6.3 Transwell细胞侵袭实验 | 第32-33页 |
| 2.7 构建裸鼠成瘤模型 | 第33-34页 |
| 2.7.1 饲养裸鼠的基本条件 | 第33页 |
| 2.7.2 细胞悬液的制备 | 第33页 |
| 2.7.3 裸鼠腹膜转移模型构建 | 第33-34页 |
| 2.8 统计学分析 | 第34-35页 |
| 第3章 结果 | 第35-44页 |
| 3.1 CCK-8法检测LY294002浓度 | 第35页 |
| 3.2 WesternBlot检测 | 第35-38页 |
| 3.2.1 各组细胞中PRL-3与AKT、p-AKT的表达关系。 | 第35-36页 |
| 3.2.2 各组细胞中PRL-3与MMP-2、MMP-9的表达关系 | 第36-37页 |
| 3.2.3 各组中PRL-3表达情况和p-AKT/AKT的表达情况及对比分析 | 第37页 |
| 3.2.4 各组中mmp-2和mmp-9的表达情况及对比分析 | 第37-38页 |
| 3.3 迁移和侵袭实验 | 第38-41页 |
| 3.3.1 应用transwell试验检测各组细胞迁移能力 | 第38-39页 |
| 3.3.2 各组细胞迁移能力的对比分析 | 第39页 |
| 3.3.3 应用transwell试验检测各组细胞侵袭能力 | 第39-40页 |
| 3.3.4 Transwell试验中各组细胞侵袭能力的对比分析 | 第40-41页 |
| 3.4 裸鼠腹膜成瘤 | 第41-44页 |
| 3.4.1 体内实验中各组裸鼠腹腔肿瘤生长情况 | 第41-42页 |
| 3.4.2 各组肿瘤结节数量及大小及分析 | 第42-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-47页 |
| 第5章 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-63页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
