| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1. 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 UVB与皮肤光损伤概况 | 第11-14页 |
| 1.1.1 紫外线概况 | 第11-12页 |
| 1.1.2 皮肤光损伤 | 第12-14页 |
| 1.2 UVB对皮肤光损伤作用的通路研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 UVB诱导ROS的产生 | 第14页 |
| 1.2.2 ROS与DNA损伤 | 第14-15页 |
| 1.2.3 DNA损伤与p53 | 第15页 |
| 1.2.4 p53参与线粒体介导的细胞凋亡 | 第15-16页 |
| 1.3 矢车菊素3葡萄糖苷的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 本课题的研究意义和创新之处 | 第17-19页 |
| 2. 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 技术路线 | 第19页 |
| 2.2 仪器与材料 | 第19-22页 |
| 2.2.1 仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.3 试剂溶液的配制（所有溶液配置用水均为超纯水） | 第21-22页 |
| 2.3 HaCaT细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.3.1 HaCaT细胞的传代与培养 | 第22-23页 |
| 2.3.2 HaCaT细胞的冻存 | 第23页 |
| 2.3.3 HaCaT细胞的复苏 | 第23页 |
| 2.4 建立HaCaT细胞的光损伤模型 | 第23-24页 |
| 2.4.1 UVB照射条件与照射剂量 | 第23-24页 |
| 2.4.2 UVB照射HaCaT细胞 | 第24页 |
| 2.5 细胞活性检测——MTT法 | 第24-26页 |
| 2.5.1 HaCaT细胞生长曲线绘制 | 第24页 |
| 2.5.2 UVB照射对HaCaT细胞活性的影响 | 第24-25页 |
| 2.5.3 C3G对正常HaCaT细胞生长的影响 | 第25-26页 |
| 2.5.4 C3G对UVB照射后HaCaT细胞的细胞活性影响 | 第26页 |
| 2.6 细胞内ROS水平的测定——DCFH-DA探针荧光酶标仪检测 | 第26-27页 |
| 2.6.1 DCFH-DA的配制 | 第26页 |
| 2.6.2 不同剂量UVB照射对ROS产生的影响 | 第26-27页 |
| 2.6.3 C3G对UVB照射后HaCaT细胞ROS产生的影响 | 第27页 |
| 2.7 细胞凋亡检测——Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测 | 第27-28页 |
| 2.8 线粒体膜电位（Δψm）检测——JC-1 染色流式细胞仪检测 | 第28-29页 |
| 2.9 p53及凋亡相关蛋白的检测——Westerm blot免疫印迹法 | 第29-30页 |
| 2.10 统计分析 | 第30-31页 |
| 3. 实验结果 | 第31-46页 |
| 3.1 HaCaT细胞的体外生长情况 | 第31-32页 |
| 3.1.1 正常HaCaT细胞的细胞形态 | 第31页 |
| 3.1.2 HaCaT细胞生长曲线 | 第31-32页 |
| 3.2 HaCaT细胞光损伤模型的建立 | 第32页 |
| 3.3 UVB对HaCaT细胞增殖活性的影响 | 第32-34页 |
| 3.4 C3G对正常HaCaT细胞生长的影响 | 第34-35页 |
| 3.5 C3G对UVB照射后HaCaT细胞的细胞活性影响 | 第35-37页 |
| 3.6 不同剂量UVB照射对ROS产生的影响 | 第37-38页 |
| 3.7 C3G对UVB照射后HaCaT细胞ROS产生的影响 | 第38-40页 |
| 3.8 C3G对UVB照射后HaCaT细胞的细胞凋亡影响 | 第40-41页 |
| 3.9 C3G对UVB照射后HaCaT细胞线粒体膜电位的影响 | 第41-43页 |
| 3.10 C3G对UVB照射后HaCaT细胞DNA损伤的影响 | 第43页 |
| 3.11 C3G对UVB照射后HaCaT细胞中p53的影响 | 第43-44页 |
| 3.12 C3G对UVB照射后HaCaT细胞中凋亡相关蛋白的影响 | 第44-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-53页 |
| 4.1 HaCaT细胞的选择 | 第46-47页 |
| 4.2 UVB照射剂量的选择和HaCaT细胞光损伤模型的建立 | 第47页 |
| 4.3 C3G保护浓度的选择 | 第47-48页 |
| 4.4 C3G发挥细胞保护作用是通过清除ROS、抑制UVB所致的细胞凋亡 | 第48-49页 |
| 4.4.1 C3G提高了UVB照射后HaCaT细胞的细胞活性 | 第48页 |
| 4.4.2 C3G减少了UVB所致的细胞凋亡 | 第48-49页 |
| 4.4.3 C3G对ROS的清除作用 | 第49页 |
| 4.5 C3G通过减少DNA损伤、调控p53水平来抑制UVB所致的细胞凋亡 | 第49-51页 |
| 4.5.1 C3G减少了UVB照射所致的DNA损伤 | 第49-50页 |
| 4.5.2 C3G调控关键因子p53的表达 | 第50-51页 |
| 4.6 C3G通过调控Bcl-2 家族蛋白的表达、抑制线粒体介导的细胞凋亡 | 第51-53页 |
| 4.6.1 C3G抑制UVB诱导的细胞凋亡是通过线粒体途径 | 第51页 |
| 4.6.2 C3G是通过调控Bcl-2 家族蛋白的表达来参与线粒体凋亡通路 | 第51-53页 |
| 5. 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录 文献综述 | 第62-77页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 英文缩略词对照 | 第77-78页 |
| 在读硕士学位期间发表的学术论文及参加学术会议 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
