上海交通大学博士学位论文答辩决议书 | 第5-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
ABSTRACT | 第13-16页 |
前言 | 第16-21页 |
材料与方法 | 第21-35页 |
实验材料 | 第21-23页 |
2.1 实验动物 | 第21页 |
2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
2.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
实验方法 | 第23-35页 |
2.4 快速老化 APP/PS1 转基因小鼠模型的建立 | 第23-24页 |
2.5 转基因小鼠基因型鉴定 | 第24-26页 |
2.5.1 鼠尾基因组提取 | 第24-25页 |
2.5.2 聚合酶链式反应扩增目的基因 | 第25-26页 |
2.5.3 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增基因 | 第26页 |
2.6 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型行为学检测 | 第26-28页 |
2.6.1 开场实验 | 第26页 |
2.6.2 高架十字迷宫实验 | 第26-27页 |
2.6.3 穿梭箱实验 | 第27页 |
2.6.4 Morris 水迷宫实验 | 第27-28页 |
2.7 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内病理形态学检测 | 第28-29页 |
2.7.1 小鼠心脏灌注取脑 | 第28页 |
2.7.2 冰冻切片 | 第28页 |
2.7.3 尼氏染色 | 第28-29页 |
2.7.4 刚果红染色 | 第29页 |
2.7.5 免疫组织化学(荧光) | 第29页 |
2.8 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内抗氧化水平检测 | 第29-34页 |
2.8.1 脑组织蛋白定量 | 第29-30页 |
2.8.2 总超氧化物岐化酶活性检测 (WST 法) | 第30-31页 |
2.8.3 过氧化氢酶活性检测 | 第31-32页 |
2.8.4 谷胱甘肽还原酶活性检测 | 第32-33页 |
2.8.5 脂质氧化检测 | 第33-34页 |
2.9 IMAGEPRO PLUS 6.0 软件分析病理染色及免疫组化阳性物光密度值 | 第34页 |
2.10 统计分析 | 第34-35页 |
结果 | 第35-47页 |
3.1 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型行为改变 | 第35-40页 |
3.1.1 开场实验 | 第35-36页 |
3.1.2 高架十字迷宫实验 | 第36-37页 |
3.1.3 穿梭箱实验 | 第37-38页 |
3.1.4 Morris 水迷宫实验 | 第38-40页 |
3.2 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑病理形态改变 | 第40-45页 |
3.2.1 尼氏染色 | 第40-42页 |
3.2.2 刚果红染色 | 第42-43页 |
3.2.3 Aβ免疫组织化学 | 第43-45页 |
3.3 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内抗氧化水平 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-51页 |
总结 | 第51-53页 |
一、主要结论 | 第51-52页 |
二、研究展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
第二部分 氧化应激调节 AD 三转基因小鼠 D421 位点 TAU 切割的研究 | 第56页 |
摘要 | 第56-59页 |
ABSTRACT | 第59-62页 |
前言 | 第62-70页 |
材料与方法 | 第70-82页 |
实验材料 | 第70-73页 |
2.1 实验动物 | 第70页 |
2.2 实验试剂 | 第70-72页 |
2.3 主要仪器设备 | 第72-73页 |
实验方法 | 第73-82页 |
2.4 抗氧化及氧化应激 APP/PS1/TAU 小鼠模型的建立 | 第73页 |
2.5 转基因小鼠基因型鉴定 | 第73-74页 |
2.5.1 鼠尾基因组提取 | 第73-74页 |
2.5.2 聚合酶链式反应扩增目的基因 | 第74页 |
2.5.3 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增基因 | 第74页 |
2.6 实验动物分组 | 第74-75页 |
2.6.1 阿尔茨海默病模型小鼠动物给药 | 第75页 |
2.7 阿尔茨海默病模型小鼠行为学检测 | 第75页 |
2.7.1 Morris 水迷宫实验 | 第75页 |
2.8 阿尔茨海默病模型小鼠脑内病理形态学检测 | 第75-76页 |
2.8.1 小鼠心脏灌注取脑 | 第75-76页 |
2.8.2 冰冻切片 | 第76页 |
2.8.3 尼氏染色 | 第76页 |
2.8.4 刚果红染色 | 第76页 |
2.8.5 免疫组织化学(荧光) | 第76页 |
2.8.6 免疫组织化学染色(DAB) | 第76页 |
2.9 阿尔茨海默病模型小鼠脑内抗氧化水平检测 | 第76-77页 |
2.9.1 脑组织蛋白定量 | 第76-77页 |
2.9.2 总超氧化物岐化酶活性检测 (WST 法) | 第77页 |
2.9.3 过氧化氢酶活性检测 | 第77页 |
2.9.4 谷胱甘肽还原酶活性检测 | 第77页 |
2.9.5 脂质氧化检测 | 第77页 |
2.10 阿尔茨海默病模型小鼠脑组织免疫印迹 | 第77-80页 |
2.10.1 蛋白 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第77-79页 |
2.10.2 蛋白电转移 | 第79-80页 |
2.10.3 显影、检测(化学发光法) | 第80页 |
2.11 IMAGE PRO PLUS 6.0 软件分析染色及免疫组化阳性物光密度值 | 第80-81页 |
2.12 统计分析 | 第81-82页 |
结果 | 第82-102页 |
3.1 抗氧化及氧化应激 APP/PS1/TAU 小鼠模型的建立 | 第82页 |
3.2 氧化应激对小鼠学习认知的影响 | 第82-86页 |
3.2.1 氧化应激对模型小鼠水迷宫实验游泳速度及距离的影响 | 第82-83页 |
3.2.2 氧化应激对模型小鼠水迷宫定位航行的影响 | 第83-84页 |
3.2.3 氧化应激对模型小鼠水迷宫空间探索的影响 | 第84-86页 |
3.3 氧化应激对小鼠脑内病理形态学的影响 | 第86-90页 |
3.3.1 尼氏染色 | 第86页 |
3.3.2 刚果红染色 | 第86-88页 |
3.3.3 Aβ免疫组织化学 | 第88-89页 |
3.3.4 Tau 蛋白双螺旋丝 AT8 免疫组化 | 第89-90页 |
3.4 氧化应激对小鼠脑内相关抗氧化水平的影响 | 第90-97页 |
3.4.1 氧化物岐化酶水平 | 第90-92页 |
3.4.2 过氧化氢酶水平 | 第92-94页 |
3.4.3 谷胱甘肽水平 | 第94-96页 |
3.4.4 脂质氧化水平 | 第96-97页 |
3.5 氧化应激对小鼠脑 CASPASE 6 表达及 D421 位点 TAU 切割的影响 | 第97-102页 |
3.5.1 小鼠脑内 caspase 6 表达 | 第97-99页 |
3.5.2 小鼠脑内 Tau C3(tau 蛋白于 D421 位点切割)表达 | 第99-100页 |
3.5.3 小鼠脑内 Tau C3 及 caspase 6 共定位 | 第100-102页 |
讨论 | 第102-109页 |
总结 | 第109-111页 |
一、主要结论 | 第109-110页 |
二、研究展望 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-113页 |
缩略词表 | 第113-114页 |
攻读博士学位期间已发表、录用或提交的论文及专利申请 | 第114-117页 |
致谢 | 第117页 |