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快速老化APP/PS1阿尔茨海默病小鼠模型的建立及氧化应激调节AD三转基因小鼠D421位点tau切割的研究

上海交通大学博士学位论文答辩决议书第5-10页
摘要第10-13页
ABSTRACT第13-16页
前言第16-21页
材料与方法第21-35页
    实验材料第21-23页
        2.1 实验动物第21页
        2.2 实验试剂第21-22页
        2.3 主要仪器设备第22-23页
    实验方法第23-35页
        2.4 快速老化 APP/PS1 转基因小鼠模型的建立第23-24页
        2.5 转基因小鼠基因型鉴定第24-26页
            2.5.1 鼠尾基因组提取第24-25页
            2.5.2 聚合酶链式反应扩增目的基因第25-26页
            2.5.3 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增基因第26页
        2.6 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型行为学检测第26-28页
            2.6.1 开场实验第26页
            2.6.2 高架十字迷宫实验第26-27页
            2.6.3 穿梭箱实验第27页
            2.6.4 Morris 水迷宫实验第27-28页
        2.7 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内病理形态学检测第28-29页
            2.7.1 小鼠心脏灌注取脑第28页
            2.7.2 冰冻切片第28页
            2.7.3 尼氏染色第28-29页
            2.7.4 刚果红染色第29页
            2.7.5 免疫组织化学(荧光)第29页
        2.8 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内抗氧化水平检测第29-34页
            2.8.1 脑组织蛋白定量第29-30页
            2.8.2 总超氧化物岐化酶活性检测 (WST 法)第30-31页
            2.8.3 过氧化氢酶活性检测第31-32页
            2.8.4 谷胱甘肽还原酶活性检测第32-33页
            2.8.5 脂质氧化检测第33-34页
        2.9 IMAGEPRO PLUS 6.0 软件分析病理染色及免疫组化阳性物光密度值第34页
        2.10 统计分析第34-35页
结果第35-47页
    3.1 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型行为改变第35-40页
        3.1.1 开场实验第35-36页
        3.1.2 高架十字迷宫实验第36-37页
        3.1.3 穿梭箱实验第37-38页
        3.1.4 Morris 水迷宫实验第38-40页
    3.2 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑病理形态改变第40-45页
        3.2.1 尼氏染色第40-42页
        3.2.2 刚果红染色第42-43页
        3.2.3 Aβ免疫组织化学第43-45页
    3.3 快速老化 APP/PS1 痴呆小鼠模型脑内抗氧化水平第45-47页
讨论第47-51页
总结第51-53页
    一、主要结论第51-52页
    二、研究展望第52-53页
参考文献第53-56页
第二部分 氧化应激调节 AD 三转基因小鼠 D421 位点 TAU 切割的研究第56页
摘要第56-59页
ABSTRACT第59-62页
前言第62-70页
材料与方法第70-82页
    实验材料第70-73页
        2.1 实验动物第70页
        2.2 实验试剂第70-72页
        2.3 主要仪器设备第72-73页
    实验方法第73-82页
        2.4 抗氧化及氧化应激 APP/PS1/TAU 小鼠模型的建立第73页
        2.5 转基因小鼠基因型鉴定第73-74页
            2.5.1 鼠尾基因组提取第73-74页
            2.5.2 聚合酶链式反应扩增目的基因第74页
            2.5.3 琼脂糖凝胶电泳检测 PCR 扩增基因第74页
        2.6 实验动物分组第74-75页
            2.6.1 阿尔茨海默病模型小鼠动物给药第75页
        2.7 阿尔茨海默病模型小鼠行为学检测第75页
            2.7.1 Morris 水迷宫实验第75页
        2.8 阿尔茨海默病模型小鼠脑内病理形态学检测第75-76页
            2.8.1 小鼠心脏灌注取脑第75-76页
            2.8.2 冰冻切片第76页
            2.8.3 尼氏染色第76页
            2.8.4 刚果红染色第76页
            2.8.5 免疫组织化学(荧光)第76页
            2.8.6 免疫组织化学染色(DAB)第76页
        2.9 阿尔茨海默病模型小鼠脑内抗氧化水平检测第76-77页
            2.9.1 脑组织蛋白定量第76-77页
            2.9.2 总超氧化物岐化酶活性检测 (WST 法)第77页
            2.9.3 过氧化氢酶活性检测第77页
            2.9.4 谷胱甘肽还原酶活性检测第77页
            2.9.5 脂质氧化检测第77页
        2.10 阿尔茨海默病模型小鼠脑组织免疫印迹第77-80页
            2.10.1 蛋白 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第77-79页
            2.10.2 蛋白电转移第79-80页
            2.10.3 显影、检测(化学发光法)第80页
        2.11 IMAGE PRO PLUS 6.0 软件分析染色及免疫组化阳性物光密度值第80-81页
        2.12 统计分析第81-82页
结果第82-102页
    3.1 抗氧化及氧化应激 APP/PS1/TAU 小鼠模型的建立第82页
    3.2 氧化应激对小鼠学习认知的影响第82-86页
        3.2.1 氧化应激对模型小鼠水迷宫实验游泳速度及距离的影响第82-83页
        3.2.2 氧化应激对模型小鼠水迷宫定位航行的影响第83-84页
        3.2.3 氧化应激对模型小鼠水迷宫空间探索的影响第84-86页
    3.3 氧化应激对小鼠脑内病理形态学的影响第86-90页
        3.3.1 尼氏染色第86页
        3.3.2 刚果红染色第86-88页
        3.3.3 Aβ免疫组织化学第88-89页
        3.3.4 Tau 蛋白双螺旋丝 AT8 免疫组化第89-90页
    3.4 氧化应激对小鼠脑内相关抗氧化水平的影响第90-97页
        3.4.1 氧化物岐化酶水平第90-92页
        3.4.2 过氧化氢酶水平第92-94页
        3.4.3 谷胱甘肽水平第94-96页
        3.4.4 脂质氧化水平第96-97页
    3.5 氧化应激对小鼠脑 CASPASE 6 表达及 D421 位点 TAU 切割的影响第97-102页
        3.5.1 小鼠脑内 caspase 6 表达第97-99页
        3.5.2 小鼠脑内 Tau C3(tau 蛋白于 D421 位点切割)表达第99-100页
        3.5.3 小鼠脑内 Tau C3 及 caspase 6 共定位第100-102页
讨论第102-109页
总结第109-111页
    一、主要结论第109-110页
    二、研究展望第110-111页
参考文献第111-113页
缩略词表第113-114页
攻读博士学位期间已发表、录用或提交的论文及专利申请第114-117页
致谢第117页

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