| 目录 | 第3-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1. 引言 | 第9-12页 |
| 1.1 糖尿病神经病理性疼痛的表现及其对社会的影响 | 第9页 |
| 1.2 加巴喷丁治疗糖尿病神经病理性疼痛的机制及效果 | 第9页 |
| 1.3 T型钙通道介导糖尿病神经病理性疼痛的产生 | 第9-10页 |
| 1.4 加巴喷丁可能通过蛋白激酶C影响T型钙通道,进而影响其自身镇痛效果 | 第10-11页 |
| 1.5 本课题组加巴喷丁治疗神经病理性疼痛相关前期研究 | 第11-12页 |
| 2. 技术路线 | 第12-13页 |
| 3. 材料和方法 | 第13-25页 |
| 3.1 糖尿病神经病理性疼痛模型 | 第13-15页 |
| 3.1.1 实验动物和材料 | 第13页 |
| 3.1.2 糖尿病模型建立 | 第13-14页 |
| 3.1.3 体重 | 第14页 |
| 3.1.4 机械刺激诱发痛测定 | 第14页 |
| 3.1.5 热刺激诱发痛测定 | 第14-15页 |
| 3.1.6 处死动物及标本 | 第15页 |
| 3.2 总RNA提取 | 第15-17页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 3.2.2 组织总RNA提取 | 第16页 |
| 3.2.3 紫外分光光度仪测定RNA浓度与质量鉴定 | 第16-17页 |
| 3.2.4 琼脂糖电泳测定RNA完整性 | 第17页 |
| 3.3 荧光实时定量PCR测定相关基因cDNA变化 | 第17-20页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 3.3.2 RNA逆转录为cDNA | 第18页 |
| 3.3.3 荧光实时定量PCR | 第18-19页 |
| 3.3.4 荧光实时定量PCR结果分析 | 第19页 |
| 3.3.5 荧光实时定量PCR扩增DNA电泳鉴定 | 第19-20页 |
| 3.4 Western-Blot测定相关蛋白质水平变化 | 第20-25页 |
| 3.4.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 3.4.2 蛋白样品制备 | 第21-22页 |
| 3.4.3 蛋白含量测定 | 第22页 |
| 3.4.4 SDS-PAGE电泳 | 第22-23页 |
| 3.4.5 转膜 | 第23-24页 |
| 3.4.6 封闭 | 第24页 |
| 3.4.7 免疫反应 | 第24页 |
| 3.4.8 化学发光 | 第24页 |
| 3.4.9 图像分析 | 第24-25页 |
| 3.5 统计学方法 | 第25页 |
| 4. 结果 | 第25-56页 |
| 4.1 糖尿病模型的建立及行为学监测 | 第25-27页 |
| 4.1.1 糖尿病模型的建立及体重变化 | 第25-26页 |
| 4.1.2 糖尿病大鼠机械缩足阈值的监测 | 第26页 |
| 4.1.3 糖尿病大鼠热缩足潜伏期的监测 | 第26-27页 |
| 4.2 米贝拉地尔可治疗1型糖尿病大鼠神经病理性疼痛 | 第27-30页 |
| 4.2.1 米贝拉地尔可改善1型糖尿病大鼠机械痛敏 | 第27-28页 |
| 4.2.2 米贝拉地尔可改善1型糖尿病大鼠热痛敏 | 第28-30页 |
| 4.3 加巴喷丁可治疗1型糖尿病大鼠神经病理性疼痛 | 第30-35页 |
| 4.3.1 加巴喷丁治疗并不影响1型糖尿病大鼠体重变化 | 第30页 |
| 4.3.2 加巴喷丁可改善1型糖尿病大鼠机械痛敏 | 第30-33页 |
| 4.3.3 加巴喷丁可改善1型糖尿病大鼠热痛敏 | 第33-35页 |
| 4.4 联合应用加巴喷丁和米贝拉地尔可显著增强加巴喷丁镇痛效果 | 第35-46页 |
| 4.4.1 联合应用加巴喷丁和米贝拉地尔可显著改善1型糖尿病大鼠机械痛敏 | 第35-41页 |
| 4.4.2 联合应用加巴喷丁和米贝拉地尔可显著改善1型糖尿病大鼠热痛敏 | 第41-46页 |
| 4.5 糖尿病建模不成功的大鼠亦出现显著的机械及热痛敏 | 第46-48页 |
| 4.6 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG及脊髓背角内CACNA1H及PKCγ基因mRNA表达量 | 第48-54页 |
| 4.6.1 RNA的提取及质量鉴定 | 第48-49页 |
| 4.6.2 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG内CACNA1H基因mRNA表达量 | 第49页 |
| 4.6.3 加巴喷丁可降低糖尿病神经病理性疼痛大鼠DRG内PKCγ基因mRNA表达量 | 第49-50页 |
| 4.6.4 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠脊髓背角内CACNA1H mRNA表达量 | 第50页 |
| 4.6.5 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠脊髓背角内PKCγ mRNA表达量 | 第50-51页 |
| 4.6.6 Real-Time PCR检测CACNA1H、PKCγ、GAPDH基因扩增结果 | 第51-54页 |
| 4.6.7 1%琼脂糖凝胶电泳检测CACNA1H、PKCγ、GAPDH基因扩增产物 | 第54页 |
| 4.7 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG内Cav3.2及PKCγ蛋白质表达量 | 第54-56页 |
| 4.7.1 蛋白浓度测定 | 第54-55页 |
| 4.7.2 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG内Cav3.2蛋白质表达量 | 第55-56页 |
| 4.7.3 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG内PKCγ蛋白质表达量 | 第56页 |
| 5. 讨论 | 第56-62页 |
| 5.1 糖尿病模型的建立及行为学监测 | 第56-57页 |
| 5.2 米贝拉地尔可改善糖尿病大鼠机械及热痛敏 | 第57页 |
| 5.3 加巴喷丁可改善糖尿病大鼠机械及热痛敏而不影响大鼠体重 | 第57-58页 |
| 5.4 联合加巴喷丁及米贝拉地尔可增强加巴喷丁镇痛效果并延长其作用时间 | 第58-60页 |
| 5.4.1 联合加巴喷丁及米贝拉地尔可增强加巴喷丁对糖尿病大鼠机械痛敏镇痛效果并延长其作用时间 | 第58-59页 |
| 5.4.2 联合加巴喷丁及米贝拉地尔可增强加巴喷丁对糖尿病大鼠热痛敏镇痛效果并延长其作用时间 | 第59-60页 |
| 5.5 糖尿病建模不成功的大鼠亦出现显著的机械及热痛敏 | 第60-61页 |
| 5.6 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG及脊髓背角内CACNA1H及PKCγ基因mRNA表达量 | 第61页 |
| 5.7 加巴喷丁可降低糖尿病大鼠DRG内Cav3.2及PKCγ蛋白质表达量 | 第61-62页 |
| 6. 结论 | 第62-63页 |
| 7. 参考文献 | 第63-66页 |
| 英文缩略词表 | 第66-68页 |
| 综述 | 第68-78页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
