注射用重组改构人肿瘤坏死因子（rmh-TNF）发酵生产工艺的优化
| 摘要 | 第2-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 第一章 综述 | 第8-13页 |
| 1.1 文献综述 | 第8-12页 |
| 1.2 本课题的主要研究内容及研究思路 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-35页 |
| 2.1 材料 | 第13-23页 |
| 2.1.1 出发菌株 | 第13页 |
| 2.1.2 主要药品和试剂 | 第13-14页 |
| 2.1.3 主要仪器和设备 | 第14-15页 |
| 2.1.4 主要培养基和缓冲液 | 第15-23页 |
| 2.2 方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 种子批建立、传代及保存 | 第23页 |
| 2.2.2 菌种检定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 一级种子培养方法 | 第25页 |
| 2.2.4 摇瓶发酵培养方法 | 第25-26页 |
| 2.2.5 二级种子培养方法 | 第26页 |
| 2.2.6 发酵罐培养方法 | 第26页 |
| 2.2.7 发酵液离心的方法 | 第26页 |
| 2.2.8 菌体洗涤的方法 | 第26页 |
| 2.2.9 菌体破碎的方法 | 第26-27页 |
| 2.2.10 菌体浓度的测定 | 第27页 |
| 2.2.11 菌体干重的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.12 pH值的测定 | 第28页 |
| 2.2.13 目的蛋白占菌体总蛋白的百分含量测定 | 第28-30页 |
| 2.2.14 革兰氏染色法 | 第30-31页 |
| 2.2.15 免疫印迹法 | 第31-32页 |
| 2.2.16 质粒丢失率检查法 | 第32页 |
| 2.2.17 Lowry法测定蛋白含量 | 第32-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-54页 |
| 3.1 菌种 | 第35-39页 |
| 3.1.1 划种LB琼脂平板 | 第35页 |
| 3.1.2 涂片革兰氏染色 | 第35-36页 |
| 3.1.3 对抗生素的抗性 | 第36-37页 |
| 3.1.4 电镜检查 | 第37页 |
| 3.1.5 生化反应 | 第37-38页 |
| 3.1.6 目的蛋白占菌体总蛋白的百分含量 | 第38页 |
| 3.1.7 表达的改构肿瘤坏死因子型别 | 第38-39页 |
| 3.1.8 质粒检查 | 第39页 |
| 3.1.9 质粒丢失率检查 | 第39页 |
| 3.2 工艺控制参数的优化 | 第39-45页 |
| 3.2.1 诱导时机的优化 | 第39-41页 |
| 3.2.2 诱导维持时间的优化 | 第41-42页 |
| 3.2.3 pH值的确认验证 | 第42-43页 |
| 3.2.4 溶解氧的确认验证 | 第43-44页 |
| 3.2.5 参数优化条件下的实验结果 | 第44-45页 |
| 3.3 补料工艺的优化 | 第45-54页 |
| 3.3.1 补料方式的优化讨论 | 第45-46页 |
| 3.3.2 补料处方的优化 | 第46-48页 |
| 3.3.3 补料时机的的确认验证 | 第48-49页 |
| 3.3.4 补料优化条件下的实验结果 | 第49-51页 |
| 3.3.5 补料与未补料对比讨论 | 第51-54页 |
| 第四章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 4.1 结论 | 第54页 |
| 4.2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第59-61页 |
