摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
中英文缩略表 | 第13-18页 |
引言 | 第18-23页 |
第一部分 miR-483在PCOS卵巢皮质中的表达及其对人卵巢颗粒细胞的影响 | 第23-47页 |
1.1 前言 | 第23-25页 |
1.2 材料与方法 | 第25-39页 |
1.2.1 主要仪器及耗材 | 第25页 |
1.2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
1.2.3 基本溶液的配制 | 第26-28页 |
1.2.4 卵巢组织样本提取及处理 | 第28-30页 |
1.2.5 细胞培养 | 第30-31页 |
1.2.6 细胞转染 | 第31-32页 |
1.2.7 mRNA提取 | 第32-33页 |
1.2.8 miRNA的qRT-PCR | 第33-35页 |
1.2.9 细胞活性检测 | 第35页 |
1.2.10 集落形成实验 | 第35页 |
1.2.11 细胞周期检测 | 第35-36页 |
1.2.12 蛋白免疫印迹法 | 第36-39页 |
1.2.13 统计分析 | 第39页 |
1.3 结果 | 第39-44页 |
1.3.1 PCOS患者的基本情况和内分泌的测定 | 第39-40页 |
1.3.2 miR-483异常表达对KGN细胞增殖的影响 | 第40-42页 |
1.3.3 miR-483异常表达对KGN细胞周期的影响 | 第42-44页 |
1.4 讨论 | 第44-46页 |
1.5 小结 | 第46-47页 |
第二部分 IGFI对人卵巢颗粒细胞的影响 | 第47-65页 |
2.1 前言 | 第47-48页 |
2.2 材料与方法 | 第48-58页 |
2.2.1 主要仪器及耗材 | 第49-50页 |
2.2.2 主要试剂 | 第50-51页 |
2.2.3 基本溶液的配制 | 第51页 |
2.2.4 卵巢皮质组织样本提取及处理 | 第51-52页 |
2.2.5 细胞培养 | 第52页 |
2.2.6 报告基因载体构建 | 第52-56页 |
2.2.7 pmirGLO-IGF1 3'UTR突变体的构建 | 第56页 |
2.2.8 细胞转染 | 第56页 |
2.2.9 荧光素酶活性检测 | 第56-57页 |
2.2.10 qRT PCR | 第57页 |
2.2.11 细胞活性检测 | 第57页 |
2.2.12 集落形成实验 | 第57页 |
2.2.13 蛋白免疫印迹法检测 | 第57页 |
2.2.14 统计分析 | 第57-58页 |
2.3 结果 | 第58-62页 |
2.3.1 IGF1是miR-483的靶基因 | 第58-60页 |
2.3.2 IGF1促进KGN细胞的增殖 | 第60-62页 |
2.4 讨论 | 第62-64页 |
2.5 小结 | 第64-65页 |
第三部分胰岛素对人卵巢颗粒细胞的影响 | 第65-81页 |
3.1 前言 | 第65-67页 |
3.2 材料与方法 | 第67-76页 |
3.2.1 主要仪器及耗材 | 第67-68页 |
3.2.2 主要试剂 | 第68-69页 |
3.2.3 基本溶液的配制 | 第69-70页 |
3.2.4 细胞培养 | 第70-71页 |
3.2.5 胰岛素处理细胞 | 第71页 |
3.2.6 RNA提取 | 第71-73页 |
3.2.7 qRT-PCR | 第73-75页 |
3.2.8 细胞活性检测 | 第75页 |
3.2.9 集落形成实验 | 第75-76页 |
3.2.10 统计分析 | 第76页 |
3.3 结果 | 第76-78页 |
3.3.1 胰岛素对KGN细胞的影响 | 第76-78页 |
3.4 讨论 | 第78-80页 |
3.5 小结 | 第80-81页 |
全文结论 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-94页 |
综述 | 第94-110页 |
参考文献 | 第103-110页 |
个人简历 | 第110-111页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第111-112页 |
致谢 | 第112页 |