| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.1 甜瓜及甜瓜霜霉病 | 第12-13页 |
| 1.1.1 甜瓜的营养价值及分类 | 第12页 |
| 1.1.2 甜瓜霜霉病发病症状 | 第12-13页 |
| 1.1.3 甜瓜霜霉病病原菌形态特征 | 第13页 |
| 1.2 甜瓜霜霉病传播途径及发病条件 | 第13-14页 |
| 1.3 抗霜霉病相关研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 抗霜霉病相关生理生化研究 | 第14-15页 |
| 1.3.2 抗霜霉病基因的克隆 | 第15页 |
| 1.3.3 抗霜霉病基因的分子标记研究进展及精细定位 | 第15-16页 |
| 1.4 抗霜霉病基因的转化 | 第16-21页 |
| 1.4.1 标记基因转化进展 | 第16-18页 |
| 1.4.2 无选择标记转基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.3 无选择标记转基因安全研究进展 | 第20-21页 |
| 1.5 抗霜霉病基因的检测和功能验证 | 第21-26页 |
| 1.5.1 抗霜霉病基因的分子检测 | 第21-22页 |
| 1.5.2 抗霜霉病基因的生理生化检测 | 第22-26页 |
| 1.6 实验室接种霜霉病病原菌 | 第26页 |
| 1.7 研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 甜瓜抗霜霉病转基因植株的遗传转化 | 第27-34页 |
| 2.1 材料和试剂仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株 | 第27页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 培养基 | 第28页 |
| 2.2 实验表达载体及菌株 | 第28页 |
| 2.3 主要仪器和设备 | 第28-29页 |
| 2.4 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.4.1 重组质粒检测 | 第29-30页 |
| 2.4.2 农杆菌介导甜瓜抗霜霉病基因的转化 | 第30-31页 |
| 2.5 结果分析 | 第31-32页 |
| 2.5.1 农杆菌检测重组质粒 | 第31页 |
| 2.5.2 农杆菌介导法转化甜瓜 | 第31-32页 |
| 2.6 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 甜瓜抗霜霉病基因的分子检测 | 第34-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第34页 |
| 3.2 主要试剂和仪器 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.3.1 转基因幼苗基因组小量提取 | 第34页 |
| 3.3.2 甜瓜转基因幼苗基因组 At2 基因 PCR 检测 | 第34-35页 |
| 3.3.3 甜瓜总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| 3.3.4 cDNA 的合成 | 第36页 |
| 3.3.5 甜瓜转基因幼苗基因组 RT‐PCR | 第36页 |
| 3.3.6 甜瓜转基因幼苗基因组荧光定量 PCR 反应( q RT‐PCR) | 第36-37页 |
| 3.3.7 数据分析 | 第37页 |
| 3.4 结果统计与分析 | 第37-41页 |
| 3.4.1 转化植株基因组提取 | 第37-38页 |
| 3.4.2 两种 At2 甜瓜抗霜霉病转基因植株 PCR 检测 | 第38-39页 |
| 3.4.3 甜瓜转基因植株转化率分析 | 第39-41页 |
| 3.5 两种转基因甜瓜总 RNA 的提取 | 第41-42页 |
| 3.6 两种转基因甜瓜 RT‐PCR 分析 | 第42页 |
| 3.7 转基因甜瓜 q RT‐PCR 检测 | 第42-43页 |
| 3.8 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 甜瓜抗霜霉病转基因植株生理生化指标检测 | 第45-53页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 反应粗酶液的制备 | 第45页 |
| 4.3.2 蛋白含量标定 | 第45-46页 |
| 4.3.3 SGT 含量的测定 | 第46页 |
| 4.3.4 过氧化氢酶(CAT)含量测定 | 第46页 |
| 4.3.5 SOD 活性检测 | 第46-47页 |
| 4.3.6 过氧化氢含量检测 | 第47页 |
| 4.4 数据处理 | 第47-48页 |
| 4.5 结果分析 | 第48-52页 |
| 4.5.1 SGT 含量测定 | 第48页 |
| 4.5.2 CAT 含量分析 | 第48-49页 |
| 4.5.3 SOD 含量测定 | 第49-50页 |
| 4.5.4 H_2O_2含量分析 | 第50-51页 |
| 4.5.5 氧自由基含量检测 | 第51-52页 |
| 4.6 讨论 | 第52-53页 |
| 第五章 甜瓜抗霜霉病转基因植株抗病性检测 | 第53-59页 |
| 5.1 实验材料 | 第53页 |
| 5.2 霜霉病病原菌来源 | 第53页 |
| 5.3 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.3.1 甜瓜抗霜霉病形态学鉴定 | 第53页 |
| 5.3.2 甜瓜抗霜霉病转基因植株的病原菌抗性鉴定 | 第53-54页 |
| 5.4 结果与分析 | 第54-57页 |
| 5.4.1 霜霉病病原菌检测 | 第54-55页 |
| 5.4.2 霜霉病孢子复活接种 | 第55页 |
| 5.4.3 转基因甜瓜叶片抗性实验 | 第55-57页 |
| 5.5 讨论 | 第57-59页 |
| 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 在读期间发表论文 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
