| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩写-中文对照表 | 第14-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-26页 |
| 1 研究背景 | 第15页 |
| 2 小鼠超数排卵的研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 不同激素剂量对小鼠超数排卵的影响 | 第15-16页 |
| 2.2 小鼠不同发情状态对超数排卵的影响 | 第16-17页 |
| 2.2.1 小鼠各发情阶段的划分 | 第16页 |
| 2.2.2 小鼠不同发情状态对超排效果的影响 | 第16-17页 |
| 3 MicroRNA的研究概述 | 第17-20页 |
| 3.1 microRNA的起源与加工成熟 | 第17-18页 |
| 3.2 microRNA的调控机理 | 第18-19页 |
| 3.3 microRNA-145的研究进展 | 第19-20页 |
| 4 MicroRNA的分子生物学研究方法 | 第20-22页 |
| 4.1 microRNA表达分析的方法 | 第21页 |
| 4.2 microRNA体内外水平的过表达及抑制表达研究 | 第21-22页 |
| 4.3 体外验证microRNA作用的靶基因 | 第22页 |
| 5 MicroRNA表达的干预方法 | 第22-24页 |
| 5.1 microRNA慢病毒过表达系统 | 第22-23页 |
| 5.2 化学合成的microRNA mimics | 第23页 |
| 5.3 真核系统过表达载体——非病毒表达载体 | 第23-24页 |
| 6 实时荧光定量PCR技术及其应用 | 第24-25页 |
| 6.1 real-time PCR技术的原理 | 第24页 |
| 6.2 利用real-timePCR技术的检测microRNA表达 | 第24-25页 |
| 6.3 real-time PCR技术的应用 | 第25页 |
| 7 研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二部分 实验部分 | 第26-49页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 第一章 影响昆白小鼠超数排卵的研究 | 第27-33页 |
| 1.1 材料与方法 | 第27-30页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第27页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第27页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第27页 |
| 1.1.4 主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 1.1.5 试验方法 | 第28-29页 |
| 1.1.5.1 发情周期判断 | 第28-29页 |
| 1.1.5.2 小鼠超数排卵 | 第29页 |
| 1.1.5.3 小鼠合子收集 | 第29页 |
| 1.1.6 试验设计 | 第29页 |
| 1.1.6.1 试验一：不同激素剂量组合对小鼠超数排卵及胚胎发育的影响 | 第29页 |
| 1.1.6.2 实验二：不同发情状态对小鼠超数排卵及胚胎发育的影响 | 第29页 |
| 1.1.7 数据处理 | 第29-30页 |
| 1.2 结果与分析 | 第30-31页 |
| 1.2.1 不同激素剂量组合对小鼠超数排卵及胚胎发育的影响 | 第30-31页 |
| 1.2.2 不同发情状态对小鼠超数排卵及胚胎发育的影响 | 第31页 |
| 1.3 讨论 | 第31-32页 |
| 1.4 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 小鼠植入前胚胎中microRNA-145表达检测及靶基因预测分析 | 第33-42页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-36页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第33页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第33页 |
| 2.1.4 试验方法 | 第33-36页 |
| 2.1.4.1 小鼠胚胎mRNA的抽提 | 第33-34页 |
| 2.1.4.2 小鼠胚胎microRNA抽提 | 第34-35页 |
| 2.1.4.3 引物设计与合成 | 第35页 |
| 2.1.4.4 microRNA-145的实时荧光定量PCR检测 | 第35-36页 |
| 2.1.4.5 Oct4、Sox2基因的实时荧光定量PCR检测 | 第36页 |
| 2.1.4.6 microRNA-145靶基因预测 | 第36页 |
| 2.1.5 统计分析 | 第36页 |
| 2.2 结果与分析 | 第36-40页 |
| 2.2.1 SYBR Green I real-time PCR熔解曲线的建立与分析 | 第36-38页 |
| 2.2.2 microRNA-145在小鼠植入前胚胎中的表达变化 | 第38页 |
| 2.2.3 microRNA-145靶基因预测 | 第38-39页 |
| 2.2.4 Oct4在小鼠2细胞胚胎和囊胚中的表达差异 | 第39-40页 |
| 2.2.5 Sox2在小鼠2细胞胚胎和囊胚中的表达差异 | 第40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-41页 |
| 2.4 小结 | 第41-42页 |
| 第三章 小鼠植入前胚胎中microRNA-145功能的研究 | 第42-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第42页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第42-43页 |
| 3.1.4 试验方法 | 第43-44页 |
| 3.1.4.1 microRNA-145过表达载体的构建 | 第43页 |
| 3.1.4.2 质粒DNA中提 | 第43-44页 |
| 3.1.4.3 受精卵原核显微注射 | 第44页 |
| 3.1.4.4 注射microRNA-145过表达载体对小鼠植入前胚胎发育的影响 | 第44页 |
| 3.1.4.5 小鼠植入前胚胎中microRNA-145的表达检测 | 第44页 |
| 3.1.4.6 过表达microRNA-145胚胎中Oct4、Sox2基因的表达检测 | 第44页 |
| 3.1.5 统计分析 | 第44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-47页 |
| 3.2.1 microRNA-145过表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 3.2.2 注射microRNA-145过表达载体对小鼠植入前胚胎发育的影响 | 第45-46页 |
| 3.2.3 小鼠植入前胚胎中microRNA-145表达的检测 | 第46-47页 |
| 3.2.4 过表达microRNA-145胚胎中Oct4、Sox2基因表达的检测 | 第47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第57页 |
