| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 中英文对照及英文縮写词表 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 引言 | 第9-13页 |
| 1.1 DC-SIGN的结构、分布及其配体特异性 | 第9-10页 |
| 1.1.1 DC-SIGN的结构 | 第9-10页 |
| 1.1.2 DC-SIGN的分布 | 第10页 |
| 1.1.3 DC-SIGN的配体特异性 | 第10页 |
| 1.2 DC-SIGN的功能 | 第10页 |
| 1.3 DC-SIGN介导的细胞信号通路 | 第10-12页 |
| 1.3.1 甘露糖型配体所引发的DC-SIGN介导的细胞信号通路 | 第11-12页 |
| 1.3.2 岩藻糖型配体所引发的DC-SIGN介导的细胞信号通路 | 第12页 |
| 1.3.3 LSP1在细胞信号通路中的作用 | 第12页 |
| 1.4 立题依据与研究思路 | 第12-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-25页 |
| 2.1 试剂和主要实验材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 抗体及试剂 | 第13页 |
| 2.1.2 实验材料 | 第13-15页 |
| 2.2 仪器 | 第15-16页 |
| 2.3 实验方法 | 第16-25页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第16页 |
| 2.3.2 流式细胞术 | 第16页 |
| 2.3.3 RT-PCR及产物回收实验 | 第16-18页 |
| 2.3.4 重组子连接及转化实验 | 第18-19页 |
| 2.3.5 质粒提取及双酶切实验 | 第19页 |
| 2.3.6 病毒载体的构建及慢病毒侵染 | 第19-21页 |
| 2.3.7 Western Blot方法 | 第21-22页 |
| 2.3.8 Co-IP | 第22-25页 |
| 3 实验结果 | 第25-35页 |
| 3.1 DC-SIGN真核表达载体的构建 | 第25-28页 |
| 3.1.1 PCR获得DC-SIGN基因片段 | 第25页 |
| 3.1.2 DC-SIGN和pWPXLd的双酶切与连接 | 第25-26页 |
| 3.1.3 重组载体菌液PCR鉴定 | 第26页 |
| 3.1.4 重组载体双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| 3.1.5 重组载体测序鉴定 | 第27-28页 |
| 3.2 LSP1真核表达载体的构建 | 第28-32页 |
| 3.2.1 PCR获得LSP1全长基因片段(pEASY-LSP1的构建) | 第28-29页 |
| 3.2.2 LSP1和pWPXLd的双酶切与连接 | 第29-30页 |
| 3.2.3 重组载体菌液PCR鉴定 | 第30页 |
| 3.2.4 重组载体双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 3.2.5 重组载体测序鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 构建U937-DC-SIGN-LSP1稳转细胞系 | 第32-34页 |
| 3.3.1 pWPXLd-DC-SIGN侵染后的U937表达DC-SIGN | 第32页 |
| 3.3.2 DC-SIGN胞浆尾部与LSP1相互作用 | 第32-33页 |
| 3.3.3 U937-DC-SIGN-LSP1过表达LSP1 | 第33-34页 |
| 3.4 岩藻糖型配体Le~x引发PKCβI和ERK1/2的活化 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 4.1 构建U937-DC-SIGN-LSP1稳转细胞系的意义 | 第35页 |
| 4.2 PKCβI和ERK1/2参与岩藻糖型配体引发的DC-SIGN介导的信号通路 | 第35-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39页 |
