| 英文缩略词对照(Abbreviation) | 第7-9页 |
| 摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-18页 |
| 1.前言 | 第19-21页 |
| 实验一 β-榄香烯对结肠癌移植瘤裸鼠的治疗作用 | 第21-29页 |
| 2.材料与方法 | 第21-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 实验用细胞株 | 第21页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.3 实验药物 | 第21页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.2 结肠癌裸鼠模型建立与分组 | 第23页 |
| 2.2.3 制作石蜡切片 | 第23-24页 |
| 2.2.4 HE染色 | 第24页 |
| 2.2.5 TUNEL染色 | 第24页 |
| 2.2.6 免疫组化染色检测Ki-67,Cleavedcaspase-3和LC3B蛋白的表达 | 第24-25页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第25页 |
| 3.实验结果 | 第25-29页 |
| 3.1 裸鼠的一般状态和肿瘤生长情况 | 第25页 |
| 3.2 β-榄香烯对HT-29移植瘤裸鼠的体内毒性评价 | 第25-26页 |
| 3.3 β-榄香烯对HT-29移植瘤裸鼠增殖能力的影响 | 第26-28页 |
| 3.4 β-榄香烯对裸鼠HT-29移植瘤凋亡和自噬的影响 | 第28-29页 |
| 实验二 β-榄香烯对结直肠癌系细胞株DLD-1和HT-29的作用 | 第29-51页 |
| 2.材料与方法 | 第29-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 实验用细胞株 | 第29页 |
| 2.1.2 实验药物 | 第29-30页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第30页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第30-31页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第32页 |
| 2.2.2 MTS法检测β-榄香烯对细胞活力的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.3 克隆形成实验 | 第33页 |
| 2.2.4 细胞周期检测 | 第33页 |
| 2.2.5 Hoechst33342染色实验 | 第33页 |
| 2.2.6 AnnexinV/PI双染法检测细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻 | 第33-34页 |
| 2.2.7 JC-1染色检测细胞线粒体膜电位 | 第34页 |
| 2.2.8 AO染色检测酸性细胞器的产生 | 第34页 |
| 2.2.9 透射电镜观察凋亡和自噬体的形成 | 第34页 |
| 2.2.10 DCFH-DA荧光染色检测细胞ROS水平 | 第34-35页 |
| 2.2.11 Western blot 法检测 DLD-1 和 HT-29 细胞 Cleaved Caspase-3,Caspase-3、Cleaved Caspase-9,Caspase-9,Cleaved PARP,PARP,LC3B,SQSTM1,p-AMPK,AMPK,p-m TOR 和 m TOR 蛋白表达水平 | 第35-38页 |
| 2.2.12 统计学处理 | 第38页 |
| 3.实验结果 | 第38-51页 |
| 3.1 β-榄香烯对结直肠癌细胞增殖能力的影响 | 第38-41页 |
| 3.1.1 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞形态和活力的影响 | 第38-39页 |
| 3.1.2 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞克隆形成能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.3 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞周期的影响 | 第40-41页 |
| 3.2 β-榄香烯对结直肠癌细胞凋亡的影响 | 第41-46页 |
| 3.2.1 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞核的影响 | 第41-42页 |
| 3.2.2 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞磷脂酰丝氨酸外翻的影响 | 第42-43页 |
| 3.2.3 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞线粒体膜电位的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.4 透射电镜观察β-榄香烯对HT-29细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.5 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞凋亡相关蛋白CleavedCaspase-3,Caspase-3,CleavedCaspase-9,Caspase-9,CleavedPARP和PARP蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.3 β-榄香烯对结直肠癌细胞自噬的影响 | 第46-48页 |
| 3.3.1 β-榄香烯对HT-29细胞酸性细胞器的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.2 透射电镜观察β-榄香烯对HT-29细胞自噬体的形成 | 第47页 |
| 3.3.3 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞自噬相关蛋白LC3B和SQSTM1蛋白表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞内ROS水平的影响 | 第48-50页 |
| 3.5 β-榄香烯对DLD-1和HT-29细胞p-AMPK,AMPK,p-mTOR和mTOR蛋白表达的影响 | 第50-51页 |
| 4.讨论 | 第51-54页 |
| 5.结论 | 第54-55页 |
| 6.参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 综述：β-榄香烯抗肿瘤作用机制研究进展 | 第63-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
