摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 文献综述 | 第10-16页 |
1.1 Sox基因家族研究概况 | 第10页 |
1.2 Sox基因的特点 | 第10-11页 |
1.3 Sox基因的功能 | 第11-13页 |
1.4 Sox3和Sox5基因的研究进展 | 第13-15页 |
1.4.1 Sox3基因的研究进展 | 第13-15页 |
1.4.2 Sox5基因的研究进展 | 第15页 |
1.5 研究目的和意义 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-30页 |
2.1 实验材料 | 第16-19页 |
2.1.1 实验动物 | 第16-17页 |
2.1.2 实验仪器 | 第17页 |
2.1.3 试剂及主要试剂的配制 | 第17-19页 |
2.1.3.1 本实验所用的试剂 | 第17-18页 |
2.1.3.2 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-28页 |
2.2.1 中国大鲵总RNA提取 | 第19-20页 |
2.2.2 中国大鲵总DNA提取 | 第20页 |
2.2.3 普通反转录 | 第20-21页 |
2.2.4 5'RACE反转录 | 第21-23页 |
2.2.5 引物设计 | 第23页 |
2.2.6 中国大鲵Sox3基因的克隆 | 第23-26页 |
2.2.6.1 中国大鲵Sox3基因cDNA和DNA扩增 | 第23-24页 |
2.2.6.2 PCR产物回收 | 第24-25页 |
2.2.6.3 连接反应 | 第25页 |
2.2.6.4 转化筛选及送测 | 第25-26页 |
2.2.7 中国大鲵Sox5基因克隆 | 第26-27页 |
2.2.7.1 中国大鲵Sox5基因部分片段克隆 | 第26页 |
2.2.7.2 中国大鲵Sox5基因5'RACE克隆 | 第26-27页 |
2.2.8 序列分析 | 第27-28页 |
2.3 中国大鲵Sox3和Sox5基因在各组织中的表达 | 第28-30页 |
2.3.1 荧光定量PCR引物设计 | 第28页 |
2.3.2 荧光定量引物检测 | 第28-29页 |
2.3.3 最适退火温度选择 | 第29页 |
2.3.4 标准曲线的制作 | 第29-30页 |
2.3.5 荧光定量PCR检测Sox3和Sox5基因表达情况 | 第30页 |
2.3.6 数据分析 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-46页 |
3.1 中国大鲵总RNA的提取和总DNA提取 | 第30-31页 |
3.1.1 中国大鲵总RNA提取 | 第30-31页 |
3.1.2 中国大鲵总DNA提取 | 第31页 |
3.2 中国大鲵Sox3和Sox5基因的PCR扩增结果 | 第31-33页 |
3.2.1 中国大鲵Sox3基因cDNA和DNA克隆 | 第31-32页 |
3.2.2 中国大鲵Sox5基因部分片断克隆 | 第32页 |
3.2.3 中国大鲵Sox5基因5'RACE的克隆结果 | 第32-33页 |
3.3 中国大鲵Sox3、Sox5基因蛋白质序列分析 | 第33-35页 |
3.4 中国大鲵Sox3和Sox5基因氨基酸序列分析 | 第35-36页 |
3.5 中国大鲵Sox3和Sox5基因蛋白的氨基酸多序列比对分析 | 第36-38页 |
3.5.1 中国大鲵Sox3基因的氨基酸多序列比对分析 | 第36-37页 |
3.5.2 中国大鲵Sox5基因的氨基酸多序列比对分析 | 第37-38页 |
3.6 中国大鲵Sox3和Sox5基因序列相似性分析 | 第38-40页 |
3.6.1 Sox3基因序列相似性分析 | 第39页 |
3.6.2 Sox5基因序列相似性分析 | 第39-40页 |
3.7 中国大鲵Sox3和Sox5基因蛋白质序列进化树构建 | 第40-44页 |
3.7.1 Sox3蛋白序列进化树的构建 | 第40-41页 |
3.7.2 Sox5蛋白序列进化树的构建 | 第41-42页 |
3.7.3 Sox基因家族进化树的构建 | 第42-44页 |
3.8 中国大鲵Sox3,Sox5基因的组织表达分析 | 第44-46页 |
3.8.1 中国大鲵β-actin、Sox3、Sox5基因q-PCR标准曲线 | 第44-45页 |
3.8.2 中国大鲵Sox3和Sox5基因各组织的差异表达 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 中国大鲵Sox3基因的序列分析 | 第46-47页 |
4.2 中国大鲵Sox5基因的序列分析 | 第47页 |
4.3 Sox基因家族进化分析 | 第47-48页 |
4.4 中国大鲵Sox3和Sox5基因的组织表达分析 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附表 | 第58-60页 |