摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩略词 | 第9-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 猪胸膜肺炎放线杆菌流行现状 | 第12-13页 |
1.1 猪传染性胸膜肺炎 | 第12页 |
1.2 猪胸膜肺炎放线杆菌流行病学 | 第12-13页 |
2 猪胸膜肺炎放线杆菌致病机制研究 | 第13-16页 |
2.1 致病机制研究进展 | 第13-14页 |
2.2 毒力因子研究进展 | 第14-16页 |
2.2.1 细菌黏附相关毒力因子 | 第14页 |
2.2.2 诱导组织损伤相关毒力因子 | 第14-15页 |
2.2.3 免疫逃逸相关毒力因子 | 第15-16页 |
3 胸膜肺炎放线杆菌与感染宿主的研究 | 第16-17页 |
3.1 猪胸膜肺炎放线杆菌体内代谢研究 | 第16-17页 |
3.2 宿主抗感染机制研究 | 第17页 |
4 RNA-seq测序技术应用 | 第17-18页 |
4.1 无参及有参物种的转录分析 | 第18页 |
4.3 病原与宿主互作研究 | 第18页 |
5 研究的目的与意义 | 第18-20页 |
第二章 猪胸膜肺炎放线杆菌7型小鼠感染模型的建立 | 第20-34页 |
1 材料与方法 | 第20-25页 |
1.1 实验菌株与实验动物 | 第20页 |
1.2 实验试剂及实验仪器 | 第20-21页 |
1.3 主要培养基及试剂的配制 | 第21-22页 |
1.4 猪胸膜肺炎放线杆菌荧光定量PCR方法的建立 | 第22-23页 |
1.4.1 引物的设计及标准曲线的构建 | 第22-23页 |
1.4.2 特异性与重复性验证 | 第23页 |
1.5 不同感染途径小鼠感染模型的建立 | 第23-25页 |
1.5.1 猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌株生长曲线的测定 | 第23页 |
1.5.2 猪胸膜肺炎放线杆菌感染小鼠LD_(50)的测定 | 第23-24页 |
1.5.3 两种感染方式感染小鼠模型的建立 | 第24页 |
1.5.4 小鼠各器官菌含量的测定 | 第24页 |
1.5.5 小鼠滴鼻感染模型的优化 | 第24-25页 |
2 结果 | 第25-32页 |
2.1 猪胸膜肺炎放线杆菌荧光定量PCR方法的建立 | 第25-26页 |
2.2 猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌株生长曲线的测定 | 第26-27页 |
2.3 猪胸膜肺炎放线杆菌7型菌株小鼠LD_(50)的测定 | 第27-28页 |
2.4 不同感染途径小鼠感染模型的建立 | 第28-30页 |
2.4.1 两种感染途径感染小鼠不同组织不同时间菌含量 | 第28-29页 |
2.4.2 小鼠组织病理学变化观察 | 第29-30页 |
2.5 小鼠滴鼻感染模型的优化 | 第30-32页 |
3 讨论 | 第32-33页 |
4 小结 | 第33-34页 |
第三章 猪胸膜肺炎放线杆菌7型感染小鼠互作分析 | 第34-51页 |
1 材料与方法 | 第34-37页 |
1.1 实验菌株 | 第34页 |
1.2 实验试剂及测序平台 | 第34-35页 |
1.3 测序样品的准备 | 第35页 |
1.4 样品RNA的抽提与反转录 | 第35页 |
1.5 文库构建及测序 | 第35-36页 |
1.6 差异表达基因的筛选及功能注释 | 第36页 |
1.7 qRT-PCR验证RNA-seq测序结果 | 第36-37页 |
2 结果 | 第37-48页 |
2.1 感染小鼠临床症状及剖解变化 | 第37-38页 |
2.2 测序样品及转录组文库质量评估 | 第38页 |
2.3 构建样品cDNA文库 | 第38-39页 |
2.4 基因差异表达及富集分析 | 第39-44页 |
2.5 猪胸膜肺炎放线杆菌7型差异表达基因功能分析 | 第44-45页 |
2.5.1 代谢相关基因的高表达 | 第44-45页 |
2.5.2 抑制主要毒力因子的表达 | 第45页 |
2.6 小鼠免疫应答激活情况分析 | 第45-47页 |
2.6.1 激活抗原识别及免疫应答信号通路 | 第45-47页 |
2.6.2 启动细胞因子瀑布级联 | 第47页 |
2.7 qRT-PCR验证 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
4 小结 | 第50-51页 |
全文总结 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
附录 | 第60-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第68页 |