| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 柑橘产业发展的现状 | 第12页 |
| 1.2 桔小实蝇研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 桔小实蝇的生物学特性 | 第12页 |
| 1.2.2 桔小实蝇防治研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.3 桔小实蝇抗性的研究进展及机理 | 第14页 |
| 1.3 细胞色素P450研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 细胞色素P450的分布和生物学特性 | 第14页 |
| 1.3.2 细胞色素P450与昆虫抗药性的关系 | 第14-15页 |
| 1.4 钠离子通道研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4.1 钠离子通道生物学特性 | 第15页 |
| 1.4.2 钠离子通道与昆虫抗药性的关系 | 第15-16页 |
| 1.5 RNA干扰的研究进展 | 第16-20页 |
| 1.5.1 RNA干扰的发现 | 第16页 |
| 1.5.2 RNA干扰的分子机制 | 第16-18页 |
| 1.5.3 RNA干扰的特点 | 第18页 |
| 1.5.4 RNA干扰的应用 | 第18-20页 |
| 1.6 农杆菌介导的植物遗传转化研究进展 | 第20-22页 |
| 第二章 引言 | 第22-26页 |
| 2.1 研究的目的与意义 | 第22页 |
| 2.2 主要研究内容 | 第22-24页 |
| 2.3 主要技术路线 | 第24-26页 |
| 第三章 钠离子通道基因RNA干扰载体的构建 | 第26-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 3.1.1 供试虫源 | 第26页 |
| 3.1.2 干扰表达载体 | 第26页 |
| 3.1.3 实验试剂和培养基 | 第26-27页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 3.2 目的片段的克隆 | 第28-33页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第28页 |
| 3.2.2 桔小实蝇总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3.2.3 SMARTRACE全长cDNA的合成 | 第29-30页 |
| 3.2.4 目的片段的克隆及回收纯化 | 第30-31页 |
| 3.2.5 目的片段与质粒的体外连接 | 第31页 |
| 3.2.6 重组质粒的转化 | 第31-32页 |
| 3.2.7 重组质粒的提取 | 第32-33页 |
| 3.3 RNA干扰表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 3.3.1 载体PFGC5941-C1R1/C2R2的构建 | 第33-34页 |
| 3.3.2 农杆菌转化 | 第34-36页 |
| 3.4 结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.4.1 目的片段的克隆 | 第36-37页 |
| 3.4.2 RNA干扰表达载体的构建 | 第37-41页 |
| 3.5 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 细胞色素P450基因RNA干扰载体的构建 | 第42-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.2 目的片段的克隆 | 第42-43页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第42页 |
| 4.2.2 RNA的提取和cDNA的合成 | 第42页 |
| 4.2.3 目的片段的克隆及回收纯化 | 第42-43页 |
| 4.2.4 目的片段与质粒的连接 | 第43页 |
| 4.2.5 重组质粒的转化和提取 | 第43页 |
| 4.3 RNA干扰表达载体的构建 | 第43页 |
| 4.4 结果与分析 | 第43-45页 |
| 4.4.1 目的片段的克隆 | 第43-44页 |
| 4.4.2 RNA干扰载体的构建 | 第44-45页 |
| 4.5 讨论 | 第45-48页 |
| 第五章 农杆菌介导的锦橙外植体转化 | 第48-56页 |
| 5.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.1.1 供试柑橘 | 第48页 |
| 5.1.2 实验试剂和培养基 | 第48页 |
| 5.2 试验方法 | 第48-52页 |
| 5.2.1 外植体的准备 | 第48-49页 |
| 5.2.2 制备农杆菌侵染液 | 第49页 |
| 5.2.3 外植体的转化 | 第49页 |
| 5.2.4 转基因锦橙的再生与初步鉴定 | 第49-52页 |
| 5.3 结果与分析 | 第52-54页 |
| 5.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第六章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 | 第66-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 发表论文和参研项目 | 第72页 |
| 发表论文 | 第72页 |
| 参加课题 | 第72页 |