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铜绿假单胞菌中c-di-GMP调控MapZ与CheR1相互作用的结构学研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
符号说明第10-11页
第一章 前言第11-18页
    1.1 铜绿假单胞菌第11-13页
        1.1.1 铜绿假单胞菌的简介第11-12页
        1.1.2 生物被膜第12-13页
        1.1.3 细菌生物被膜与鞭毛第13页
    1.2 第二信使c-di-GMP第13-15页
    1.3 趋化性甲基转移酶第15-17页
    1.4 课题研究主要内容第17-18页
第二章 蛋白质CheR1的结构研究第18-43页
    2.1 蛋白质CheR1第18-20页
    2.2 实验材料第20-23页
        2.2.1 菌种和质粒载体第20页
        2.2.2 常用工具酶和试剂第20-21页
        2.2.3 配制试剂第21-23页
        2.2.4 实验仪器设备第23页
    2.3 实验方法第23-33页
        2.3.1 蛋白质CheR1的相关克隆第23-28页
        2.3.2 蛋白质表达纯化第28-31页
        2.3.3 蛋白质的结晶和优化第31-32页
        2.3.4 蛋白晶体的衍射和数据收集第32-33页
    2.4 实验结果第33-41页
        2.4.1 CheR1全长的纯化实验结果第33-36页
        2.4.2 CheR1蛋白质的普筛和晶体优化第36-41页
    2.5 本章小结第41-43页
第三章 蛋白MapZ和CheR1复合物的结构研究第43-73页
    3.1 蛋白MapZ第43-46页
    3.2 实验方法第46-52页
        3.2.1 蛋白MapZ、CheR1和CheR1 C-domain的相关克隆第46-48页
        3.2.2 蛋白MapZ、CheR1和CheR1 C-domain的表达纯化第48-50页
        3.2.3 c-di-GMP的制备第50-51页
        3.2.4 蛋白MapZ全长、CheR1全长和c-di-GMP的结晶第51-52页
        3.2.5 体外Ni-NTA pull-down实验第52页
    3.3 实验结果第52-71页
        3.3.1 蛋白MapZ全长的实验结果第52-55页
        3.3.2 蛋白CheR1-notag和CheR1 C-domain-notag的实验结果第55-57页
        3.3.3 蛋白MapZ、CheR1和c-di-GMP复合物普筛和晶体优化第57-58页
        3.3.4 蛋白MapZ、CheR1和c-di-GMP复合物结构的确定与修正第58页
        3.3.5 蛋白MapZ、CheR1和c-di-GMP复合物结构的结果及分析第58-71页
    3.4 本章小结第71-73页
全文总结第73-75页
参考文献第75-80页
硕士期间发表论文第80-81页
致谢第81-82页
学位论文评阅及答辩情况表第82页

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