| 英文缩略词 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一章 TNF-α对人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响 | 第14-29页 |
| 1.1 实验材料及仪器 | 第14-16页 |
| 1.1.1 材料 | 第14页 |
| 1.1.2 仪器 | 第14-15页 |
| 1.1.3 常用溶液的配制 | 第15-16页 |
| 1.2 实验方法 | 第16-20页 |
| 1.2.1 细胞的培养及传代 | 第16-17页 |
| 1.2.2 MTT 法测定细胞活力 | 第17页 |
| 1.2.3 Hoechst33342 荧光染色法观察 HUVECs 凋亡 | 第17-18页 |
| 1.2.4 流式细胞术（Annexin V-FITC/PI 双染法）检测 HUVECs 凋亡 | 第18页 |
| 1.2.5 Western blot 法检测 HUVECs 凋亡 | 第18-20页 |
| 1.2.6 统计学处理 | 第20页 |
| 1.3 结果 | 第20-26页 |
| 1.3.1 TNF-α对 HUVECs 增殖活力的影响 | 第20-21页 |
| 1.3.2 TNF-α对 HUVECs 凋亡的影响 | 第21-25页 |
| 1.3.3 TNF-α对 HUVECs 凋亡蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3 表达影响 | 第25-26页 |
| 1.4 讨论 | 第26-29页 |
| 第二章 TNF-α对人脐静脉内皮细胞 miR-29a//b/c 表达的诱导作用研究 | 第29-37页 |
| 2.1 实验材料和仪器 | 第29页 |
| 2.1.1 材料 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2.1 HUVECs 中 miRNA 的提取 | 第30页 |
| 2.2.2 引物合成 | 第30-31页 |
| 2.2.3 逆转录反应体系 | 第31页 |
| 2.2.4 逆转录程序 | 第31-32页 |
| 2.2.5 实时荧光定量反应体系 | 第32页 |
| 2.2.6 定量 PCR 反应程序 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-34页 |
| 2.3.1 RNA 提取质量检测 | 第32页 |
| 2.3.2 miR-29a/b/c 的扩增曲线 | 第32-33页 |
| 2.3.3 miR-29a/b/c 的熔解曲线 | 第33-34页 |
| 2.3.4 PCR 产物的电泳图 | 第34页 |
| 2.3.5 miR-29a/b/c 的相对定量结果 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 miR-29a 在 TNF-α诱导的 HUVECs 增殖与凋亡中的调控作用研究 | 第37-47页 |
| 3.1 实验材料、仪器 | 第37页 |
| 3.1.1 材料 | 第37页 |
| 3.1.2 仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 MTT 法检测 miR-29a mimics 的最佳转染条件 | 第37页 |
| 3.2.2 qRT-PCR 法检测 HUVECs miR-29a 的表达变化 | 第37-38页 |
| 3.2.3 MTT 法检测 HUVECs 增殖活力 | 第38页 |
| 3.2.4 Hoechest 33342 染色法和流式细胞术（Annexin-V-FITC/PI 双染色法）检测 HUVECs 凋亡 | 第38页 |
| 3.2.5 Western blot 法检测 HUVECs 凋亡蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3 的表达变化 | 第38页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第38页 |
| 3.3 结果 | 第38-44页 |
| 3.3.1 miR-29a mimics 对 HUVECs 增殖活力的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.2 miR-29a mimics 和 inhibitor 转染对 HUVECs miR-29a 表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.3 miR-29a 对 TNF-α诱导的 HUVECs 增殖的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.4 miR-29a 对 TNF-α诱导的 HUVECs 凋亡的影响 | 第41-43页 |
| 3.3.5 miR-29a 对 TNF-α诱导的 HUVECs 凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2、caspase-3 表达的影响 | 第43-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-47页 |
| 第四章 miR-29a 抑制 TNF-α诱导的 HUVECs 增殖及促进其凋亡的机制研究 | 第47-58页 |
| 4.1 实验材料、仪器 | 第47-48页 |
| 4.1.1 材料 | 第47页 |
| 4.1.2 仪器 | 第47页 |
| 4.1.3 靶基因预测软件 | 第47-48页 |
| 4.2 实验方法 | 第48页 |
| 4.2.1 Western blot 检测 TNF-α对 HUVECs 候选靶基因表达的变化 | 第48页 |
| 4.2.2 Western blot 法检测 miR-29a 对 PI3K/AKT/Bcl-2 通路蛋白表达的影响 | 第48页 |
| 4.2.3 MTT 法检测 HUVECs 增殖活力 | 第48页 |
| 4.2.4 流式细胞术（Annexin-V-FITC/PI 双染法）检测 HUVECs 凋亡42 | 第48页 |
| 4.2.5 统计学处理 | 第48页 |
| 4.3 结果 | 第48-56页 |
| 4.3.1 生物信息学预测 miR-29a 与其凋亡相关靶基因的作用位点 | 第48-50页 |
| 4.3.2 TNF-α对 HUVECs p85α、Bcl-2 表达的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.3 过表达 miR-29a 对 PI3K/AKT/Bcl-2 通路蛋白表达的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.4 抑制表达 miR-29a 对 PI3K/AKT/Bcl-2 通路蛋白表达的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.5 PI3K/AKT/BCL-2 通路在 miR-29a 抑制 TNF-α诱导 HUVECs 增殖中的作用 | 第53-54页 |
| 4.3.6 PI3K/AKT/BCL-2 通路在 miR-29a 促进 TNF-α诱导 HUVECs 凋亡中的作用 | 第54-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 综述 | 第65-73页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 攻硕期间主要的研究成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
