| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 植物抗病机制 | 第13-15页 |
| 1.1.1 植物防御反应 | 第13-14页 |
| 1.1.2 植物防御反应中的信号途径 | 第14-15页 |
| 1.2 植物免疫反应 | 第15页 |
| 1.3 植物免疫受体 | 第15-16页 |
| 1.4 植物类受体激酶 | 第16-18页 |
| 1.4.1 植物类受体激酶的结构 | 第16页 |
| 1.4.2 植物类受体激酶的分类和作用 | 第16-18页 |
| 1.5 植物类受体激酶SOBIR1的研究 | 第18-19页 |
| 1.5.1 SOBIR1与RLP互作参与植物免疫 | 第18-19页 |
| 1.5.2 SOBIR1参与免疫信号转导 | 第19页 |
| 1.5.3 SOBIR1参与植物生长发育的调控 | 第19页 |
| 1.6 植物类受体激酶FLS2的研究 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 致病真菌和细菌 | 第20-21页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.4 酶及生化试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 培养基配制 | 第21页 |
| 2.1.6 溶液配制 | 第21-23页 |
| 2.1.6.1 MS培养基母液配方 | 第21-22页 |
| 2.1.6.2 原生质体分离溶液 | 第22页 |
| 2.1.6.3 WesternBlot所需溶液 | 第22-23页 |
| 2.1.6.4 DAB染色所用试剂 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 植物总RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 反转录cDNA合成 | 第24页 |
| 2.2.3 基因克隆PCR扩增 | 第24页 |
| 2.2.4 PCR产物胶回收 | 第24-25页 |
| 2.2.5 酶切和连接体系 | 第25页 |
| 2.2.6 大肠杆菌感受态细胞转化 | 第25页 |
| 2.2.7 质粒DNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.8 农杆菌的转化 | 第25-26页 |
| 2.2.9 ‘王林’愈伤转化 | 第26页 |
| 2.2.10 转化拟南芥 | 第26页 |
| 2.2.11 WesternBlot | 第26-27页 |
| 2.2.12 接菌试验 | 第27-28页 |
| 2.2.12.1 愈伤组织接真菌试验 | 第27页 |
| 2.2.12.2 拟南芥叶片接真菌试验 | 第27页 |
| 2.2.12.3 拟南芥接种DC3000试验 | 第27-28页 |
| 2.2.13 DAB和台盼蓝染色 | 第28页 |
| 2.2.14 分离原生质体 | 第28页 |
| 2.2.15 烟草瞬时转化 | 第28页 |
| 2.2.16 总酚含量测定 | 第28-29页 |
| 2.2.17 苯胺蓝染色 | 第29页 |
| 3 结果分析 | 第29-48页 |
| 3.1 MdSOBIR1的抗病性研究 | 第29-43页 |
| 3.1.1 MdSOBIR1的生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 3.1.2 MdSOBIR1亚细胞定位 | 第31-32页 |
| 3.1.3 腐烂病菌侵染特异性诱导MdSOBIR1基因表达 | 第32-33页 |
| 3.1.4 超表达MdSOBIR1降低愈伤组织对苹果轮纹病菌的抗性 | 第33-36页 |
| 3.1.4.1 超表达MdSOBIR1促进轮纹病菌诱导的苹果愈伤病斑扩展 | 第33-34页 |
| 3.1.4.2 超表达MdSOBIR1降低轮纹病菌诱导的总酚物质积累 | 第34页 |
| 3.1.4.3 超表达MdSOBIR1降低轮纹病菌诱导的抗病相关基因表达水平 | 第34-35页 |
| 3.1.4.4 超表达MdSOBIR1抑制轮纹病菌诱导的ACS基因表达 | 第35-36页 |
| 3.1.5 超表达MdSOBIR1抑制拟南芥中轮纹病菌诱导的病斑扩展 | 第36-37页 |
| 3.1.6 超表达MdSOBIR1提高愈伤组织对腐烂病菌的抗性 | 第37-39页 |
| 3.1.6.1 超表达MdSOBIR1抑制愈伤组织中腐烂病菌诱导的病斑扩展 | 第37-38页 |
| 3.1.6.2 超表达MdSOBIR促进腐烂病菌诱导的总酚物质积累和MAPK活性 | 第38页 |
| 3.1.6.3 超表达MdSOBIR1提高腐烂病菌诱导的抗病相关基因表达 | 第38-39页 |
| 3.1.7 超表达MdSOBIR1提高拟南芥对腐烂病菌的抗性 | 第39-41页 |
| 3.1.7.1 MdSOBIR1抑制拟南芥中腐烂病菌诱导的病斑扩展 | 第39-40页 |
| 3.1.7.2 MdSOBIR1转基因抑制拟南芥中腐烂病菌诱导的细胞坏死 | 第40-41页 |
| 3.1.8 超表达MdSOBIR1特异性增强flg22诱导的拟南芥胼胝质积累 | 第41-43页 |
| 3.2 MdFLS2的抗病性研究 | 第43-48页 |
| 3.2.1 超表达MdFLS2的fls2突变体拟南芥部分恢复对flg22的敏感性 | 第43-45页 |
| 3.2.2 超表达MdFLS2提高了拟南芥对轮纹病菌的抗性并恢复了fls2突变体对假单胞菌的抗性 | 第45-48页 |
| 4 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 MdSOBIR1的保守性分析 | 第48页 |
| 4.2 MdSOBIR1对病害的抗性调控机制 | 第48-49页 |
| 4.3 苹果MdSOBIR1互作蛋白预测 | 第49页 |
| 4.4 MdFLS2具有flg22识别功能 | 第49-50页 |
| 4.5 MdFLS2对病害的抗性调控机制 | 第50页 |
| 4.6 MdSOBIR1与MdFLS2的相互作用机制预测 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附录 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第64页 |
