| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 绪论 | 第11-13页 |
| 1 牛孤雄生殖胚研究进展 | 第13-22页 |
| 1.1. 牛孤雄生殖胚技术的研究简史 | 第13-14页 |
| 1.2 牛孤雄生殖技术 | 第14-17页 |
| 1.2.1 精子的准备 | 第14页 |
| 1.2.2 卵母细胞的采集 | 第14-15页 |
| 1.2.3 卵母细胞的去核方法 | 第15页 |
| 1.2.4 精核的注射 | 第15-16页 |
| 1.2.5 重构胚的激活 | 第16页 |
| 1.2.6 重构胚的培养 | 第16页 |
| 1.2.7 重构胚的移植 | 第16-17页 |
| 1.3 牛孤雄生殖技术的应用前景 | 第17-18页 |
| 1.3.1 孤雄胚胎模型构建的新方法 | 第17页 |
| 1.3.2 拯救濒危物种和优良种公畜 | 第17页 |
| 1.3.3 利用优良种公牛精液生产雄性和雌性克隆牛 | 第17页 |
| 1.3.4 牛孤雄生殖技术用于生产转基因动物 | 第17-18页 |
| 1.4 牛孤雄生殖技术存在的问题 | 第18-19页 |
| 1.4.1 牛精子重构胚效率及存活率低 | 第18页 |
| 1.4.2 显微操作技术 | 第18页 |
| 1.4.3 精核解聚 | 第18页 |
| 1.4.4 胚胎发育阻滞 | 第18-19页 |
| 1.4.5 理论基础知识有待加强 | 第19页 |
| 1.5 提高牛孤雄生殖胚发育的途径 | 第19-22页 |
| 1.5.1 显微操作技术的改进 | 第19页 |
| 1.5.2 去活动力精子进行注射 | 第19-20页 |
| 1.5.3 精子预处理 | 第20页 |
| 1.5.4 序贯培养 | 第20页 |
| 1.5.5 重构胚的激活 | 第20-22页 |
| 2 研究目的及意义 | 第22-23页 |
| 2.1 研究内容 | 第22页 |
| 2.2 研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 3 试验材料和方法 | 第23-32页 |
| 3.1 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 3.2 主要试剂 | 第24页 |
| 3.3 溶液的配置 | 第24-27页 |
| 3.3.1 保存液 | 第24页 |
| 3.3.2 稀释液 | 第24页 |
| 3.3.3 吸卵液 | 第24页 |
| 3.3.4 卵母细胞成熟液 | 第24-25页 |
| 3.3.5 卵母细胞操作液 | 第25页 |
| 3.3.6 精子洗涤液与精子操作液 | 第25-26页 |
| 3.3.7 胚胎体外培养液mCR1aa的配制 | 第26页 |
| 3.3.8 激活液配制 | 第26-27页 |
| 3.4 显微操作针的制备和保存 | 第27页 |
| 3.4.1 显微操作固定针的制作 | 第27页 |
| 3.4.2 显微操作注射针的制用 | 第27页 |
| 3.5 卵母细胞的准备 | 第27-28页 |
| 3.6 供体精子的准备 | 第28页 |
| 3.7 精子重构胚的构建 | 第28-29页 |
| 3.7.1 卵母细胞去核 | 第28-29页 |
| 3.7.2 精子的注射 | 第29页 |
| 3.8 精子重构胚的激活 | 第29页 |
| 3.9 试验设计 | 第29-31页 |
| 3.10 统计学分析 | 第31-32页 |
| 4 试验结果和分析 | 第32-36页 |
| 4.1 显微操作方法和精子预处理方法对孤雄生殖胚发育的影响 | 第32-33页 |
| 4.1.1 显微操作方法对孤雄生殖胚发育的影响 | 第32页 |
| 4.1.2 精子预处理方法对孤雄生殖胚发育的影响 | 第32-33页 |
| 4.2 DTT浓度对精子死活和头解聚的影响 | 第33-36页 |
| 4.2.1 DTT处理精液对精子死活的影响 | 第33-34页 |
| 4.2.2 DTT预处理精液对精子头解聚的影响 | 第34-36页 |
| 5 讨论 | 第36-39页 |
| 5.1 影响牛孤雄生殖胚发育的因素 | 第36-37页 |
| 5.1.1 显微操作方法的影响 | 第36-37页 |
| 5.1.2 DTT预处理的影响 | 第37页 |
| 5.2 DTT对精子解聚的影响 | 第37-39页 |
| 5.2.1 DTT对精子死活的影响 | 第37-38页 |
| 5.2.2 DTT对精子头解聚的影响 | 第38-39页 |
| 6 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附图 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48页 |