| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 植酸与植酸酶 | 第10-11页 |
| 1.1.1 植酸的结构与特性 | 第10页 |
| 1.1.2 植酸酶的种类与研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 遗传转化的影响因素 | 第11-12页 |
| 1.2.1 基因型对遗传转化的影响 | 第11页 |
| 1.2.2 激素对遗传转化的影响 | 第11-12页 |
| 1.2.3 消毒剂对细胞分化的影响 | 第12页 |
| 1.3 选择标记基因和启动子 | 第12-13页 |
| 1.4 大豆再生系统 | 第13-14页 |
| 1.5 大豆遗传转化方法研究进展 | 第14-17页 |
| 1.5.1 农杆菌介导法 | 第14-15页 |
| 1.5.2 直接转化法 | 第15-17页 |
| 1.6 植物植酸酶影响因素及检测方法 | 第17页 |
| 1.7 实验的研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 质粒和菌株 | 第18页 |
| 2.1.3 酶/试剂/仪器/设备/PCR扩增引物 | 第18-19页 |
| 2.1.4 溶液的配制 | 第19-21页 |
| 2.1.5 培养基 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-45页 |
| 2.2.1 质粒的小量提取 | 第22-25页 |
| 2.2.2 pCAMBIA3300-RSP-PhyA-Bar表达载体的构建 | 第25-30页 |
| 2.2.3 大豆的遗传转化 | 第30-36页 |
| 2.2.4 转基因植株的分子检测 | 第36-44页 |
| 2.2.5 转化植株的酶活测定 | 第44-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-53页 |
| 3.1 载体构建的结果与分析 | 第45-47页 |
| 3.1.1 根部特异启动子(RSP)引物的设计及PCR扩增结果 | 第45-46页 |
| 3.1.2 重组表达载体pCAMBIA3300-RSP-PhyA-Bar的构建结果与分析 | 第46-47页 |
| 3.1.3 测序结果及序列分析 | 第47页 |
| 3.1.4 载体构建示意图 | 第47页 |
| 3.2 遗传转化的结果与分析 | 第47-50页 |
| 3.2.1 农杆菌工程菌株的转化结果分析与鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.2 6-BA和IBA对再生率的影响分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 遗传转化系统的比较 | 第49-50页 |
| 3.2.4 花粉管通道法对转化的影响分析 | 第50页 |
| 3.3 分子检测的结果分析 | 第50-51页 |
| 3.3.1 T_0代的PCR检测结果 | 第50页 |
| 3.3.2 T_1代的PCR检测结果 | 第50-51页 |
| 3.3.3 T_1代RT-PCR检测结果 | 第51页 |
| 3.3.4 T_1代Southern-Blot杂交结果 | 第51页 |
| 3.4 酶活测定的结果分析 | 第51-53页 |
| 第四章 讨论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
