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Coronin 3在胃癌侵袭和转移中的作用及相关分子机制研究

缩略语表第6-10页
中文摘要第10-14页
ABSTRACT第14-18页
前言第19-20页
文献回顾第20-40页
    一、肿瘤侵袭和和转移的机机制第20-23页
    二、Coronin 家族蛋白参与并调节肌动蛋白依赖的多种生物学进程。第23-40页
第一部分:CORONIN 3 在胃癌细胞系和组织的表达第40-53页
    前言第40页
    1.材料和仪器第40-43页
        1.1 细胞株和组织标本第40-41页
        1.2 主要试剂第41-42页
        1.3 主要仪器第42-43页
    2. 方法第43-48页
        2.1 细胞培养:第43页
        2.2 免疫组织化学第43-44页
        2.3 Western blot第44-45页
        2.4 qPCR 实验检测 mRNA 表达第45-47页
        2.5 激光共聚焦检测 Coronin 3 在细胞中的定位第47-48页
    3. 结果第48-51页
        3.1 Coronin 3 在胃癌组织中的表达第48-49页
        3.2 CCoronin 3 在在胃癌细胞胞系中的表达达第49-50页
        3.3 Coronin 3 在胃癌细胞中的亚细胞定位第50-51页
    4.讨论第51-53页
第二部分:CORONIN 3 在胃癌恶性生物学行为中的作用第53-75页
    前言第53页
    1.材料和仪器第53-55页
        1.1 细胞株详见第一部分 1.1 第53页
        1.2 质粒(图 1)第53-54页
        1.3 慢病毒载体(图 2)第54页
        1.4 主要试剂第54-55页
        1.5 主要仪器第55页
    2.方法第55-62页
        2.1 shRNA 慢病毒载体构建第55-56页
        2.2 细胞的基因转导第56-58页
        2.3 Western Blot 鉴定第58页
        2.4 qPCR 实验验证第58-59页
        2.5 转移与侵袭实验第59-60页
        2.6 细胞凋亡实验第60页
        2.7 细胞周期实验第60-61页
        2.8 细胞增殖能力的检测-MTT 实验第61-62页
        2.9 细胞平板集落形成实验第62页
        2.10 统计学分析第62页
    3.结果第62-73页
        3.1 Coronin 3-shRNA 干扰载体的构建及鉴定第62-63页
        3.2 Coronin 3 特异性 shRNA 明显抑制胃癌细胞中 Coronin 3 的表达第63-64页
        3.3 下调 Coronin 3 表达可抑制胃癌细胞的侵袭、迁移和体内转移能力第64-67页
        3.4 Coronin 3 对胃癌细胞系 SGC7901 和 MKN45 的细胞凋亡的影响第67-68页
        3.5 Coronin 3 对胃癌细胞系 SGC7901 和 MKN45 的细胞周期的影响第68-69页
        3.6 Coronin 3 对胃癌细胞系 SGC7901 和 MKN45 的细胞增殖的影响第69-70页
        3.7 Coronin 3 对胃癌细胞系 SGC7901 和 MKN45 的细胞克隆形成率的影响第70-71页
        3.8 Coronin 3 促进胃癌细胞侵袭与转移作用的验证第71-73页
    4.讨论第73-75页
第三部分:CORONIN3 调节胃癌转移的分子机制研究第75-82页
    前言第75页
    1.材料第75-76页
        1.1 主要试剂和材料第75页
        1.2 主要仪器第75-76页
    2.方法第76页
        2.1 Western Blot第76页
        2.2 qPCR 步骤见第一部分第76页
        2.3 转移表达谱芯片第76页
    3.结果第76-80页
        3.1 在胃癌细胞中干扰 Coronin 3,与转移密切相关的 MMP-9、TIMP3、SMAD4 等基因表达改变第76-78页
        3.2 MKN45NC 和 MKN45-Coronin 3-shRNA 中与转移相关差异基因的验证第78-80页
    4.讨论第80-82页
小结第82-83页
参考文献第83-93页
附录第93-94页
个人简历和研究成果第94-95页
致谢第95-96页

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