摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
英文缩略词表 | 第7-8页 |
第1章 引言 | 第8-10页 |
第2章 材料 | 第10-14页 |
2.1 细胞株 | 第10页 |
2.2 主要试剂 | 第10-12页 |
2.2.1 细胞培养所需主要试剂 | 第10-11页 |
2.2.2 荧光定量 PCR 法所需主要试剂 | 第11页 |
2.2.3 平板克隆形成实验所需主要试剂 | 第11页 |
2.2.4 流式细胞仪检测术所需主要试剂 | 第11页 |
2.2.5 RT-PCR 法所需主要试剂 | 第11-12页 |
2.2.6 细胞免疫组化法所需主要试剂 | 第12页 |
2.2.7 Western Blot 法所需主要试剂 | 第12页 |
2.3 主要仪器设备 | 第12-14页 |
第3章 方法 | 第14-25页 |
3.1 细胞培养 | 第14-16页 |
3.1.1 细胞复苏 | 第14页 |
3.1.2 细胞换液 | 第14-15页 |
3.1.3 细胞传代 | 第15页 |
3.1.4 细胞冻存 | 第15-16页 |
3.1.5 绘制细胞生长曲线 | 第16页 |
3.2 细胞照射方法 | 第16-17页 |
3.3 荧光定量 PCR 法确定最佳药物浓度及作用时间 | 第17页 |
3.4 平板克隆形成实验观察拉米夫定对细胞放射敏感性的影响 | 第17-18页 |
3.5 流式细胞仪检测 HepG2.2.15 细胞的凋亡率变化 | 第18-19页 |
3.6 流式细胞仪检测 HepG2.2.15 细胞周期分布变化 | 第19页 |
3.7 RT-PCR 法检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)mRNA 的表达变化 | 第19-21页 |
3.7.1 提取各组细胞总 RNA | 第19-20页 |
3.7.2 将细胞总 RNA 逆转录成 cDNA | 第20页 |
3.7.3 PCR 扩增 | 第20-21页 |
3.7.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第21页 |
3.8 细胞免疫组化法初步检测各组细胞内 CyclinD1 蛋白的表达 | 第21-22页 |
3.9 Western blot 法检测各组细胞内 CyclinD1 蛋白的表达变化 | 第22-24页 |
3.9.1 细胞蛋白提取 | 第22-23页 |
3.9.2 SDS-PAGE 电泳 | 第23页 |
3.9.3 转膜 | 第23页 |
3.9.4 免疫反应 | 第23页 |
3.9.5 化学发光,显影,定影 | 第23-24页 |
3.9.6 凝胶图象分析 | 第24页 |
3.10 统计学分析 | 第24-25页 |
第4章 结果 | 第25-33页 |
4.1 MTT 法绘制 HepG2.2.15 细胞生长曲线 | 第25-26页 |
4.2 拉米夫定对 HepG2.2.15 细胞病毒复制的影响 | 第26-27页 |
4.3 拉米夫定对 HepG2.2.15 细胞放射敏感性的影响 | 第27-28页 |
4.4 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率变化 | 第28-29页 |
4.5 流式细胞仪检测各组细胞的周期分布变化 | 第29-30页 |
4.6 HepG2.2.15 细胞经不同处理后 CyclinD1mRNA 的表达变化 | 第30-31页 |
4.7 HepG2.2.15 细胞经不同处理后 CyclinD1 蛋白的表达变化 | 第31-33页 |
第5章 讨论 | 第33-36页 |
第6章 结论与展望 | 第36-37页 |
6.1 结论 | 第36页 |
6.2 展望 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
综述 | 第41-49页 |
参考文献 | 第47-49页 |