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拉米夫定对人乙肝病毒相关肝癌细胞放射敏感性的影响及机制研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
英文缩略词表第7-8页
第1章 引言第8-10页
第2章 材料第10-14页
    2.1 细胞株第10页
    2.2 主要试剂第10-12页
        2.2.1 细胞培养所需主要试剂第10-11页
        2.2.2 荧光定量 PCR 法所需主要试剂第11页
        2.2.3 平板克隆形成实验所需主要试剂第11页
        2.2.4 流式细胞仪检测术所需主要试剂第11页
        2.2.5 RT-PCR 法所需主要试剂第11-12页
        2.2.6 细胞免疫组化法所需主要试剂第12页
        2.2.7 Western Blot 法所需主要试剂第12页
    2.3 主要仪器设备第12-14页
第3章 方法第14-25页
    3.1 细胞培养第14-16页
        3.1.1 细胞复苏第14页
        3.1.2 细胞换液第14-15页
        3.1.3 细胞传代第15页
        3.1.4 细胞冻存第15-16页
        3.1.5 绘制细胞生长曲线第16页
    3.2 细胞照射方法第16-17页
    3.3 荧光定量 PCR 法确定最佳药物浓度及作用时间第17页
    3.4 平板克隆形成实验观察拉米夫定对细胞放射敏感性的影响第17-18页
    3.5 流式细胞仪检测 HepG2.2.15 细胞的凋亡率变化第18-19页
    3.6 流式细胞仪检测 HepG2.2.15 细胞周期分布变化第19页
    3.7 RT-PCR 法检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)mRNA 的表达变化第19-21页
        3.7.1 提取各组细胞总 RNA第19-20页
        3.7.2 将细胞总 RNA 逆转录成 cDNA第20页
        3.7.3 PCR 扩增第20-21页
        3.7.4 琼脂糖凝胶电泳第21页
    3.8 细胞免疫组化法初步检测各组细胞内 CyclinD1 蛋白的表达第21-22页
    3.9 Western blot 法检测各组细胞内 CyclinD1 蛋白的表达变化第22-24页
        3.9.1 细胞蛋白提取第22-23页
        3.9.2 SDS-PAGE 电泳第23页
        3.9.3 转膜第23页
        3.9.4 免疫反应第23页
        3.9.5 化学发光,显影,定影第23-24页
        3.9.6 凝胶图象分析第24页
    3.10 统计学分析第24-25页
第4章 结果第25-33页
    4.1 MTT 法绘制 HepG2.2.15 细胞生长曲线第25-26页
    4.2 拉米夫定对 HepG2.2.15 细胞病毒复制的影响第26-27页
    4.3 拉米夫定对 HepG2.2.15 细胞放射敏感性的影响第27-28页
    4.4 流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率变化第28-29页
    4.5 流式细胞仪检测各组细胞的周期分布变化第29-30页
    4.6 HepG2.2.15 细胞经不同处理后 CyclinD1mRNA 的表达变化第30-31页
    4.7 HepG2.2.15 细胞经不同处理后 CyclinD1 蛋白的表达变化第31-33页
第5章 讨论第33-36页
第6章 结论与展望第36-37页
    6.1 结论第36页
    6.2 展望第36-37页
致谢第37-38页
参考文献第38-40页
攻读学位期间的研究成果第40-41页
综述第41-49页
    参考文献第47-49页

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