| 致谢 | 第7-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 缩略词 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-35页 |
| 1 真菌pH信号响应途径研究进展 | 第17-23页 |
| 2 Ca~(2+)/钙调素信号途径研究进展 | 第23-26页 |
| 3 蔗糖非发酵蛋白激酶SNF1研究现状 | 第26-32页 |
| 4 真菌产孢机制研究进展 | 第32-33页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-50页 |
| 1 实验材料 | 第35-38页 |
| 1.1 供试材料 | 第35-37页 |
| 1.2 培养基 | 第37-38页 |
| 1.3 试剂 | 第38页 |
| 2 试验方法 | 第38-50页 |
| 2.1 菌种的保存与培养 | 第38-39页 |
| 2.2 基因组DNA提取 | 第39-40页 |
| 2.3 质粒酶切与连接 | 第40页 |
| 2.4 大肠杆菌感受态制备 | 第40-41页 |
| 2.5 大肠杆菌转化 | 第41页 |
| 2.6 质粒提取 | 第41-42页 |
| 2.7 农杆菌感受态制备 | 第42页 |
| 2.8 农杆菌电击转化 | 第42-43页 |
| 2.9 农杆菌介导T-DNA转化 | 第43页 |
| 2.10 基因组Southern杂交分析 | 第43-46页 |
| 2.11 总RNA提取及cDNA合成 | 第46-47页 |
| 2.12 基因表达分析 | 第47页 |
| 2.13 菌丝生长速率测定 | 第47页 |
| 2.14 产孢量及孢子萌发测定 | 第47页 |
| 2.15 柑橘绿霉病菌胁迫敏感性分析 | 第47-48页 |
| 2.16 柑橘绿霉病菌原生质体产量测定 | 第48页 |
| 2.17 柑橘绿霉病菌透射电镜观察 | 第48-49页 |
| 2.18 柑橘绿霉病菌致病性试验 | 第49-50页 |
| 第三章 柑橘绿霉病菌pH信号途径相关基因的研究 | 第50-76页 |
| 1 引言 | 第50-51页 |
| 2 柑橘绿霉病菌pH信号途径基因的克隆及系统进化分析 | 第51-62页 |
| 2.1 柑橘绿霉病菌PalA基因克隆与系统进化分析 | 第51-52页 |
| 2.2 柑橘绿霉病菌PalB基因克隆与系统进化分析 | 第52-53页 |
| 2.3 柑橘绿霉病菌PalC基因克隆与系统进化分析 | 第53-54页 |
| 2.4 柑橘绿霉病菌PalF基因克隆与系统进化分析 | 第54-56页 |
| 2.5 柑橘绿霉病菌PalH基因克隆与系统进化分析 | 第56-57页 |
| 2.6 柑橘绿霉病菌PalI基因克隆与系统进化分析 | 第57-59页 |
| 2.7 柑橘绿霉病菌PacC基因克隆与系统进化分析 | 第59-61页 |
| 2.8 柑橘绿霉病菌pH信号途径基因与构巢曲霉中同源基因的比较分析 | 第61-62页 |
| 3 PdPacC基因功能研究 | 第62-75页 |
| 3.1 发病过程中橘皮组织的pH变化 | 第62页 |
| 3.2 PdPacC的表达模式 | 第62-64页 |
| 3.3 PdPacC基因缺失及回补载体的构建 | 第64-65页 |
| 3.4 PdPacC基因缺失及回补突变体验证 | 第65-66页 |
| 3.5 PdPacC功能缺失对P.digitatum在PDA上的菌丝生长没有影响 | 第66页 |
| 3.6 ΔPdPacC突变株对Na~+和K~+的敏感性增加 | 第66-68页 |
| 3.7 ΔPdPacC突变株丧失碱性条件下生长的能力 | 第68-69页 |
| 3.8 ΔPdPacC突变株对果胶的利用能力降低 | 第69页 |
| 3.9 APdPacC突变株致病性下降 | 第69-71页 |
| 3.10 ΔPdPacC突变株致病性下降的机制研究 | 第71-75页 |
| 4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第四章 Ca~(2+)/钙调素信号途径转录因子Crz1的功能研究 | 第76-97页 |
| 1 引言 | 第76-78页 |
| 2 柑橘绿霉病菌中转录因子Crz1的功能研究 | 第78-95页 |
| 2.1 PdCrz1基因的克隆及分析 | 第78-79页 |
| 2.2 PdCrz1基因缺失载体的构建 | 第79-80页 |
| 2.3 PdCrz1基因回补载体的构建 | 第80-81页 |
| 2.4 PdCrz1基因功能缺失突变株的获得及验证 | 第81-82页 |
| 2.5 PdCrz1突变影响相橘绿霉病菌的产孢能力 | 第82-83页 |
| 2.6 PdCrz1突变影响柑橘绿霉病菌对盐离子和氧化压的敏感性 | 第83页 |
| 2.7 PdCrz1突变影响柑橘绿霉病菌的细胞壁完整性 | 第83-87页 |
| 2.8 ΔPdCrz1突变株对唑类药剂的敏感性增加 | 第87-88页 |
| 2.9 柑橘绿霉病菌中ATP酶PMC1和PMR1以及细胞壁合成酶FKS1和CHSs的获得及表达分析 | 第88-92页 |
| 2.10 钙调磷酸酶抑制剂能增强抑霉唑对柑橘绿霉病菌的抑制作用 | 第92-93页 |
| 2.11 低浓度Ca~(2+)能够增加柑橘绿霉病菌对抑霉唑的抗性 | 第93-95页 |
| 2.12 ΔPdCrz1突变株致病性下降 | 第95页 |
| 3 本章小结 | 第95-97页 |
| 第五章 柑橘绿霉病菌中蛋白激酶SNF1的功能研究 | 第97-114页 |
| 1 前言 | 第97-98页 |
| 2 蛋白激酶SNF1的功能研究 | 第98-113页 |
| 2.1 柑橘绿霉病菌中SNF1基因的克隆及分析 | 第98-100页 |
| 2.2 PdSNF1基因缺失载体的构建 | 第100-101页 |
| 2.3 PdSNF1基因回补载体的构建 | 第101-102页 |
| 2.4 PdSNF1功能缺失转化子的获得及分析 | 第102页 |
| 2.5 ΔPdSNF1突变株的菌丝生长、产孢及孢子萌发分析 | 第102-104页 |
| 2.6 APdSNF1突变株的致病性下降 | 第104-106页 |
| 2.7 ΔPdSNF1突变株形成的产孢结构 | 第106-107页 |
| 2.8 PdSNF1突变影响柑橘绿霉病菌对选择性碳源的利用 | 第107-108页 |
| 2.9 PdSNF1对CWDEs表达的影响 | 第108-111页 |
| 2.10 柑橘绿霉病菌中产孢相关信号途径及PdSNFl对其中关键基因表达的调控作用 | 第111-113页 |
| 3 本章小结 | 第113-114页 |
| 第六章 全文讨论及后续研究展望 | 第114-123页 |
| 1 全文讨论 | 第114-121页 |
| 1.1 柑橘绿霉病菌中pH信号传递途径对Na~+胁迫及致病过程中起重要的作用 | 第114-116页 |
| 1.2 Ca~(2+)/钙调素途径下游转录因子Crz1对柑橘绿霉病菌适应外界环境胁迫及致病性有重要的作用 | 第116-119页 |
| 1.3 蛋白激酶SNF1对柑橘绿霉病菌利用碳源、致病性及产孢有重要的作用 | 第119-121页 |
| 2 后续研究展望 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-142页 |
| 附录 | 第142-150页 |
| 个人简历及攻读博士期间发表的学术论文 | 第150页 |
