| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第7-10页 |
| 第一章 材料与方法 | 第10-24页 |
| 第一节 材料 | 第10-11页 |
| 1. 样本来源 | 第10页 |
| 1.1 病毒标准细胞株 | 第10页 |
| 1.2 临床标本 | 第10页 |
| 1.3 阳性对照样本 | 第10页 |
| 2. 主要试剂 | 第10-11页 |
| 3. 仪器设备 | 第11页 |
| 第二节 方法 | 第11-24页 |
| 1. 病毒标准克隆与阳性对照克隆的构建 | 第11-19页 |
| 1.1 目的序列的选择 | 第12-14页 |
| 1.2 样本来源 | 第14页 |
| 1.3 核酸的抽提 | 第14页 |
| 1.4 病毒RNA反转录合成cDNA链 | 第14-15页 |
| 1.5 PCR扩增 | 第15页 |
| 1.6 构建病毒特异性序列克隆 | 第15-18页 |
| 1.7 测序验证 | 第18-19页 |
| 2. 核酸探针微球制备 | 第19-22页 |
| 2.1 核酸探针的设计与合成 | 第19-20页 |
| 2.2 羧基微球的选择 | 第20页 |
| 2.3 核酸探针与羧基微球偶联 | 第20-21页 |
| 2.4 杂交验证 | 第21-22页 |
| 3. 样本核酸抽提 | 第22页 |
| 4. 多重呼吸道病毒悬液芯片检测方法 | 第22-24页 |
| 4.1 多重反转录反应 | 第22页 |
| 4.2 多重PCR扩增 | 第22-23页 |
| 4.3 杂交 | 第23页 |
| 4.4 信号标记 | 第23页 |
| 4.5 检测 | 第23页 |
| 4.6 测序验证 | 第23-24页 |
| 第二章 结果 | 第24-32页 |
| 第一节 构建克隆的测序结果 | 第24-26页 |
| 第二节 核酸探针微球偶联效果验证结果 | 第26-27页 |
| 第三节 呼吸道病毒悬液芯片检测体系的构建及样本检测结果 | 第27-32页 |
| 1. PCR条件优化 | 第27-28页 |
| 2. 杂交条件优化 | 第28页 |
| 3. 特异性和灵敏度检测 | 第28-30页 |
| 3.1 特异性检测 | 第28-29页 |
| 3.2 灵敏度检测 | 第29-30页 |
| 4. 临床样本检测 | 第30-32页 |
| 第三章 讨论 | 第32-36页 |
| 第一节 构建克隆结果讨论 | 第32页 |
| 1. 克隆测序及序列比对 | 第32页 |
| 2. 构建克隆的应用 | 第32页 |
| 第二节 核酸探针微球制备的讨论 | 第32-33页 |
| 第三节 呼吸道病毒悬液芯片检测体系的构建及样本检测结果的讨论 | 第33-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 综述 | 第39-55页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |