| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 引言 | 第7-9页 |
| 第一部分 细胞培养 | 第9-18页 |
| 第1章 实验材料 | 第9-10页 |
| 1.1 主要仪器和设备 | 第9页 |
| 1.2 主要试剂和器材 | 第9-10页 |
| 1.3 液体的配制 | 第10页 |
| 第2章 实验方法 | 第10-13页 |
| 2.1 Huh-7细胞的培养 | 第11页 |
| 2.2 原代小鼠肝细胞的分离与培养 | 第11-13页 |
| 第3章 结果 | 第13-16页 |
| 3.1 Huh-7细胞正常生长 | 第13-14页 |
| 3.2 成功分离与培养原代小鼠肝细胞 | 第14-16页 |
| 第4章 讨论 | 第16-18页 |
| 第二部分 慢病毒载体构建 | 第18-32页 |
| 第1章 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.1 主要仪器和设备 | 第18页 |
| 1.2 主要试剂和器材 | 第18-19页 |
| 1.3 液体的配制 | 第19页 |
| 第2章 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.1 慢病毒载体质粒的构建 | 第19-25页 |
| 2.2 慢病毒包装 | 第25-26页 |
| 第3章 结果 | 第26-31页 |
| 3.1 PNPLA3基因编码序列扩增成功 | 第26-27页 |
| 3.2 载体质粒构建成功 | 第27-29页 |
| 3.3 慢病毒载体构建成功 | 第29-31页 |
| 第4章 讨论 | 第31-32页 |
| 第三部分 PNPLA3基因I148M多态性在体外培养肝细胞中的作用 | 第32-48页 |
| 第1章 实验材料 | 第32-34页 |
| 1.1 主要仪器和设备 | 第32页 |
| 1.2 主要试剂和器材 | 第32-33页 |
| 1.3 液体的配制 | 第33-34页 |
| 第2章 实验方法 | 第34-38页 |
| 2.1 慢病毒感染Huh-7细胞 | 第34-35页 |
| 2.2 慢病毒感染原代小鼠肝细胞 | 第35页 |
| 2.3 蛋白样品的收集 | 第35页 |
| 2.4 Western blot检测目的蛋白的表达 | 第35-37页 |
| 2.5 油红O染色 | 第37页 |
| 2.6 细胞内相关代谢产物的检测 | 第37页 |
| 2.7 过表达目的基因的Huh-7细胞对辛伐他汀的敏感性检测 | 第37页 |
| 2.8 Huh-7细胞周期的检测 | 第37-38页 |
| 第3章 结果 | 第38-45页 |
| 3.1 慢病毒成功感染Huh-7细胞 | 第38-39页 |
| 3.2 慢病毒成功感染原代小鼠肝细胞 | 第39-40页 |
| 3.3 PNPLA3成功过表达 | 第40-41页 |
| 3.4 PNPLA3升高细胞内甘油三酯含量 | 第41-44页 |
| 3.5 PNPLA3改变细胞内相关生化指标 | 第44页 |
| 3.6 PNPLA3基因I148M多态性降低细胞对辛伐他汀的敏感性 | 第44页 |
| 3.7 PNPLA3基因I148M多态性改变Huh-7细胞的生长周期 | 第44-45页 |
| 第4章 讨论 | 第45-48页 |
| 第四部分 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 综述 | 第53-73页 |
| 综述参考文献 | 第63-73页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第73-74页 |
| 缩略词 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
