缩略语表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
前言 | 第14-15页 |
文献回顾 | 第15-24页 |
第一部分 疟原虫TIP样蛋白表达特点及其抗体抑制疟原虫增殖作用的研究 | 第24-39页 |
1 材料 | 第24-26页 |
1.1 预测工具 | 第24页 |
1.2 疟原虫、菌株、质粒、实验动物 | 第24-25页 |
1.3 常用分子生物学试剂 | 第25-26页 |
1.4 主要仪器 | 第26页 |
2 方法 | 第26-31页 |
2.1 TIP的生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.2 PbTIP-GST重组蛋白的原核表达及纯化 | 第27页 |
2.3 抗PbTIP-GST重组蛋白兔血清的制备 | 第27-28页 |
2.4 抗PbTIP-GST兔血清与天然PbTIP的Western blot检测 | 第28页 |
2.5 PbTIP在疟原虫寄生红细胞中的表达定位 | 第28页 |
2.6 抗PbTIP兔血清对体外培养恶性疟原虫的生长抑制作用 | 第28-29页 |
2.7 PbTIP-GST重组蛋白免疫小鼠的疟原虫攻击实验 | 第29-30页 |
2.8 恶性疟原虫生活史不同发育阶段PfTIP的表达水平检测 | 第30-31页 |
2.9 统计学方法 | 第31页 |
3 结果 | 第31-36页 |
3.1 TIP的生物信息学分析结果 | 第31-32页 |
3.2 PbTIP-GST重组蛋白的表达和纯化 | 第32页 |
3.3 抗PbTIP-GST重组蛋白兔血清的制备 | 第32-33页 |
3.4 抗PbTIP-GST兔血清与天然PbTIP的Western blot鉴定 | 第33页 |
3.5 PbTIP在疟原虫寄生的红细胞中的表达定位 | 第33-34页 |
3.6 抗PbTIP兔血清对体外培养恶性疟原虫的生长抑制作用 | 第34页 |
3.7 PbTIP-GST重组蛋白免疫小鼠的疟原虫攻击实验 | 第34-35页 |
3.8 恶性疟原虫生活史不同发育阶段PfTIP的表达水平检测 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
第二部分 伯氏疟原虫PbTIP胞外域重组蛋白对T细胞的作用研究 | 第39-46页 |
1 材料 | 第39-40页 |
1.1 质粒、细胞系 | 第39页 |
1.2 常用分子生物学试剂 | 第39页 |
1.3 主要仪器 | 第39-40页 |
2 方法 | 第40-42页 |
2.1 PbTIP胞外域原核表达载体的构建 | 第40页 |
2.2 PbTIP胞外域重组蛋白的原核表达及纯化 | 第40-41页 |
2.3 PbTIP胞外域重组蛋白对CTLL-2 细胞增殖的影响 | 第41页 |
2.4 PbTIP胞外域重组蛋白对CTLL-2 细胞因子分泌水平的影响 | 第41-42页 |
2.5 统计学方法 | 第42页 |
3 结果 | 第42-45页 |
3.1 PbTIP胞外域原核表达载体的鉴定 | 第42页 |
3.2 PbTIP胞外域重组蛋白的原核表达及纯化 | 第42-43页 |
3.3 PbTIP胞外域重组蛋白对CTLL-2 细胞增殖的影响 | 第43-44页 |
3.4 PbTIP胞外域重组蛋白对CTLL-2 细胞因子分泌水平的影响 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
第三部分 基因敲除伯氏疟原虫PbTIP | 第46-62页 |
1 材料 | 第46-48页 |
1.1 伯氏疟原虫、TALENs质粒和同源重组载体 | 第46-47页 |
1.2 常用分子生物学试剂 | 第47页 |
1.3 主要仪器 | 第47页 |
1.4 培养基及主要缓冲液 | 第47-48页 |
2 方法 | 第48-56页 |
2.1 同源重组载体PL0018/PbTIP的构建 | 第48-51页 |
2.2 疟原虫TALENs质粒的构建 | 第51-55页 |
2.3 Nycodenz密度梯度离心纯化伯氏疟原虫裂殖体 | 第55页 |
2.4 同源重组载体与TALENs质粒对共转染伯氏疟原虫 | 第55-56页 |
2.5 筛选同源重组成功的疟原虫 | 第56页 |
3 结果 | 第56-60页 |
3.1 同源重组载体PL0018/PbTIP的构建 | 第56页 |
3.2 疟原虫TALENs质粒的构建 | 第56-59页 |
3.3 Nycodonz密度梯度离心纯化伯氏疟原虫裂殖体 | 第59-60页 |
3.4 电转后同源重组成功疟原虫的筛选 | 第60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
小结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-72页 |
个人简历和研究成果 | 第72-73页 |
个人简历 | 第72页 |
在读期间以第一作者或共同第一作者发表的学术论文 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |