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伪狂犬病病毒变异株基因工程疫苗研究

摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略语表(Abbreviation)第12-13页
1 文献综述第13-52页
    1.1 伪狂犬病病原学和流行病学第13-24页
        1.1.1 PRV病毒粒子的形态结构第13-14页
        1.1.2 PRV的理化性质第14-15页
        1.1.3 伪狂犬病临床表现概述第15-17页
        1.1.4 伪狂犬病的流行史和危害第17-21页
        1.1.5 PRV变异株的遗传特征第21-23页
        1.1.6 PRV变异株的致病力第23-24页
    1.2 PRV分子生物学研究进展第24-33页
        1.2.1 PRV的基因组特征第24-25页
        1.2.2 基因的功能第25-29页
        1.2.3 PRV基因转录的级联控制第29-31页
        1.2.4 PRV侵染细胞的过程第31-33页
    1.3 PRV的致病机制第33-37页
        1.3.1 PRV体内侵染途径第33-34页
        1.3.2 PRV的神经嗜性第34页
        1.3.3 PRV的潜伏感染第34-37页
        1.3.4 PRV感染导致的病理变化第37页
    1.4 免疫应答和免疫逃避第37-39页
        1.4.1 先天免疫第38页
        1.4.2 体液免疫第38-39页
        1.4.3 细胞免疫第39页
    1.5 伪狂犬病疫苗研究进展第39-45页
        1.5.1 伪狂犬病疫苗的发展历程第39-40页
        1.5.2 几种重要的伪狂犬病基因缺失疫苗株第40-42页
        1.5.3 不同疫苗的效果比较第42-43页
        1.5.4 佐剂对疫苗效果的影响第43-44页
        1.5.5 PRV弱毒株作为活载体疫苗第44-45页
    1.6 伪狂犬病根除计划第45-52页
        1.6.1 鉴别诊断方法第46-48页
        1.6.2 一些国家的根除计划及其进展第48-52页
2 研究目的和意义第52-53页
3 材料与方法第53-65页
    3.1 试验材料第53-57页
        3.1.1 病料样品第53页
        3.1.2 细胞与病毒株第53页
        3.1.3 载体与质粒第53页
        3.1.4 试剂、药品和试剂盒第53-54页
        3.1.5 试剂与溶液的配制第54-55页
        3.1.6 培养基第55页
        3.1.7 重要仪器与设备第55页
        3.1.8 分子生物学和生物信息分析软件第55页
        3.1.9 试验动物第55-56页
        3.1.10 构建重组病毒用引物列表第56页
        3.1.11 Southern blot用探针序列第56-57页
    3.2 试验方法第57-65页
        3.2.1 PRV病毒分离、鉴定和生物学特性研究第57-60页
        3.2.2 PRV gI/gE、TK缺失株的构建第60-62页
        3.2.3 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的安全性评价第62-63页
        3.2.4 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的免疫效力评价第63-64页
        3.2.5 数据处理第64-65页
4 结果与分析第65-89页
    4.1 PRV的分离、鉴定和生物学特性研究第65-73页
        4.1.1 PRV临床流行毒株的分离和鉴定第65-66页
        4.1.2 间接免疫荧光试验第66-67页
        4.1.3 PRV分离株gC基因测序和进化分析第67-70页
        4.1.4 CH/HNSMX/2012的空斑特征和增殖曲线测定第70页
        4.1.5 CH/HNSMX/2012对小鼠的LD50测定第70-71页
        4.1.6 CH/HNSMX/2012对仔猪的致病力研究第71-72页
        4.1.7 CH/HNSMX/2012感染仔猪后的组织病理损伤评估第72-73页
    4.2 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的构建和鉴定第73-80页
        4.2.1 重组转移载体的构建和鉴定第73-76页
        4.2.2 rSMXΔgI/gEΔTK的构建第76-77页
        4.2.3 rSMXΔgI/gEΔTK株的RFLP和Southern blot鉴定第77-78页
        4.2.4 rSMXΔgI/gEΔTK的遗传稳定性研究第78-79页
        4.2.5 rSMXΔgI/gEΔTK的空斑特性和增殖曲线测定第79-80页
    4.3 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的安全性试验第80-84页
        4.3.1 rSMXΔgI/gEΔTK对小鼠的安全性试验第80页
        4.3.2 rSMXΔgI/gEΔTK对兔的安全性试验第80-81页
        4.3.3 rSMXΔgI/gEΔTK对绵羊的安全性试验第81-82页
        4.3.4 rSMXΔgI/gEΔTK对新生仔猪的安全性试验第82-83页
        4.3.5 rSMXΔgI/gEΔTK对怀孕母猪的安全性试验第83-84页
    4.4 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的免疫效力评价第84-89页
        4.4.1 免疫后仔猪的ELISA抗体和中和抗体水平第84-85页
        4.4.2 rSMXΔgI/gEΔTK对仔猪的免疫保护力试验第85-86页
        4.4.3 攻毒后鼻腔排毒量比较第86页
        4.4.4 攻毒后体重增加量比较第86-87页
        4.4.5 组织病理学观察第87-89页
5 讨论第89-95页
    5.1 PRV流行毒株的遗传背景第89-90页
    5.2 CH/HNSMX/2012株对小鼠和猪的致病力第90-91页
    5.3 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的构建第91-92页
    5.4 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的安全性第92-93页
    5.5 基因缺失病毒rSMXΔgI/gEΔTK的免疫效力第93-95页
6 结论第95-96页
参考文献第96-108页
附录第108-109页
致谢第109-110页

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