| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第1章 前言 | 第17-19页 |
| 第2章 文献综述 | 第19-30页 |
| 2.1 视网膜母细胞瘤 | 第19-24页 |
| 2.1.1 RB的发生机制 | 第19-20页 |
| 2.1.2 RB的分类 | 第20-22页 |
| 2.1.3 RB的临床特点 | 第22页 |
| 2.1.4 RB的治疗方法 | 第22-24页 |
| 2.2 Hedgehog信号通路（HH） | 第24-26页 |
| 2.2.1 HH通路的构成 | 第24-25页 |
| 2.2.2 HH通路的活化 | 第25页 |
| 2.2.3 HH通路在肿瘤中的作用 | 第25-26页 |
| 2.3 PI3K/Akt信号通路 | 第26-30页 |
| 2.3.1 PI3K/Akt通路的生物学特性 | 第26-27页 |
| 2.3.2 PI3K/Akt通路的活化 | 第27-28页 |
| 2.3.3 PI3K/Akt通路与肿瘤 | 第28-30页 |
| 第3章 RNA干扰SHH基因真核表达载体的构建和筛选 | 第30-45页 |
| 3.1 实验仪器及材料 | 第30-32页 |
| 3.1.1 主要仪器 | 第30页 |
| 3.1.2 细胞、质粒及菌株 | 第30页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第30-31页 |
| 3.1.4 主要试剂的配置 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 3.2.1 细胞复苏和培养 | 第32-33页 |
| 3.2.2 SHH-shRNA表达质粒的构建、合成及鉴定 | 第33-36页 |
| 3.2.3 细胞转染 | 第36页 |
| 3.2.4 Real-time PCR检测SHH mRNA的表达 | 第36-38页 |
| 3.2.5 Western blot检测SHH蛋白表达 | 第38-40页 |
| 3.2.6 统计分析 | 第40-41页 |
| 3.3 实验结果 | 第41-42页 |
| 3.3.1 Real-time PCR检测 | 第41页 |
| 3.3.2 Western blot检测 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第4章 SHH基因干扰对视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响 | 第45-56页 |
| 4.1 实验仪器及材料 | 第45页 |
| 4.1.1 主要仪器 | 第45页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 4.1.3 主要试剂的配置 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 MTT实验检测细胞增殖 | 第45-46页 |
| 4.2.2 流式细胞术检测细胞周期 | 第46页 |
| 4.2.3 克隆形成实验检测体外成瘤能力 | 第46页 |
| 4.2.4 流式细胞术AnnexinV/PI双染检测细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 4.2.5 Hoechst染色检测凋亡细胞核变化 | 第47页 |
| 4.2.6 Western blot检测蛋白表达量 | 第47页 |
| 4.2.7 统计分析 | 第47页 |
| 4.3 实验结果 | 第47-53页 |
| 4.3.1 SHH基因沉默对WERI-Rb-1 细胞增殖的影响 | 第47-50页 |
| 4.3.2 SHH基因沉默对WERI-Rb-1 细胞凋亡的影响 | 第50-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-56页 |
| 第5章 SHH基因影响视网膜母细胞瘤细胞增殖凋亡的分子机制 | 第56-66页 |
| 5.1 实验仪器及材料 | 第56页 |
| 5.1.1 主要仪器 | 第56页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第56页 |
| 5.1.3 主要试剂的配置 | 第56页 |
| 5.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 5.2.1 Western blot检测蛋白表达 | 第56页 |
| 5.2.2 MTT检测细胞增殖 | 第56-57页 |
| 5.2.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第57页 |
| 5.3 实验结果 | 第57-63页 |
| 5.3.1 SHH基因沉默对PI3K/Akt信号通路的影响 | 第57-59页 |
| 5.3.2 IGF-1 对SHH沉默的WERI-Rb-1 细胞增殖的影响 | 第59-60页 |
| 5.3.3 IGF-1 对SHH沉默的WERI-Rb-1 细胞凋亡的影响 | 第60-63页 |
| 5.4 讨论 | 第63-66页 |
| 第6章 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-83页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
