摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词表 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-17页 |
1.1. 多糖药物研究简介 | 第12-13页 |
1.2. 车前子多糖生物活性研究进展 | 第13-15页 |
1.3. 本课题的研究对象及主要内容 | 第15-17页 |
1.3.1. 研究对象 | 第15-16页 |
1.3.2. 主要内容 | 第16-17页 |
第2章 PLP的分离纯化 | 第17-24页 |
2.1. 实验材料 | 第17-18页 |
2.2. 实验方法 | 第18-20页 |
2.2.1. PLP的提取 | 第18页 |
2.2.2. PLP的分离纯化 | 第18-19页 |
2.2.3. 苯酚硫酸法测糖含量 | 第19-20页 |
2.2.4. PLP的纯度鉴定 | 第20页 |
2.3. 实验结果 | 第20-23页 |
2.3.1. 车前子多糖的分离提取及纯化 | 第20-22页 |
2.3.2. 苯酚硫酸法测糖含量 | 第22页 |
2.3.3. PLP纯度分析 | 第22-23页 |
2.4. 本章小结 | 第23-24页 |
第3章 PLP对脾淋巴细胞及巨噬细胞的免疫调节作用 | 第24-30页 |
3.1. 实验材料 | 第24-25页 |
3.2. 实验方法 | 第25-27页 |
3.2.1. T、B细胞的分离 | 第25页 |
3.2.2. T、B细胞的纯度鉴定 | 第25页 |
3.2.3. 细胞增殖实验 | 第25-26页 |
3.2.4. 巨噬细胞释放NO实验 | 第26页 |
3.2.5. 巨噬细胞吞噬中性红实验 | 第26页 |
3.2.6. 统计学分析 | 第26-27页 |
3.3. 实验结果 | 第27-29页 |
3.3.1. PLP对脾淋巴细胞免疫活性的影响 | 第27-28页 |
3.3.2. PLP对巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响 | 第28-29页 |
3.4. 本章小结 | 第29-30页 |
第4章 PLP结合的巨噬细胞受体的鉴定 | 第30-41页 |
4.1. 实验材料 | 第30-31页 |
4.2. 实验方法 | 第31-36页 |
4.2.1. PLP荧光标记探针(fl-PLP)的制备 | 第31-32页 |
4.2.2. 激光共聚焦扫描分析 | 第32-33页 |
4.2.3 饱和结合与竞争性抑制实验 | 第33页 |
4.2.4. 抗体封闭实验 | 第33-34页 |
4.2.5. PLP-Sepharose 4B亲和基质的制备 | 第34页 |
4.2.6. 巨噬细胞膜蛋白的提取 | 第34-35页 |
4.2.7. 亲和吸附沉淀 | 第35页 |
4.2.8. Western Blot | 第35-36页 |
4.2.9. 统计学分析 | 第36页 |
4.3. 实验结果 | 第36-39页 |
4.3.1. PLP荧光标记探针的制备 | 第36页 |
4.3.2. PLP与巨噬细胞结合特性分析 | 第36-38页 |
4.3.3. TLR2、TLR4抗体封闭对PLP活化能力的影响 | 第38-39页 |
4.3.4. 亲和吸附沉淀结果 | 第39页 |
4.4. 本章小结 | 第39-41页 |
第5章 PLP活化巨噬细胞信号通路的研究 | 第41-48页 |
5.1. 实验材料 | 第41-42页 |
5.2. 实验方法 | 第42-45页 |
5.2.1. 总蛋白的提取 | 第42-43页 |
5.2.2. Western Blot | 第43页 |
5.2.3. 核蛋白的提取 | 第43页 |
5.2.4. 凝胶迁移实验 | 第43-44页 |
5.2.5. 信号通路抑制实验 | 第44-45页 |
5.2.6. 统计学分析 | 第45页 |
5.3. 实验结果 | 第45-47页 |
5.3.1. MAPK通路在PLP介导巨噬细胞活化进程中的作用 | 第45-47页 |
5.3.2. NF-κB通路在PLP介导巨噬细胞活化进程中的作用 | 第47页 |
5.4. 本章小结 | 第47-48页 |
第6章 结论与展望 | 第48-49页 |
6.1. 结论 | 第48页 |
6.2. 展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
攻读学位期间所取得的论文及成果 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |