| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 本文部分缩略符号对照 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 前言 | 第14页 |
| 2 胚胎期肌肉发育研究进展 | 第14-17页 |
| 2.1 胚胎期肌肉发育 | 第14-16页 |
| 2.2 成肌细胞 | 第16-17页 |
| 2.3 肌卫星细胞 | 第17页 |
| 3 胚胎期肌肉发育相关调控因子和信号转导 | 第17-22页 |
| 3.1 生肌转录因子 | 第18-21页 |
| 3.2 生肌过程信号通路调控 | 第21-22页 |
| 4 EBP1结构功能及对肌肉发育的作用 | 第22-23页 |
| 4.1 Ebp1结构功能 | 第22-23页 |
| 4.2 Ebp1与肌肉发育 | 第23页 |
| 5 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 EBP1胚胎期内源性的表达分析 | 第24-42页 |
| 1 材料和方法 | 第24-31页 |
| 1.1 试验动物 | 第24页 |
| 1.2 成肌细胞的分离纯化及培养 | 第24页 |
| 1.3 腿肌组织及成肌细胞的总RNA提取 | 第24-25页 |
| 1.4 反转录cDNA合成 | 第25-27页 |
| 1.5 实时定量PCR(Realtime-PCR) | 第27页 |
| 1.6 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第27-30页 |
| 1.7 免疫荧光染色 | 第30-31页 |
| 1.8 数据分析 | 第31页 |
| 2 结果 | 第31-39页 |
| 2.1 成肌细胞的分离培养 | 第31-33页 |
| 2.2 成肌细胞的鉴定 | 第33-36页 |
| 2.3 Ebp1基因水平表达分析 | 第36-37页 |
| 2.4 EBP1蛋白水平表达分析 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 4 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 慢病毒载体干扰EBP1模型构建 | 第42-50页 |
| 1 材料和方法 | 第42-45页 |
| 1.1 试验动物 | 第42页 |
| 1.2 shRNA的设计 | 第42-43页 |
| 1.3 293T细胞的培养 | 第43页 |
| 1.4 质粒构建 | 第43-44页 |
| 1.5 原代培养细胞转染 | 第44-45页 |
| 1.6 实时定量PCR | 第45页 |
| 1.7 数据分析 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-48页 |
| 2.1 慢病毒滴度的测定 | 第45-46页 |
| 2.2 GFP的时序表达 | 第46页 |
| 2.3 嘌呤霉素浓度梯度的筛选 | 第46-47页 |
| 2.4 shRNA靶位点干扰效率的分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-49页 |
| 4 小结 | 第49-50页 |
| 第四章 EBP1对成肌细胞发生及其分子机制研究 | 第50-64页 |
| 1 材料和方法 | 第50-52页 |
| 1.1 试验动物 | 第50页 |
| 1.2 转染成肌细胞总RNA提取 | 第50页 |
| 1.3 实时定量PCR(Realtime-PCR) | 第50页 |
| 1.4 EdU染色 | 第50-51页 |
| 1.5 细胞周期流式检测 | 第51页 |
| 1.6 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第51-52页 |
| 1.7 免疫荧光染色 | 第52页 |
| 1.8 数据分析 | 第52页 |
| 2 结果 | 第52-60页 |
| 2.1 干扰Ebp1对成肌细胞增殖影响的研究 | 第52-54页 |
| 2.2 干扰Ebp1对成肌细胞分化影响的研究 | 第54-58页 |
| 2.3 Ebp1调节成肌细胞分化的分子机制 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-63页 |
| 3.1 Ebp1对成肌细胞增殖的作用分析 | 第60-61页 |
| 3.2 Ebp1对成肌细胞分化的作用分析 | 第61-62页 |
| 3.3 Ebp1调节成肌细胞分化的分子机制 | 第62-63页 |
| 4 小结 | 第63-64页 |
| 全文结论及创新点 | 第64-66页 |
| 1.1 结论 | 第64页 |
| 1.2 创新点 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
