摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第10-24页 |
1 植物病害与生物防治 | 第10-12页 |
1.1 植物病害生物防治的概念及作用机理 | 第10页 |
1.2 生防细菌在生物防治中的应用 | 第10-12页 |
2 荧光假单胞菌与生物防治 | 第12-19页 |
2.1 荧光假单胞菌的主要类群 | 第12页 |
2.2 荧光假单胞菌生物防治作用 | 第12-13页 |
2.3 荧光假单胞菌生防机理 | 第13-15页 |
2.4 荧光假单胞菌抗生性代谢产物在生防治中的应用 | 第15-17页 |
2.5 荧光假单胞菌的育种改良 | 第17-19页 |
3 核糖体工程概述 | 第19-22页 |
3.1 核糖体工程的概念 | 第19页 |
3.2 核糖体工程的作用机制 | 第19-21页 |
3.3 核糖体工程的应用进展 | 第21-22页 |
4 立题依据和研究目的 | 第22-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-40页 |
1 材料 | 第24-31页 |
1.1 菌株与质粒 | 第24-25页 |
1.2 培养基 | 第25-26页 |
1.3 抗生素 | 第26页 |
1.4 引物与测序 | 第26-27页 |
1.5 工具酶与标准分子量 | 第27页 |
1.6 常用试剂与试剂盒 | 第27-30页 |
1.7 仪器与设备 | 第30-31页 |
2 方法 | 第31-40页 |
2.1 菌株的培养与保藏 | 第31页 |
2.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第31页 |
2.3 抗性突变株的筛选 | 第31页 |
2.4 抗性突变株的真菌抑制活力测定 | 第31-32页 |
2.5 发酵产物的高效液相色谱分析 | 第32页 |
2.6 抑菌活性产物的质谱鉴定 | 第32-33页 |
2.7 突变株的抑菌活性测试 | 第33页 |
2.8 菌体全蛋白的提取及分析 | 第33-34页 |
2.9 突变株与原始菌株生理特性的比较 | 第34-35页 |
2.10 细菌基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
2.11 突变位点的鉴定 | 第36-38页 |
2.12 过表达载体的构建 | 第38页 |
2.13 工程菌Pf5rpoB~R的构建 | 第38-40页 |
第三章 结果与分析 | 第40-55页 |
1 利福平对荧光假单胞菌Pf-5 菌株最低抑制浓度的确定 | 第40页 |
2 利福平自发抗性突变株的筛选 | 第40-41页 |
3 突变位点的鉴定 | 第41-42页 |
4 代谢产物的色谱分析 | 第42-44页 |
5 代谢产物的抑菌活性研究 | 第44-46页 |
6 原始菌株与突变菌株在不同时期的代谢产物产量分析 | 第46-47页 |
7 代谢产物的质谱分析 | 第47-48页 |
8 突变株的表型特征比较 | 第48-50页 |
9 重组质粒pUCP24-rpoB~R的构建 | 第50-51页 |
10 工程菌株Pf-rpoB~R的构建 | 第51-52页 |
11 工程菌株的活性产物产量分析 | 第52-53页 |
12 突变菌蛋白表达水平的差异分析 | 第53-55页 |
第四章 讨论 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
缩略词表 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
本论文感谢以下基金项目的资助 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |