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利用核糖体工程技术提高荧光假单胞菌Pf-5菌株活性次级代谢产物产量

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 引言第10-24页
    1 植物病害与生物防治第10-12页
        1.1 植物病害生物防治的概念及作用机理第10页
        1.2 生防细菌在生物防治中的应用第10-12页
    2 荧光假单胞菌与生物防治第12-19页
        2.1 荧光假单胞菌的主要类群第12页
        2.2 荧光假单胞菌生物防治作用第12-13页
        2.3 荧光假单胞菌生防机理第13-15页
        2.4 荧光假单胞菌抗生性代谢产物在生防治中的应用第15-17页
        2.5 荧光假单胞菌的育种改良第17-19页
    3 核糖体工程概述第19-22页
        3.1 核糖体工程的概念第19页
        3.2 核糖体工程的作用机制第19-21页
        3.3 核糖体工程的应用进展第21-22页
    4 立题依据和研究目的第22-24页
第二章 材料与方法第24-40页
    1 材料第24-31页
        1.1 菌株与质粒第24-25页
        1.2 培养基第25-26页
        1.3 抗生素第26页
        1.4 引物与测序第26-27页
        1.5 工具酶与标准分子量第27页
        1.6 常用试剂与试剂盒第27-30页
        1.7 仪器与设备第30-31页
    2 方法第31-40页
        2.1 菌株的培养与保藏第31页
        2.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定第31页
        2.3 抗性突变株的筛选第31页
        2.4 抗性突变株的真菌抑制活力测定第31-32页
        2.5 发酵产物的高效液相色谱分析第32页
        2.6 抑菌活性产物的质谱鉴定第32-33页
        2.7 突变株的抑菌活性测试第33页
        2.8 菌体全蛋白的提取及分析第33-34页
        2.9 突变株与原始菌株生理特性的比较第34-35页
        2.10 细菌基因组DNA的提取第35-36页
        2.11 突变位点的鉴定第36-38页
        2.12 过表达载体的构建第38页
        2.13 工程菌Pf5rpoB~R的构建第38-40页
第三章 结果与分析第40-55页
    1 利福平对荧光假单胞菌Pf-5 菌株最低抑制浓度的确定第40页
    2 利福平自发抗性突变株的筛选第40-41页
    3 突变位点的鉴定第41-42页
    4 代谢产物的色谱分析第42-44页
    5 代谢产物的抑菌活性研究第44-46页
    6 原始菌株与突变菌株在不同时期的代谢产物产量分析第46-47页
    7 代谢产物的质谱分析第47-48页
    8 突变株的表型特征比较第48-50页
    9 重组质粒pUCP24-rpoB~R的构建第50-51页
    10 工程菌株Pf-rpoB~R的构建第51-52页
    11 工程菌株的活性产物产量分析第52-53页
    12 突变菌蛋白表达水平的差异分析第53-55页
第四章 讨论第55-58页
参考文献第58-66页
缩略词表第66-67页
攻读硕士学位期间发表的论文第67-68页
本论文感谢以下基金项目的资助第68-69页
致谢第69页

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