| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略表 | 第16-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-33页 |
| 1.1 肺癌近年发展 | 第19页 |
| 1.2 非小细胞肺癌病理亚型及分期 | 第19-23页 |
| 1.3 非小细胞肺癌治疗现状 | 第23-25页 |
| 1.4 mTOR信号通路 | 第25-28页 |
| 1.5 LKB1肺癌的相关性 | 第28-32页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 PTEN和LKB1在临床上非小细胞肺癌中的表达 | 第33-43页 |
| 2.1 引言 | 第33页 |
| 2.2 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.2.1 技术路线 | 第33页 |
| 2.2.2 实验样本 | 第33-35页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第35页 |
| 2.2.4 主要设备 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.3.1 免疫组织化学法检测PTEN和LKB1表达 | 第36页 |
| 2.3.2 结果判定 | 第36-37页 |
| 2.3.3 统计学分析 | 第37页 |
| 2.4 结果 | 第37-41页 |
| 2.4.1 非小细胞肺癌中PTEN和LKB1的表达 | 第37-39页 |
| 2.4.2 PTEN和LKB1的表达与非小细胞肺癌恶性程度的关系 | 第39-41页 |
| 2.5 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 质粒转染LKB1的过表达 | 第43-67页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料 | 第43-50页 |
| 3.2.1 技术路线 | 第43-44页 |
| 3.2.2 实验样本 | 第44-48页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第48-49页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第49-50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-59页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第50-51页 |
| 3.3.2 细胞中LKB1及PTEN本底表达水平检测 | 第51-54页 |
| 3.3.3 质粒转染 | 第54页 |
| 3.3.4 LKB1过表达检测 | 第54-59页 |
| 3.4 结果 | 第59-64页 |
| 3.4.1 细胞培养 | 第59-60页 |
| 3.4.2 细胞本底表达水平检测ICC检测各细胞株LKB1及PTEN表达 | 第60-62页 |
| 3.4.3 质粒转染及LKB1过表达检测 | 第62-64页 |
| 3.5 讨论 | 第64-67页 |
| 第四章 腺病毒载体构建 | 第67-85页 |
| 4.1 引言 | 第67-68页 |
| 4.2 实验材料 | 第68-73页 |
| 4.2.1 技术路线 | 第68页 |
| 4.2.2 实验样本 | 第68-71页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第71-72页 |
| 4.2.4 主要设备 | 第72-73页 |
| 4.3 实验方法 | 第73-78页 |
| 4.3.1 目的基因扩增 | 第73-74页 |
| 4.3.2 构建携带目的基因的穿梭质粒 | 第74-75页 |
| 4.3.3 重组腺病毒过表达载体包装 | 第75-76页 |
| 4.3.4 收集病毒及扩增 | 第76页 |
| 4.3.5 重组腺病毒TCID50测定 | 第76-78页 |
| 4.4 结果 | 第78-82页 |
| 4.4.1 LKB1基因扩增及重组质粒构建 | 第78-80页 |
| 4.4.2 重组腺病毒过表达载体包装和收毒 | 第80-81页 |
| 4.4.3 重组腺病毒滴度测定 | 第81-82页 |
| 4.5 讨论 | 第82-85页 |
| 第五章 体外细胞实验 | 第85-93页 |
| 5.1 引言 | 第85页 |
| 5.2 实验材料 | 第85-87页 |
| 5.2.1 技术路线 | 第85页 |
| 5.2.2 实验样本 | 第85-86页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第86页 |
| 5.2.4 主要设备 | 第86-87页 |
| 5.3 实验方法 | 第87-89页 |
| 5.3.1 腺病毒感染肺癌细胞 | 第87页 |
| 5.3.2 CCK-8细胞活性检测 | 第87-88页 |
| 5.3.3 检测迁移能力改变 | 第88-89页 |
| 5.4 结果 | 第89-90页 |
| 5.4.1 CCK-8细胞活性检测各细胞株感染ad-LKB1后的增殖影响 | 第89页 |
| 5.4.2 细胞划痕实验检测细胞迁移能力改变 | 第89-90页 |
| 5.5 讨论 | 第90-93页 |
| 致谢 | 第93-95页 |
| 参考文献 | 第95-101页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文 | 第101页 |
