| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 乙烯 | 第12-13页 |
| 1.2 乙烯转导途径 | 第13-20页 |
| 1.2.1 乙烯受体 | 第14-16页 |
| 1.2.2 CTR基因家族 | 第16-17页 |
| 1.2.3 EIN2,EIN5,EIN6,EIN7及下游转录因子 | 第17-20页 |
| 1.3 miRNA简介 | 第20-21页 |
| 1.4 选择性剪切 | 第21-22页 |
| 1.5 研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1 材料处理与采集 | 第23页 |
| 2.1.2 实验药品及载体 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 番茄CTR4svZS基因克隆 | 第23-26页 |
| 2.2.2 生物信息学分析 | 第26页 |
| 2.2.3 qRT-PCR分析番茄CTR基因家族成员表达量变化 | 第26-28页 |
| 2.2.4 qRT-PCR分析番茄miRNA1917表达量变化 | 第28-29页 |
| 2.2.5 脱落率调查 | 第29页 |
| 2.2.6 CTR4svZS(miR1917位点未突变)转基因重组质粒构建 | 第29-30页 |
| 2.2.7 CTR4svZS(miR1917位点突变)转基因重组质粒构建 | 第30-32页 |
| 2.2.8 CTR4svZS(miR1917位点未突变)及mCTR4svZS(miR1917位点突变)重组质粒农杆菌转化 | 第32页 |
| 2.2.9 CTR4svZS(miR1917位点未突变)及mCTR4svZS(miR1917位点突变)转基因番茄遗传转化 | 第32-34页 |
| 2.2.10 T0代转基因番茄植株阳性鉴定 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-51页 |
| 3.1 番茄CTR4svZS序列分析 | 第35-36页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第36-38页 |
| 3.2.1 蛋白理化分析 | 第36页 |
| 3.2.2 二级结构域分析 | 第36-37页 |
| 3.2.3 系统进化树 | 第37页 |
| 3.2.4 外显子内含子分析 | 第37-38页 |
| 3.3 番茄CTR家族成员在番茄生长发育不同时期的qRT-PCR分析 | 第38-40页 |
| 3.4 CTR4svZS及miR1917在番茄发育不同时期qRT-PCR分析 | 第40-41页 |
| 3.5 低温胁迫下CTR基因家族成员qRT-PCR分析 | 第41-42页 |
| 3.6 低温胁迫下CTR4svZS及miRl917 qRT-PCR分析 | 第42-43页 |
| 3.7 脱落率调查 | 第43-44页 |
| 3.8 乙烯及1-mcp处理对CTR基因家族不同成员表达量的影响 | 第44-46页 |
| 3.8.1 非处理条件下,CTR基因家族成员表达量分析 | 第44-45页 |
| 3.8.2 乙烯处理对CTR基因家族成员的影响 | 第45页 |
| 3.8.3 1-mcp处理对CTR基因家族成员的影响 | 第45-46页 |
| 3.9 Gateway TOPO入门重组质粒菌落PCR电泳检测 | 第46页 |
| 3.10 LR反应构建转基因终载重组质粒 | 第46-48页 |
| 3.11 CTR4svZS及mCTR4svZS转基因植株获得 | 第48-49页 |
| 3.12 T0代转基因番茄PCR扩增检测 | 第49-51页 |
| 4 结果与讨论 | 第51-54页 |
| 4.1 CTR4svZS是CTR4基因的一个新的转录本 | 第51页 |
| 4.2 乙烯对番茄CTR基因家族成员的表达调控 | 第51-52页 |
| 4.3 低温胁迫对番茄CTR基因家族的表达调控 | 第52页 |
| 4.4 miR1917在果实成熟和脱落中的表达变化 | 第52页 |
| 4.5 CTR4svZS突变及CTR4svZS未突变转基因番茄T0代植株获得 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
