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利用HPLC/ESI-MS建立糖蛋白中N-糖链的分析方法

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第10-17页
    1.1 糖与蛋白质的关系第10页
    1.2 几种重要的糖蛋白第10-13页
        1.2.1 炎症性糖蛋白第11页
        1.2.2 触珠蛋白第11-12页
        1.2.3 纤连蛋白第12-13页
    1.3 糖蛋白中寡糖链的功能及研究意义第13-14页
    1.4 本课题的研究目的及意义第14-17页
第二章 实验部分第17-28页
    2.1 实验仪器与试剂第17-18页
    2.2 稳定同位素标记糖基受体的合成第18-22页
        2.2.1 d0-PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc糖基受体的合成第18-21页
        2.2.2 d8-PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc糖基受体的合成第21-22页
        2.2.3 d0-MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc糖基受体的合成第22页
    2.3 转糖基酶的选择第22-25页
        2.3.1 标准溶液的配制第22-24页
        2.3.2 Endo-M与SGP的反应第24页
        2.3.3 Endo-M-N175Q与SGP的反应第24-25页
    2.4 糖蛋白的酶解与标记第25页
        2.4.1 PNGase F酶解第25页
        2.4.2 糖链的分离纯化第25页
        2.4.3 糖链的纯化第25页
        2.4.4 糖链的标记第25页
    2.5 丙酮选择性富集糖肽第25-28页
        2.5.1 溶液的配制第25-26页
        2.5.2 糖蛋白的变性与失活第26页
        2.5.3 过石墨炭柱SPE第26页
        2.5.4 糖链的释放第26页
        2.5.5 肽链与糖肽链的分离第26-27页
        2.5.6 糖链的标记第27-28页
第三章 结果与结论第28-47页
    3.1 稳定同位素糖基受体合成条件的优化第28-29页
    3.2 转糖基反应的对比第29-35页
        3.2.1 糖苷内切酶的选择第29-34页
        3.2.2 PDPZ-Boc-Asn-SG结构分析第34-35页
    3.3 丙酮富集糖肽链第35-38页
    3.4 使用N-糖苷酶F释放寡糖链第38-43页
    3.5 实际样品的分析第43-47页
第四章 结论第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页
硕士期间发表论文第54-55页
附图第55-64页

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