摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-7页 |
第1章 前言 | 第10-12页 |
第2章 材料与方法 | 第12-25页 |
2.1 标本来源、主要仪器及主要试剂 | 第12-13页 |
2.1.1 主要仪器 | 第12页 |
2.1.2 主要试剂 | 第12-13页 |
2.2 成纤维细胞的体外分离培养、传代、冻存与复苏 | 第13-15页 |
2.2.1 成纤维细胞的体外分离培养 | 第13-14页 |
2.2.2 成纤维细胞的传代 | 第14页 |
2.2.3 成纤维细胞的冻存 | 第14-15页 |
2.2.4 成纤维细胞的复苏 | 第15页 |
2.3 成纤维细胞的鉴定 | 第15-16页 |
2.4 体细胞重编程与克隆团块挑取、转移 | 第16-18页 |
2.4.1 体细胞重编程 | 第16-17页 |
2.4.2 克隆团块转移培养 | 第17页 |
2.4.3 制作细胞爬片 | 第17-18页 |
2.5 碱性磷酸酶染色及免疫荧光染色 | 第18页 |
2.5.1 碱性磷酸酶染色 | 第18页 |
2.5.2 免疫荧光染色 | 第18页 |
2.6 核型分析 | 第18-19页 |
2.7 诱导多能干细胞体外培养及PCR验证特异基因的表达 | 第19-20页 |
2.8 诱导多能干细胞在体内分化及畸胎瘤形成实验 | 第20-21页 |
2.9 甲基化实验 | 第21-25页 |
2.9.1 细胞基因组提取 | 第21-22页 |
2.9.2 基因组处理 | 第22-23页 |
2.9.3 目的基因的扩增 | 第23页 |
2.9.4 目的片段的回收 | 第23-24页 |
2.9.5 目的片段的克隆 | 第24-25页 |
第3章 结果 | 第25-33页 |
3.1 细胞生物学特性 | 第25-26页 |
3.2 HSFs-iPSCs的获得 | 第26-27页 |
3.3 检测HSFs-iPSCs多能性及核型分析 | 第27-29页 |
3.4 iPSCs体外分化实验 | 第29-30页 |
3.5 iPSCs体内分化实验 | 第30-31页 |
3.6 甲基化实验结果 | 第31-33页 |
第4章 讨论 | 第33-36页 |
第5章 结论 | 第36-37页 |
致谢 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第42-43页 |
综述 | 第43-50页 |
参考文献 | 第48-50页 |