英文缩写词汇表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-12页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 镉暴露大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的表达表达水平变化 | 第16-33页 |
引言 | 第16-18页 |
材料方法 | 第18-29页 |
1 材料 | 第18-22页 |
1.1 实验动物 | 第18页 |
1.2 耗材及解剖器械 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-20页 |
1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
1.5 主要试剂配制 | 第21-22页 |
2 方法 | 第22-29页 |
2.1 实验动物饲养及卵巢颗粒细胞提取 | 第22页 |
2.2 卵巢颗粒细胞染镉处理 | 第22-23页 |
2.3 镉染毒颗粒细胞中总RNA的提取 | 第23-25页 |
2.3.1 提取的RNA质量检测 | 第23页 |
2.3.2 提取的总RNA逆转录合成cDNA | 第23-24页 |
2.3.3 荧光定量PCR检测AMH与SCF基因表达 | 第24-25页 |
2.3.4 数据分析处理 | 第25页 |
2.4 镉染毒大鼠颗粒细胞中总蛋白的提取 | 第25-27页 |
2.4.1 蛋白浓度检测 | 第25-26页 |
2.4.2 Western Blot检测AMH与SCF蛋白表达 | 第26-27页 |
2.4.3 数据处理 | 第27页 |
2.6 资料及数据统计分析方法 | 第27-29页 |
结果 | 第29-30页 |
3.1 镉染毒SD大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的mRNA表达水平变化 | 第29页 |
3.2 镉染毒SD大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的蛋白表达水平变化 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-33页 |
第二部分 镉暴露AMH基因敲低的人卵巢颗粒瘤细胞中SCF表达水平变化 | 第33-57页 |
引言 | 第33-34页 |
材料方法 | 第34-52页 |
1 材料 | 第34-37页 |
1.1 实验细胞 | 第34页 |
1.2 耗材 | 第34页 |
1.3 主要试剂材料 | 第34-36页 |
1.4 主要仪器设备 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-52页 |
2.1 人卵巢颗粒瘤细胞株COV434的培养 | 第37页 |
2.2 干扰载体的构建 | 第37-41页 |
2.3 干扰shRNA的筛选 | 第41-43页 |
2.4 包装病毒 | 第43-44页 |
2.5 基因敲低细胞株的构建 | 第44页 |
2.6 COV434-AMH-shRNA细胞株鉴定 | 第44-47页 |
2.7 实验分组 | 第47页 |
2.8 荧光定量PCR检测AMH和SCF基因表达 | 第47-49页 |
2.9 Western Blot检测AMH和SCF蛋白表达 | 第49-51页 |
2.10 数据处理 | 第51页 |
2.11 资料及数据统计分析方法 | 第51-52页 |
结果 | 第52-55页 |
3.1 在人卵巢颗粒瘤细胞(COV434)中成功构建AMH敲低模型 | 第52-53页 |
3.2 镉暴露AMH基因敲低的人卵巢颗粒细胞中SCF表达水平变化 | 第53-55页 |
讨论 | 第55-57页 |
第三部分 镉暴露大鼠颗粒细胞中与AMH表达调控相关的micro RNA表达水平变化 | 第57-70页 |
引言 | 第57-58页 |
材料方法 | 第58-65页 |
1 材料 | 第58-59页 |
1.1 实验动物 | 第58页 |
1.2 耗材 | 第58页 |
1.3 主要试剂材料 | 第58-59页 |
1.4 仪器设备 | 第59页 |
2 方法 | 第59-65页 |
2.1 探索与AMH表达相关micro RNA | 第59-60页 |
2.2 实验动物饲养及卵巢颗粒细胞提取 | 第60页 |
2.3 卵巢颗粒细胞染毒处理 | 第60页 |
2.4 镉染毒颗粒细胞总RNA的提取 | 第60-61页 |
2.5 提取的总RNA质量检测 | 第61页 |
2.6 miRNA加尾处理( PolyA/cDNA反应) | 第61-62页 |
2.7 实时荧光定量PCR检测miRNA表达 | 第62-64页 |
2.8 数据分析处理 | 第64页 |
2.9 资料及数据统计分析方法 | 第64-65页 |
结果 | 第65-68页 |
3.1 在线预测数据库及研究文献提示可能与AMH表达调控相关的miRNA | 第65页 |
3.2 镉暴露卵巢颗粒细胞中与AMH表达调控相关的mircroRNA表达水平变化 | 第65-68页 |
讨论 | 第68-70页 |
全文结论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
综述 | 第77-85页 |
参考文献 | 第82-85页 |