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镉通过抗苗勒氏素负调控干细胞因子参与其对卵巢细胞损伤

英文缩写词汇表第5-6页
中文摘要第6-9页
Abstract第9-12页
前言第13-16页
第一部分 镉暴露大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的表达表达水平变化第16-33页
    引言第16-18页
    材料方法第18-29页
        1 材料第18-22页
            1.1 实验动物第18页
            1.2 耗材及解剖器械第18页
            1.3 主要试剂第18-20页
            1.4 主要仪器设备第20-21页
            1.5 主要试剂配制第21-22页
        2 方法第22-29页
            2.1 实验动物饲养及卵巢颗粒细胞提取第22页
            2.2 卵巢颗粒细胞染镉处理第22-23页
            2.3 镉染毒颗粒细胞中总RNA的提取第23-25页
                2.3.1 提取的RNA质量检测第23页
                2.3.2 提取的总RNA逆转录合成cDNA第23-24页
                2.3.3 荧光定量PCR检测AMH与SCF基因表达第24-25页
                2.3.4 数据分析处理第25页
            2.4 镉染毒大鼠颗粒细胞中总蛋白的提取第25-27页
                2.4.1 蛋白浓度检测第25-26页
                2.4.2 Western Blot检测AMH与SCF蛋白表达第26-27页
                2.4.3 数据处理第27页
            2.6 资料及数据统计分析方法第27-29页
    结果第29-30页
        3.1 镉染毒SD大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的mRNA表达水平变化第29页
        3.2 镉染毒SD大鼠卵巢颗粒细胞中AMH与SCF的蛋白表达水平变化第29-30页
    讨论第30-33页
第二部分 镉暴露AMH基因敲低的人卵巢颗粒瘤细胞中SCF表达水平变化第33-57页
    引言第33-34页
    材料方法第34-52页
        1 材料第34-37页
            1.1 实验细胞第34页
            1.2 耗材第34页
            1.3 主要试剂材料第34-36页
            1.4 主要仪器设备第36-37页
        2 方法第37-52页
            2.1 人卵巢颗粒瘤细胞株COV434的培养第37页
            2.2 干扰载体的构建第37-41页
            2.3 干扰shRNA的筛选第41-43页
            2.4 包装病毒第43-44页
            2.5 基因敲低细胞株的构建第44页
            2.6 COV434-AMH-shRNA细胞株鉴定第44-47页
            2.7 实验分组第47页
            2.8 荧光定量PCR检测AMH和SCF基因表达第47-49页
            2.9 Western Blot检测AMH和SCF蛋白表达第49-51页
            2.10 数据处理第51页
            2.11 资料及数据统计分析方法第51-52页
    结果第52-55页
        3.1 在人卵巢颗粒瘤细胞(COV434)中成功构建AMH敲低模型第52-53页
        3.2 镉暴露AMH基因敲低的人卵巢颗粒细胞中SCF表达水平变化第53-55页
    讨论第55-57页
第三部分 镉暴露大鼠颗粒细胞中与AMH表达调控相关的micro RNA表达水平变化第57-70页
    引言第57-58页
    材料方法第58-65页
        1 材料第58-59页
            1.1 实验动物第58页
            1.2 耗材第58页
            1.3 主要试剂材料第58-59页
            1.4 仪器设备第59页
        2 方法第59-65页
            2.1 探索与AMH表达相关micro RNA第59-60页
            2.2 实验动物饲养及卵巢颗粒细胞提取第60页
            2.3 卵巢颗粒细胞染毒处理第60页
            2.4 镉染毒颗粒细胞总RNA的提取第60-61页
            2.5 提取的总RNA质量检测第61页
            2.6 miRNA加尾处理( PolyA/cDNA反应)第61-62页
            2.7 实时荧光定量PCR检测miRNA表达第62-64页
            2.8 数据分析处理第64页
            2.9 资料及数据统计分析方法第64-65页
    结果第65-68页
        3.1 在线预测数据库及研究文献提示可能与AMH表达调控相关的miRNA第65页
        3.2 镉暴露卵巢颗粒细胞中与AMH表达调控相关的mircroRNA表达水平变化第65-68页
    讨论第68-70页
全文结论第70-71页
参考文献第71-76页
致谢第76-77页
综述第77-85页
    参考文献第82-85页

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