摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
中英文缩写对照 | 第11-12页 |
第1章 绪论 | 第12-25页 |
1.1 前列腺癌的概述 | 第12-14页 |
1.1.1 病因 | 第12页 |
1.1.2 临床及病理表现 | 第12-13页 |
1.1.3 诊断与治疗方法 | 第13-14页 |
1.2 肿瘤核酸适配体 | 第14-18页 |
1.2.1 核酸适配体特点 | 第14-15页 |
1.2.2 核酸适配体的应用 | 第15-17页 |
1.2.3 核酸适配体筛选对前列腺癌诊断和治疗的重要性 | 第17-18页 |
1.3 指数富集配体系统进化法(SELEX) | 第18-24页 |
1.3.1 SELEX原理与过程 | 第18-19页 |
1.3.2 SELEX靶标 | 第19页 |
1.3.3 SELEX种类 | 第19-24页 |
1.4 本论文拟开展的工作 | 第24-25页 |
第2章 前列腺癌核酸适配体的筛选 | 第25-41页 |
2.1 前言 | 第25-26页 |
2.2 实验材料 | 第26-29页 |
2.2.1 实验试剂与仪器耗材 | 第26-28页 |
2.2.2 试剂的配制 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-35页 |
2.3.1 细胞的传代、接板、冻存及复苏 | 第29-30页 |
2.3.2 琼脂糖电泳与凝胶成像 | 第30-31页 |
2.3.3 文库的设计,预处理和退火温度的优化 | 第31-32页 |
2.3.4 细胞筛选实验部分 | 第32-35页 |
2.3.5 高通量测序 | 第35页 |
2.3.6 筛选进化过程的考察 | 第35页 |
2.4 结果与讨论 | 第35-40页 |
2.4.1 引物及文库设计 | 第35页 |
2.4.2 退火温度的优化 | 第35-36页 |
2.4.3 PCR循环数优化 | 第36-37页 |
2.4.4 筛选压力的变化 | 第37-38页 |
2.4.5 筛选文库进化过程 | 第38-39页 |
2.4.6 核酸适配体的初步考察 | 第39-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第3章 人雄激素非依赖性前列腺癌细胞株DU145核酸适配体的性质考察及应用 | 第41-54页 |
3.1 前言 | 第41页 |
3.2 实验材料 | 第41-42页 |
3.2.1 试剂和仪器 | 第41-42页 |
3.3 实验方法 | 第42-44页 |
3.3.1 序列二级结构预测 | 第42页 |
3.3.2 核酸适配体的截短优化 | 第42页 |
3.3.3 核酸适配体与靶标结合的解离常数测定 | 第42页 |
3.3.4 核酸适配体在血清中的稳定性检测 | 第42-43页 |
3.3.5 核酸适配体的内在化实验 | 第43页 |
3.3.6 核酸适配体靶标类型的鉴定 | 第43页 |
3.3.7 核酸适配体特异性分析 | 第43-44页 |
3.3.8 核酸适配体在前列腺癌组织芯片上的应用实验 | 第44页 |
3.4 结果与讨论 | 第44-52页 |
3.4.1 核酸适配体二级结构预测 | 第44-45页 |
3.4.2 核酸适配体的截短优化 | 第45-46页 |
3.4.3 核酸适配体的解离常数 | 第46-47页 |
3.4.4 核酸适配体稳定性分析 | 第47页 |
3.4.5 核酸适配体内在化分析 | 第47-48页 |
3.4.6 核酸适配体结合靶标类型分析 | 第48-50页 |
3.4.7 核酸适配体特异性分析 | 第50-51页 |
3.4.8 组织芯片检测结果分析 | 第51-52页 |
3.5 小结 | 第52-54页 |
结论与展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
附录A:读硕士学位期间所发表的学术论文及专利 | 第63-64页 |
致谢 | 第64页 |