摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第8-15页 |
1.1 研究背景 | 第8页 |
1.2 蜜环菌研究概况 | 第8-11页 |
1.2.1 蜜环菌简介 | 第8页 |
1.2.2 蜜环菌的形态学特征与生物学特性 | 第8-9页 |
1.2.3 蜜环菌的化学成分及药理活性 | 第9-10页 |
1.2.4 蜜环菌产品 | 第10-11页 |
1.3 炎症简介 | 第11-13页 |
1.3.1 炎症及其发病机制 | 第11页 |
1.3.2 脂多糖与炎症 | 第11页 |
1.3.3 NF-κB信号通路与炎症 | 第11-12页 |
1.3.4 巨噬细胞与系统性炎症 | 第12-13页 |
1.3.5 小胶质细胞与神经性炎症 | 第13页 |
1.4 本课题的研究意义 | 第13页 |
1.5 本课题研究内容 | 第13-15页 |
第二章 蜜环菌不同极性萃取物的制备与抗炎活性筛选 | 第15-24页 |
2.1 前言 | 第15页 |
2.2 实验材料 | 第15-16页 |
2.2.1 菌粉与细胞 | 第15页 |
2.2.2 试剂 | 第15页 |
2.2.3 仪器与耗材 | 第15-16页 |
2.3 实验方法 | 第16-19页 |
2.3.1 蜜环菌不同极性萃取物的制备 | 第16-17页 |
2.3.2 主要药品与溶液的配制 | 第17-18页 |
2.3.3 RAW264.7 和BV-2 细胞培养 | 第18页 |
2.3.4 MTT法检测萃取物对细胞的毒性 | 第18页 |
2.3.5 Griess法检测萃取物对LPS诱导细胞分泌的NO的影响 | 第18-19页 |
2.3.6 酶联免疫法检测炎症因子TNF-α, IL-1β 和IL-6 | 第19页 |
2.3.7 统计学方法 | 第19页 |
2.4 实验结果与分析 | 第19-23页 |
2.4.1 蜜环菌不同极性萃取物的制备 | 第19页 |
2.4.2 蜜环菌不同极性萃取物对细胞活力的影响 | 第19-20页 |
2.4.3 蜜环菌不同极性萃取物对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第20-21页 |
2.4.4 蜜环菌不同极性萃取物对LPS诱导细胞分泌炎症因子的影响 | 第21-23页 |
2.5 本章小结 | 第23-24页 |
第三章 蜜环菌乙酸乙酯萃取物抗炎活性组分筛选与机制研究 | 第24-37页 |
3.1 前言 | 第24页 |
3.2 实验材料 | 第24-25页 |
3.2.1 试剂 | 第24页 |
3.2.2 仪器与耗材 | 第24-25页 |
3.3 实验方法 | 第25-28页 |
3.3.1 硅胶柱层析法分离蜜环菌乙酸乙酯萃取物 | 第25-26页 |
3.3.2 硅胶柱分离所得组分对细胞存活率的影响 | 第26页 |
3.3.3 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌的NO的检测 | 第26页 |
3.3.4 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌的细胞炎症因子的检测 | 第26页 |
3.3.5 免疫印迹法检测活性组分对神经性炎症相关信号通路的调控 | 第26-28页 |
3.3.6 免疫荧光法检测Fr.2 组分作用神经性炎症细胞后对NF-κB入核的影响 | 第28页 |
3.3.7 统计学方法 | 第28页 |
3.4 实验结果与分析 | 第28-36页 |
3.4.1 蜜环菌乙酸乙酯萃取物硅胶柱分离 | 第28-29页 |
3.4.2 MTT法检测分离组分的细胞毒性 | 第29-30页 |
3.4.3 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第30-31页 |
3.4.4 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌TNF-α 的影响 | 第31-32页 |
3.4.5 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌IL-6 的影响 | 第32-33页 |
3.4.6 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌IL-1β 的影响 | 第33-34页 |
3.4.7 Fr.2 对神经性炎症过程中NF-κB信号通路中相关蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
3.4.8 Fr.2 对NF-κB/P65入核的影响 | 第35-36页 |
3.5 本章小结 | 第36-37页 |
第四章 蜜环菌抗炎活性化合物的分离与结构鉴定 | 第37-51页 |
4.1 前言 | 第37页 |
4.2 实验材料 | 第37-38页 |
4.2.1 试剂 | 第37页 |
4.2.2 仪器 | 第37-38页 |
4.3 实验方法 | 第38-40页 |
4.3.1 高效液相法分离纯化活性组分 | 第38-39页 |
4.3.2 化合物结构鉴定 | 第39页 |
4.3.3 MTT法检测化合物对细胞的毒性 | 第39页 |
4.3.4 Griess法检测化合物对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第39页 |
4.3.5 酶联免疫法检测化合物对LPS诱导细胞分泌炎症因子的影响 | 第39页 |
4.3.6 统计学方法 | 第39-40页 |
4.4 结果与分析 | 第40-49页 |
4.4.1 高效液相分离活性组分 | 第40页 |
4.4.2 化合物的结构鉴定与分析 | 第40-43页 |
4.4.3 化合物对细胞活力的影响 | 第43-44页 |
4.4.4 化合物对LPS诱导细胞分泌NO的影响 | 第44-45页 |
4.4.5 化合物对LPS诱导细胞分泌TNF-α 的影响 | 第45-46页 |
4.4.6 化合物对LPS诱导细胞分泌IL-6 的影响 | 第46-47页 |
4.4.7 化合物对LPS诱导细胞分泌IL-1β 的影响 | 第47-49页 |
4.5 本章小结 | 第49-51页 |
第五章 主要结论和展望 | 第51-53页 |
5.1 主要结论 | 第51页 |
5.2 展望 | 第51-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
附录 1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
附录 2:分离所得化合物HPLC和NMR图谱 | 第59-68页 |
附录 3:全文中英文缩略表 | 第68页 |