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蜜环菌抗炎活性成分筛选及作用机制初探

摘要第3-4页
Abstract第4页
第一章 绪论第8-15页
    1.1 研究背景第8页
    1.2 蜜环菌研究概况第8-11页
        1.2.1 蜜环菌简介第8页
        1.2.2 蜜环菌的形态学特征与生物学特性第8-9页
        1.2.3 蜜环菌的化学成分及药理活性第9-10页
        1.2.4 蜜环菌产品第10-11页
    1.3 炎症简介第11-13页
        1.3.1 炎症及其发病机制第11页
        1.3.2 脂多糖与炎症第11页
        1.3.3 NF-κB信号通路与炎症第11-12页
        1.3.4 巨噬细胞与系统性炎症第12-13页
        1.3.5 小胶质细胞与神经性炎症第13页
    1.4 本课题的研究意义第13页
    1.5 本课题研究内容第13-15页
第二章 蜜环菌不同极性萃取物的制备与抗炎活性筛选第15-24页
    2.1 前言第15页
    2.2 实验材料第15-16页
        2.2.1 菌粉与细胞第15页
        2.2.2 试剂第15页
        2.2.3 仪器与耗材第15-16页
    2.3 实验方法第16-19页
        2.3.1 蜜环菌不同极性萃取物的制备第16-17页
        2.3.2 主要药品与溶液的配制第17-18页
        2.3.3 RAW264.7 和BV-2 细胞培养第18页
        2.3.4 MTT法检测萃取物对细胞的毒性第18页
        2.3.5 Griess法检测萃取物对LPS诱导细胞分泌的NO的影响第18-19页
        2.3.6 酶联免疫法检测炎症因子TNF-α, IL-1β 和IL-6第19页
        2.3.7 统计学方法第19页
    2.4 实验结果与分析第19-23页
        2.4.1 蜜环菌不同极性萃取物的制备第19页
        2.4.2 蜜环菌不同极性萃取物对细胞活力的影响第19-20页
        2.4.3 蜜环菌不同极性萃取物对LPS诱导细胞分泌NO的影响第20-21页
        2.4.4 蜜环菌不同极性萃取物对LPS诱导细胞分泌炎症因子的影响第21-23页
    2.5 本章小结第23-24页
第三章 蜜环菌乙酸乙酯萃取物抗炎活性组分筛选与机制研究第24-37页
    3.1 前言第24页
    3.2 实验材料第24-25页
        3.2.1 试剂第24页
        3.2.2 仪器与耗材第24-25页
    3.3 实验方法第25-28页
        3.3.1 硅胶柱层析法分离蜜环菌乙酸乙酯萃取物第25-26页
        3.3.2 硅胶柱分离所得组分对细胞存活率的影响第26页
        3.3.3 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌的NO的检测第26页
        3.3.4 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌的细胞炎症因子的检测第26页
        3.3.5 免疫印迹法检测活性组分对神经性炎症相关信号通路的调控第26-28页
        3.3.6 免疫荧光法检测Fr.2 组分作用神经性炎症细胞后对NF-κB入核的影响第28页
        3.3.7 统计学方法第28页
    3.4 实验结果与分析第28-36页
        3.4.1 蜜环菌乙酸乙酯萃取物硅胶柱分离第28-29页
        3.4.2 MTT法检测分离组分的细胞毒性第29-30页
        3.4.3 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌NO的影响第30-31页
        3.4.4 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌TNF-α 的影响第31-32页
        3.4.5 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌IL-6 的影响第32-33页
        3.4.6 硅胶柱分离所得组分对LPS诱导细胞分泌IL-1β 的影响第33-34页
        3.4.7 Fr.2 对神经性炎症过程中NF-κB信号通路中相关蛋白表达的影响第34-35页
        3.4.8 Fr.2 对NF-κB/P65入核的影响第35-36页
    3.5 本章小结第36-37页
第四章 蜜环菌抗炎活性化合物的分离与结构鉴定第37-51页
    4.1 前言第37页
    4.2 实验材料第37-38页
        4.2.1 试剂第37页
        4.2.2 仪器第37-38页
    4.3 实验方法第38-40页
        4.3.1 高效液相法分离纯化活性组分第38-39页
        4.3.2 化合物结构鉴定第39页
        4.3.3 MTT法检测化合物对细胞的毒性第39页
        4.3.4 Griess法检测化合物对LPS诱导细胞分泌NO的影响第39页
        4.3.5 酶联免疫法检测化合物对LPS诱导细胞分泌炎症因子的影响第39页
        4.3.6 统计学方法第39-40页
    4.4 结果与分析第40-49页
        4.4.1 高效液相分离活性组分第40页
        4.4.2 化合物的结构鉴定与分析第40-43页
        4.4.3 化合物对细胞活力的影响第43-44页
        4.4.4 化合物对LPS诱导细胞分泌NO的影响第44-45页
        4.4.5 化合物对LPS诱导细胞分泌TNF-α 的影响第45-46页
        4.4.6 化合物对LPS诱导细胞分泌IL-6 的影响第46-47页
        4.4.7 化合物对LPS诱导细胞分泌IL-1β 的影响第47-49页
    4.5 本章小结第49-51页
第五章 主要结论和展望第51-53页
    5.1 主要结论第51页
    5.2 展望第51-53页
致谢第53-55页
参考文献第55-58页
附录 1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第58-59页
附录 2:分离所得化合物HPLC和NMR图谱第59-68页
附录 3:全文中英文缩略表第68页

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