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皮肤鳞癌致癌作用的TGF-β1/miRNA/靶基因轴筛选及表征

中文摘要第4-7页
Abstract第7-9页
序言第12-16页
第一部分 TGF-β1/miRNA/靶基因轴生物信息学研究第16-40页
    1.1 引言第16页
    1.2 材料与方法第16页
        1.2.1 搜集目标miRNA的靶基因第16页
        1.2.2 目标miRNA的靶基因抑瘤功能预测分析第16页
        1.2.3 筛选TGF-β1/miRNA/靶基因轴第16页
    1.3 结果第16-34页
        1.3.1 目标miRNA名称在不同数据库中的对应关系第16-17页
        1.3.2 目标miRNA靶基因预测第17-21页
        1.3.3 目标miRNA靶基因的Gene Ontology和KEGG pathway分析第21-29页
        1.3.4 目标miRNA靶基因谱中与肿瘤相关的基因第29-31页
        1.3.5 筛选目标miRNA靶基因谱中与肿瘤相关的基因第31-34页
    1.4 讨论第34-39页
    1.5 结论第39-40页
第二部分 人皮肤鳞癌A431细胞TGF-β1/ miR-27a-3p /FBXW7轴的验证与鉴定第40-63页
    2.1 引言第40页
    2.2 材料与方法第40-51页
        2.2.1 主要仪器第40-41页
        2.2.2 主要试剂第41-43页
        2.2.3 主要试剂配制第43页
        2.2.4 人皮肤鳞癌A431细胞的常规培养第43-45页
        2.2.5 TGF-β1 siRNA转染人皮肤鳞癌A431细胞第45页
        2.2.6 QPCR检测明确TGF-β1同向水平变化的miRNA第45-48页
        2.2.7 双荧光素酶报告基因检测miR与预测靶基因的关系第48-51页
    2.3 结果第51-60页
        2.3.1 人皮肤鳞癌A431细胞的常规培养第51-52页
        2.3.2 TGF-β1 siRNA对人皮肤鳞癌A431细胞增殖的影响第52-53页
        2.3.3 QPCR检测TGF-β1与目标miRNA水平变化方向第53-58页
        2.3.4 miR-27a-3p对FBXW7基因靶向的验证第58-60页
    2.4 讨论第60-62页
    2.5 结论第62-63页
第三部分 TGF-β1/miR-27a-3p/FBXW7轴在皮肤鳞癌细胞增殖、细胞周期、侵袭中的作用第63-89页
    3.1 引言第63页
    3.2 材料与方法第63-74页
        3.2.1 仪器第63-64页
        3.2.2 试剂第64-65页
        3.2.3 主要试剂配制第65页
        3.2.4 FBXW7过表质粒载体构建第65-67页
        3.2.5 FBXW7干扰质粒载体构建第67-68页
        3.2.6 miR-27a-3pmimic、miR-27a-3p inhibitor、FBXW7基因过表达质粒、干扰质粒转染细胞第68-70页
        3.2.7 CCK-8检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞增殖的影响第70-71页
        3.2.8 流式检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞周期改变的影响第71-72页
        3.2.9 Transwell侵袭实验检测miR-27a-3p和FBXW7基因过表达干扰对细胞侵袭能力的影响第72-74页
    3.3 结果第74-85页
        3.3.1 重组载体pcDNA3.1- FBXW7构建第74页
        3.3.2 重组载体SD1211-si- FBXW7的构建第74页
        3.3.3 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞增殖中的影响第74-77页
        3.3.4 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞周期中的影响第77-81页
        3.3.5 miR-27a-3p与FBXW7表达对人皮肤鳞癌A431细胞侵袭能力的影响第81-85页
    3.4 讨论第85-88页
    3.5 结论第88-89页
参考文献第89-101页
综述第101-112页
    参考文献第105-112页
攻读博士学位期间发表的学术论文及科研成果第112-113页
致谢第113页

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