摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文简写词索引 | 第12-15页 |
前言 | 第15-17页 |
技术路线图 | 第17-18页 |
第一部分 CML/CD36对糖尿病apoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化演进的影响 | 第18-35页 |
1 实验材料 | 第18-20页 |
1.1 实验动物及饲料 | 第18页 |
1.2 试剂及配制 | 第18-19页 |
1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-25页 |
2.1 实验动物及分组 | 第20页 |
2.2 apoE~(-/-)小鼠血清学检测 | 第20页 |
2.3 实验标本的留取与切片制备 | 第20-21页 |
2.4 血管及淋巴结的胆固醇检测 | 第21页 |
2.5 苏木素-伊红染色(HE染色) | 第21页 |
2.6 组织油红O染色 | 第21-22页 |
2.7 免疫组织化学检测 | 第22页 |
2.8 免疫荧光检测 | 第22-23页 |
2.9 蛋白免疫印迹分析(Western blot) | 第23-25页 |
2.9.1 主动脉及淋巴结蛋白提取 | 第23页 |
2.9.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第23-24页 |
2.9.3 SDS-PAGE凝胶配制 | 第24页 |
2.9.4 上样及SDS-PAGE电泳 | 第24页 |
2.9.5 转膜、封闭与抗体孵育 | 第24-25页 |
3 统计学处理 | 第25页 |
4 结果 | 第25-32页 |
4.1 apoE~(-/-)小鼠血清学变化 | 第25-26页 |
4.2 apoE~(-/-)小鼠主动脉斑块分布及脂质蓄积 | 第26-27页 |
4.3 apoE~(-/-)小鼠主动脉斑块内CD36、CD68蛋白表达 | 第27-29页 |
4.4 apoE~(-/-)小鼠主动脉旁淋巴结脂质蓄积及CD36、CD68表达 | 第29-32页 |
5 讨论 | 第32-35页 |
第二部分 CML/CD36介导RAW264.7 源性泡沫细胞迁移的机制 | 第35-59页 |
1 实验材料 | 第35-37页 |
1.1 实验细胞株 | 第35页 |
1.2 试剂及配制 | 第35-37页 |
1.3 主要仪器 | 第37页 |
2 实验方法 | 第37-42页 |
2.1 细胞培养与实验分组 | 第37-38页 |
2.2 泡沫细胞模型及油红O染色 | 第38-39页 |
2.3 Transwell迁移实验 | 第39页 |
2.4 细胞划痕实验 | 第39页 |
2.5 免疫共沉淀 | 第39页 |
2.6 细胞免疫荧光检测 | 第39-40页 |
2.7 细胞活性氧检测 | 第40页 |
2.8 蛋白免疫印迹分析(Western blot) | 第40页 |
2.8.1 细胞蛋白的提取 | 第40页 |
2.8.2 BCA法检测蛋白浓度 | 第40页 |
2.9 实时荧光定量PCR检测(RT-PCR) | 第40-42页 |
2.9.1 细胞RNA的提取 | 第40-41页 |
2.9.2 RNA浓度及纯度测定 | 第41页 |
2.9.3 逆转录为cDNA | 第41页 |
2.9.4 实时荧光定量PCR扩增目的基因 | 第41-42页 |
2.9.5 Real-Time PCR数据分析 | 第42页 |
3 统计学处理 | 第42-43页 |
4 结果 | 第43-53页 |
4.1 CML促进泡沫细胞脂质蓄积 | 第43-44页 |
4.2 CML促进泡沫细胞CD36表达 | 第44-45页 |
4.3 CML与CD36相互作用情况 | 第45-46页 |
4.4 CML抑制泡沫细胞肌迁移 | 第46-47页 |
4.5 CML促进泡沫细胞肌动蛋白聚合 | 第47-49页 |
4.6 CD36参与CML对泡沫细胞迁移的受抑 | 第49-50页 |
4.7 CML/CD36介导泡沫细胞产生游离胆固醇和活性氧 | 第50-52页 |
4.8 CML/CD36影响泡沫细胞迁移的相关机制 | 第52-53页 |
5 讨论 | 第53-59页 |
第三部分 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
综述 CD36 在动脉粥样硬化中的相关作用 | 第69-78页 |
参考文献 | 第73-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
硕士期间发表的论文情况 | 第79-81页 |
硕士期间参加的学术活动 | 第81-82页 |
硕士期间参与的课题情况 | 第82页 |