摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-23页 |
1.1 蜂王浆概述 | 第14-16页 |
1.1.1 蜂王浆简介 | 第14页 |
1.1.2 蜂王浆的理化性质和化学成分 | 第14-15页 |
1.1.3 蜂王浆的功能活性 | 第15-16页 |
1.2 MRJPS家族概述 | 第16-19页 |
1.2.1 MRJPs家族简介 | 第16-17页 |
1.2.2 MRJPs家族分子特性 | 第17-18页 |
1.2.3 MRJPs家族分离纯化的研究进展 | 第18-19页 |
1.2.4 MRJPs家族的功能活性 | 第19页 |
1.2.6 MRJPs家族的结构研究进展 | 第19页 |
1.3 蛋白质分离纯化方法 | 第19-20页 |
1.3.1 离子交换色谱层析 | 第19-20页 |
1.3.2 尺寸排阻色谱层析 | 第20页 |
1.3.3 疏水相互作用色谱层析 | 第20页 |
1.3.4 亲和色谱层析 | 第20页 |
1.4 蛋白质二级结构研究方法--圆二色谱法 | 第20页 |
1.5 蜂王浆储存过程中变化研究进展 | 第20-21页 |
1.6 课题研究的意义及主要内容 | 第21-23页 |
1.6.1 课题研究的意义 | 第21-22页 |
1.6.2 课题研究的主要内容 | 第22-23页 |
第二章 应用不同疏水色谱柱分离蜂王浆主蛋白 | 第23-31页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器设备 | 第23页 |
2.1.1 实验材料、试剂 | 第23页 |
2.1.2 仪器设备 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-24页 |
2.2.1 样品制备与提取 | 第23-24页 |
2.2.2 不同疏水色谱柱分离蜂王浆主蛋白 | 第24页 |
2.2.3 SDS-PAGE分析 | 第24页 |
2.2.4 Native-PAGE分析 | 第24页 |
2.3 结果和讨论 | 第24-30页 |
2.3.1 柱子的选择 | 第24-29页 |
2.3.2 Native-PAGE分析疏水柱分离的MRJP1 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-31页 |
第三章 MRJP1-3 分离纯化流程及二级结构鉴定 | 第31-43页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器设备 | 第31-32页 |
3.1.1 实验材料、试剂 | 第31页 |
3.1.2 仪器设备 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-34页 |
3.2.1 样品制备与提取 | 第32页 |
3.2.2 MRJP1寡聚体和单体的分离纯化 | 第32页 |
3.2.3 MRJP2和MRJP3的分离纯化 | 第32页 |
3.2.4 还原性和非还原性SDS-PAGE分析 | 第32页 |
3.2.5 Native-PAGE分析 | 第32-33页 |
3.2.6 双向电泳分析 | 第33页 |
3.2.7 MRJP1-3 的LC-MS/MS质谱鉴定 | 第33页 |
3.2.8 分析超速离心分析MRJP1寡聚体1和MRJP1寡聚体 2 | 第33页 |
3.2.9 MRJP1-3 圆二色谱分析 | 第33-34页 |
3.3 结果和讨论 | 第34-42页 |
3.3.1 MRJP1-3 分离纯化流程 | 第34-38页 |
3.3.2 MRJP1-3 双向电泳分析 | 第38-39页 |
3.3.3 MRJP1-3 的LC-MS/MS质谱鉴定 | 第39-40页 |
3.3.4 MRJP1寡聚体1和MRJP1寡聚体2的分析超速离心结果 | 第40-41页 |
3.3.5 MRJP1-3 圆二色谱分析结果 | 第41-42页 |
3.4 小结 | 第42-43页 |
第四章 蜂王浆主蛋白的尺寸排阻色谱行为及MRJP1-3 纯度鉴定 | 第43-53页 |
4.1 实验材料、试剂和仪器设备 | 第43-44页 |
4.1.1 实验材料、试剂 | 第43页 |
4.1.2 仪器设备 | 第43-44页 |
4.2 实验方法 | 第44-45页 |
4.2.1 样品制备与提取 | 第44页 |
4.2.2 SEC柱的校正 | 第44页 |
4.2.3 中低压液相尺寸排阻色谱分析蜂王浆水溶性蛋白的色谱行为 | 第44页 |
4.2.4 4-12% Bis-Tris和 10-20% Tricine预制胶分析 | 第44页 |
4.2.5 蛋白酶K水解蜂王浆样品分析 | 第44页 |
4.2.6 茚三酮法分析 | 第44-45页 |
4.2.7 氨基酸全自动分析仪分析 | 第45页 |
4.2.8 SEC-HPLC分析蜂王浆主蛋白的色谱行为及MRJP1-3 纯度鉴定 | 第45页 |
4.3 结果和讨论 | 第45-52页 |
4.3.1 蜂王浆水溶性蛋白尺寸排阻色谱行为 | 第45-49页 |
4.3.2 SEC-HPLC分析蜂王浆主蛋白的色谱行为及MRJP1-3 纯度鉴定 | 第49-52页 |
4.4 小结 | 第52-53页 |
第五章 SEC-HPLC分析蜂王浆主蛋白储存过程中的变化 | 第53-65页 |
5.1 实验材料、试剂和仪器设备 | 第53页 |
5.1.1 实验材料、试剂 | 第53页 |
5.1.2 仪器设备 | 第53页 |
5.2 实验方法 | 第53-55页 |
5.2.1 样品制备与提取 | 第53-54页 |
5.2.2 Bicinchoninic acid (BCA )法测定蛋白浓度 | 第54页 |
5.2.3 SEC柱的校正 | 第54页 |
5.2.4 SDS-PAGE分析 | 第54页 |
5.2.5 Native-PAGE分析 | 第54页 |
5.2.6 SEC-HPLC色谱条件 | 第54-55页 |
5.3 结果和讨论 | 第55-63页 |
5.3.1 不同储存条件下蜂王浆主蛋白SDS-PAGE和Native-PAGE分析 | 第55-56页 |
5.3.2 不同储存条件下蜂王浆主蛋白的SEC-HPLC分析 | 第56-63页 |
5.4 本章小结 | 第63-65页 |
第六章 全文结论 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
作者简历 | 第73页 |