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抗人精浆蛋白单抗Fab段基因的克隆及表达

英文缩写词表第5-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10页
文献回顾第13-25页
    一、 抗体可变区基因的克隆第14-15页
    二、 嵌合抗体和改型抗体第15-16页
    三、 抗体融合蛋白第16-17页
    四、 抗体分子片段第17-19页
    五、 组合抗体文库第19-22页
    六、 抗体的核糖体展示第22页
    七、 产生抗体的转基因植物第22页
    八、 转基因动物第22-25页
前言第25-27页
实验内容(一) 人精浆蛋白的纯化和鉴定第27-34页
    一、 材料和试剂第27-28页
    二、 方法第28-32页
        1、 动物体内诱生单抗第28-29页
        2、 单克隆抗体的纯化第29页
        3、 E_4B_7 MAb-Sepharaose 4B亲和色谱柱的制备第29-30页
        4、 增生的前列腺组织的裂解第30页
        5、 人精浆蛋白的纯化第30-31页
        6、 Protein A-Sepharose 4B亲和色谱吸附洗脱的E_4B_7 MAb第31页
        7、 蛋白含量第31页
        8、 纯化人精浆蛋白活性鉴定第31-32页
    三、 结果第32-33页
        1、 纯化人精浆蛋白蛋白含量第32页
        2、 酶联免疫吸附实验第32-33页
        3、 免疫印迹分析第33页
    四、 讨论第33-34页
实验内容(二) 抗人精浆蛋白单抗Fab段基因的克隆及表达第34-67页
    一、 材料第34-38页
        1、 细胞系第34页
        2、 质粒与菌种第34-36页
        3、 主要试剂第36页
        4、 使用的引物第36-38页
        5、 主要仪器第38页
    二、 方法第38-45页
        1、 克隆载体的构建第38-40页
        2、 序列测定第40页
        3、 表达载体的构建及表达第40-42页
        4、 表达产物活性及亲和力测定第42-45页
    三、 结果第45-64页
        1、 基因的克隆第45-46页
        2、 DNA序列的测定第46-57页
        3、 真核表达载体的构建第57-58页
        4、 HeLa细胞中的表达第58-59页
        5、 Fab噬菌体抗体表达载体的构建第59-60页
        6、 可溶性Fab段表达载体的构建第60页
        7、 酶联免疫吸附实验第60-61页
        8、 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳第61页
        9、 免疫印迹分析第61-62页
        10、 免疫细胞化学第62-63页
        11、 亲和力测定第63-64页
    四、 讨论第64-67页
小结第67-68页
参考文献第68-74页
致谢第74页

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