英文缩写词表 | 第5-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
文献回顾 | 第13-25页 |
一、 抗体可变区基因的克隆 | 第14-15页 |
二、 嵌合抗体和改型抗体 | 第15-16页 |
三、 抗体融合蛋白 | 第16-17页 |
四、 抗体分子片段 | 第17-19页 |
五、 组合抗体文库 | 第19-22页 |
六、 抗体的核糖体展示 | 第22页 |
七、 产生抗体的转基因植物 | 第22页 |
八、 转基因动物 | 第22-25页 |
前言 | 第25-27页 |
实验内容(一) 人精浆蛋白的纯化和鉴定 | 第27-34页 |
一、 材料和试剂 | 第27-28页 |
二、 方法 | 第28-32页 |
1、 动物体内诱生单抗 | 第28-29页 |
2、 单克隆抗体的纯化 | 第29页 |
3、 E_4B_7 MAb-Sepharaose 4B亲和色谱柱的制备 | 第29-30页 |
4、 增生的前列腺组织的裂解 | 第30页 |
5、 人精浆蛋白的纯化 | 第30-31页 |
6、 Protein A-Sepharose 4B亲和色谱吸附洗脱的E_4B_7 MAb | 第31页 |
7、 蛋白含量 | 第31页 |
8、 纯化人精浆蛋白活性鉴定 | 第31-32页 |
三、 结果 | 第32-33页 |
1、 纯化人精浆蛋白蛋白含量 | 第32页 |
2、 酶联免疫吸附实验 | 第32-33页 |
3、 免疫印迹分析 | 第33页 |
四、 讨论 | 第33-34页 |
实验内容(二) 抗人精浆蛋白单抗Fab段基因的克隆及表达 | 第34-67页 |
一、 材料 | 第34-38页 |
1、 细胞系 | 第34页 |
2、 质粒与菌种 | 第34-36页 |
3、 主要试剂 | 第36页 |
4、 使用的引物 | 第36-38页 |
5、 主要仪器 | 第38页 |
二、 方法 | 第38-45页 |
1、 克隆载体的构建 | 第38-40页 |
2、 序列测定 | 第40页 |
3、 表达载体的构建及表达 | 第40-42页 |
4、 表达产物活性及亲和力测定 | 第42-45页 |
三、 结果 | 第45-64页 |
1、 基因的克隆 | 第45-46页 |
2、 DNA序列的测定 | 第46-57页 |
3、 真核表达载体的构建 | 第57-58页 |
4、 HeLa细胞中的表达 | 第58-59页 |
5、 Fab噬菌体抗体表达载体的构建 | 第59-60页 |
6、 可溶性Fab段表达载体的构建 | 第60页 |
7、 酶联免疫吸附实验 | 第60-61页 |
8、 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第61页 |
9、 免疫印迹分析 | 第61-62页 |
10、 免疫细胞化学 | 第62-63页 |
11、 亲和力测定 | 第63-64页 |
四、 讨论 | 第64-67页 |
小结 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74页 |