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骨髓间充质干细胞对胸腺辐射凋亡的作用及其成瘤过程中机制的探讨

内容提要第5-6页
中文摘要第6-9页
ABSTRACT第9-13页
前言第19-21页
第1章 文献综述第21-39页
    1.1 间充质干细胞的生物学特点及在放射损伤和肿瘤方面的应用第21-31页
        1.1.1 骨髓间质干细胞的研究起源第21-22页
        1.1.2 骨髓间充质干细胞的分离培养第22-24页
        1.1.3 MSCs生物学特点第24-27页
        1.1.4 MSCs在放射损伤中的应用第27-30页
        1.1.5 MSCs与肿瘤的关系第30-31页
        1.1.6 问题与展望第31页
    1.2 β-catenin、c-myc和cyclin D1与肿瘤的关系第31-39页
        1.2.1 Wnt信号通路的简介第31-33页
        1.2.2 β-catenin第33-34页
        1.2.3 c-myc第34-36页
        1.2.4 cyclin D1第36-38页
        1.2.5 问题与展望第38-39页
第2章 材料与方法第39-51页
    2.1 主要试剂与器材第39-40页
        2.1.1 主要试剂第39-40页
        2.1.2 主要器材第40页
    2.2 主要仪器第40-41页
    2.3 实验动物第41页
    2.4 照射与分组第41页
        2.4.1 照射条件第41页
    2.5 骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及鉴定第41-44页
        2.5.1 主要液体配制第42页
        2.5.2 骨髓MSCs的分离培养第42-43页
        2.5.3 MTT检测MSCs生长特点第43页
        2.5.4 流式细胞术分析MSCs的细胞周期第43页
        2.5.5 流式细胞术鉴定MSCs表型第43页
        2.5.6 体外诱导MSCs分化为成骨细胞第43-44页
        2.5.7 MSCs体外诱导分化为脂肪样细胞第44页
    2.6 DAPI标记的MSCs在小鼠胸腺迁徙及定位观察第44-45页
    2.7 小鼠胸腺组织病理学观察第45页
    2.8 胸腺细胞周期及凋亡的检测第45页
    2.9 小鼠胸腺组织中p53、survivin、VEGF、β-catenin、c-myc和cyclin D1 mRNA表达第45-48页
        2.9.1 小鼠胸腺组织中总RNA的提取第46页
        2.9.2 RNA质量的鉴定第46页
        2.9.3 cDNA的合成第46页
        2.9.4 引物的设计及合成第46-48页
        2.9.5 PCR反应第48页
        2.9.6 PCR产物的确定分析第48页
    2.10 小鼠胸腺组织中β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达第48-49页
        2.10.1 免疫组化检测小鼠胸腺组织中β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达第48-49页
        2.10.2 小鼠胸腺组织中β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达结果判定第49页
    2.11 统计学方法第49-51页
第3章 实验结果第51-75页
    3.1 小鼠骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定第51-53页
        3.1.1 MSC的形态学观察第51页
        3.1.2 MSCs生长曲线的测定第51-52页
        3.1.3 MSCs的细胞周期测定分析第52页
        3.1.4 MSCs表型鉴定第52-53页
        3.1.5 MSCs诱导分化为成骨细胞第53页
        3.1.6 MSCs体外诱导分化为脂肪样细胞第53页
    3.2 MSCs在小鼠胸腺组织移植及定位第53-54页
        3.2.1 DAPI标记MSCs第53页
        3.2.2 DAPI标记的MSCs细胞在胸腺组织移植及定位第53-54页
    3.3 MSCs移植对辐射小鼠的影响第54-58页
        3.3.1 动物一般情况第54页
        3.3.2 动物体重变化第54-55页
        3.3.3 胸腺细胞周期和凋亡率的检测第55-57页
        3.3.4 胸腺组织病理学检测第57-58页
        3.3.5 小鼠胸腺淋巴瘤成瘤率第58页
    3.4 小鼠胸腺组织中p53、survivin和VEGF mRNA表达第58-63页
        3.4.1 MSCs输入30、60和90 d后胸腺组织p53基因表达的变化第58-60页
        3.4.2 MSCs输入30、60和90 d后胸腺组织survivin基因表达的变化第60-61页
        3.4.3 MSCs输入30、60和90 d后胸腺组织VEGF基因表达的变化第61-63页
    3.5 小鼠胸腺组织中β-catenin、c-myc和cyclin D1 mRNA表达第63-71页
        3.5.1 β-catenin基因表达的变化第63-65页
        3.5.2 c-myc基因表达的变化第65-68页
        3.5.3 cyclin D1基因表达的变化第68-71页
    3.6 小鼠胸腺组织中β-catenin、c-myc和cyclin D1蛋白表达第71-75页
        3.6.1 β-catenin蛋白在胸腺组织的定位与表达第71-72页
        3.6.2 c-myc在胸腺组织的定位与表达第72页
        3.6.3 cyclin D1在胸腺组织的定位与表达第72-73页
        3.6.4 β-catenin与c-myc和cyclin D1在胸腺组织中表达的相关关系第73-75页
第4章 讨论第75-89页
    4.1 骨髓间充质干细胞体外培养和鉴定的方法第75-77页
    4.2 电离辐射对胸腺组织的损伤第77-78页
    4.3 MSCs移植对胸腺辐射凋亡的作用第78-84页
    4.4 MSCs在辐射诱发胸腺瘤过程中作用机制的探讨第84-89页
结论第89-91页
参考文献第91-107页
附图第107-111页
个人简历及攻读博士期间发表的学术论文第111-113页
致谢第113页

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