摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 昆虫及其嗅觉系统 | 第12页 |
1.2 气味信号的转导过程 | 第12-13页 |
1.3 昆虫气味结合蛋白 | 第13-19页 |
1.3.1 OBPs的结构特点 | 第14-15页 |
1.3.2 OBPs功能的变化 | 第15页 |
1.3.3 OBPs蛋白的结合性能的研究方法 | 第15-16页 |
1.3.4 OBPs的三维结构(3D) | 第16-19页 |
1.4 昆虫化学感受蛋白 | 第19页 |
1.5 昆虫气味受体蛋白 | 第19-20页 |
1.6 昆虫气味降解酶 | 第20页 |
1.7 豆野螟简介及其嗅觉相关研究现状 | 第20-21页 |
1.8 本课题研究的意义 | 第21-23页 |
第二章 豆野螟气味结合蛋白GOBP2在宿主识别和产卵定位中的功能分析 | 第23-44页 |
2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.1.1 实验所用昆虫 | 第23页 |
2.1.2 实验所用试剂 | 第23页 |
2.1.3 实验所用主要仪器 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 豆野螟触角的采集 | 第24页 |
2.2.2 豆野螟总RNA的提取 | 第24页 |
2.2.3 cDNA的合成 | 第24-25页 |
2.2.4 引物设计 | 第25-26页 |
2.2.5 豆野螟MvitGOBP2保守片段的克隆分析 | 第26页 |
2.2.6 RACE-PCR克隆MvitGOBP2基因全长 | 第26-27页 |
2.2.7 MvitGOBP2的组织分布和时空表达模式分析 | 第27-29页 |
2.2.8 MvitGOBP2的原核表达和目的蛋白的纯化 | 第29-30页 |
2.2.9 抗体的制备 | 第30页 |
2.2.10 Western Blot Analysis检测抗体的特异性 | 第30-32页 |
2.2.11 荧光测定 | 第32页 |
2.2.12 荧光结合试验 | 第32页 |
2.3 实验结果与分析 | 第32-41页 |
2.3.1 豆野螟MvitGOBP2的扩增、克隆和序列分析 | 第32-34页 |
2.3.2 与其他物种的同源比对情况 | 第34-35页 |
2.3.3 豆野螟气味结合蛋白MvitGOBP2基因的组织表达与时空表达模式分析 | 第35-37页 |
2.3.4 重组蛋白pET32a-MvitGOBP2的诱导表达、纯化及Western blot分析 | 第37-38页 |
2.3.5 荧光结合试验 | 第38-41页 |
2.4 讨论 | 第41-44页 |
第三章 豆野螟气味受体ORCO的克隆及表达模式分析 | 第44-52页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.1.1 实验所用昆虫 | 第44页 |
3.1.2 实验所用试剂及仪器 | 第44页 |
3.2 实验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 豆野螟触角的采集 | 第44页 |
3.2.2 豆野螟总RNA的提取和cDNA的合成 | 第44页 |
3.2.3 引物设计 | 第44-45页 |
3.2.4 豆野螟MvitOrco保守片段的的获得 | 第45页 |
3.2.5 3'和5'ACE克隆MvitOrco的全长基因 | 第45页 |
3.2.6 MvitOrco的的组织分布和时空表达分析 | 第45-46页 |
3.3 实验的结果及分析 | 第46-51页 |
3.3.1 豆野螟MvitOrco的全长的扩增 | 第46页 |
3.3.2 豆野螟MvitOrco的扩增、克隆和序列分析 | 第46-47页 |
3.3.3 与其他物种的同源比对情况 | 第47-49页 |
3.3.4 豆野螟MvitOrco基因的组织表达与时空表达谱 | 第49-51页 |
3.4 讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |