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豆野螟嗅觉相关基因GOBP2和Orco的克隆表达及功能分析

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第12-23页
    1.1 昆虫及其嗅觉系统第12页
    1.2 气味信号的转导过程第12-13页
    1.3 昆虫气味结合蛋白第13-19页
        1.3.1 OBPs的结构特点第14-15页
        1.3.2 OBPs功能的变化第15页
        1.3.3 OBPs蛋白的结合性能的研究方法第15-16页
        1.3.4 OBPs的三维结构(3D)第16-19页
    1.4 昆虫化学感受蛋白第19页
    1.5 昆虫气味受体蛋白第19-20页
    1.6 昆虫气味降解酶第20页
    1.7 豆野螟简介及其嗅觉相关研究现状第20-21页
    1.8 本课题研究的意义第21-23页
第二章 豆野螟气味结合蛋白GOBP2在宿主识别和产卵定位中的功能分析第23-44页
    2.1 实验材料第23-24页
        2.1.1 实验所用昆虫第23页
        2.1.2 实验所用试剂第23页
        2.1.3 实验所用主要仪器第23-24页
    2.2 实验方法第24-32页
        2.2.1 豆野螟触角的采集第24页
        2.2.2 豆野螟总RNA的提取第24页
        2.2.3 cDNA的合成第24-25页
        2.2.4 引物设计第25-26页
        2.2.5 豆野螟MvitGOBP2保守片段的克隆分析第26页
        2.2.6 RACE-PCR克隆MvitGOBP2基因全长第26-27页
        2.2.7 MvitGOBP2的组织分布和时空表达模式分析第27-29页
        2.2.8 MvitGOBP2的原核表达和目的蛋白的纯化第29-30页
        2.2.9 抗体的制备第30页
        2.2.10 Western Blot Analysis检测抗体的特异性第30-32页
        2.2.11 荧光测定第32页
        2.2.12 荧光结合试验第32页
    2.3 实验结果与分析第32-41页
        2.3.1 豆野螟MvitGOBP2的扩增、克隆和序列分析第32-34页
        2.3.2 与其他物种的同源比对情况第34-35页
        2.3.3 豆野螟气味结合蛋白MvitGOBP2基因的组织表达与时空表达模式分析第35-37页
        2.3.4 重组蛋白pET32a-MvitGOBP2的诱导表达、纯化及Western blot分析第37-38页
        2.3.5 荧光结合试验第38-41页
    2.4 讨论第41-44页
第三章 豆野螟气味受体ORCO的克隆及表达模式分析第44-52页
    3.1 实验材料第44页
        3.1.1 实验所用昆虫第44页
        3.1.2 实验所用试剂及仪器第44页
    3.2 实验方法第44-46页
        3.2.1 豆野螟触角的采集第44页
        3.2.2 豆野螟总RNA的提取和cDNA的合成第44页
        3.2.3 引物设计第44-45页
        3.2.4 豆野螟MvitOrco保守片段的的获得第45页
        3.2.5 3'和5'ACE克隆MvitOrco的全长基因第45页
        3.2.6 MvitOrco的的组织分布和时空表达分析第45-46页
    3.3 实验的结果及分析第46-51页
        3.3.1 豆野螟MvitOrco的全长的扩增第46页
        3.3.2 豆野螟MvitOrco的扩增、克隆和序列分析第46-47页
        3.3.3 与其他物种的同源比对情况第47-49页
        3.3.4 豆野螟MvitOrco基因的组织表达与时空表达谱第49-51页
    3.4 讨论第51-52页
参考文献第52-61页
攻读学位期间取得的研究成果第61-62页
致谢第62页

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