摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩写词表 | 第9-12页 |
文献综述 | 第12-18页 |
引言 | 第18-19页 |
主要技术路线 | 第19-20页 |
1 材料与方法 | 第20-33页 |
1.1 试验材料 | 第20-21页 |
1.1.1 实验菌株及质粒 | 第20页 |
1.1.2 实验动物 | 第20页 |
1.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第20页 |
1.1.4 主要培养基及试剂的配制 | 第20-21页 |
1.1.5 仪器设备 | 第21页 |
1.2 实验方法与步骤 | 第21-33页 |
1.2.1 目的菌株的筛选 | 第21-22页 |
1.2.2 目的菌株phoP和phoQ基因测序及跨膜结构分析 | 第22-23页 |
1.2.3 phoP和phoQ缺失株的构建 | 第23-26页 |
1.2.4 AE18、AE19和AE20回复株的构建 | 第26-29页 |
1.2.5 缺失株和回复株的生物学特性的检测 | 第29页 |
1.2.6 AE17、缺失株和回复株毒力基因转录水平的检测 | 第29-31页 |
1.2.7 黏附和入侵CEF细胞的能力的检测 | 第31-32页 |
1.2.8 AE17和缺失株半数致死量的测定及病理组织学观察 | 第32-33页 |
2 结果与分析 | 第33-48页 |
2.1 目的菌株的筛选和序列结构分析 | 第33-36页 |
2.1.1 APEC菌株phoP和phoQ基因的检测 | 第33页 |
2.1.2 临床分离APEC对氯霉素和氨苄青霉素敏感性检测 | 第33-34页 |
2.1.3 基因测序及序列分析 | 第34-35页 |
2.1.4 跨膜结构分析 | 第35-36页 |
2.2 phoP/Q基因缺失株和回复株的构建与鉴定 | 第36-39页 |
2.2.1 phoP缺失株AE18的构建与鉴定 | 第36-37页 |
2.2.2 phoQ缺失株AE19的构建与鉴定 | 第37-38页 |
2.2.3 phoPQ双基因缺失株AE20的构建与鉴定 | 第38页 |
2.2.4 回复株CAE18、CAE19和CAE19的构建与鉴定 | 第38-39页 |
2.3 缺失株和回复株生物学特性及基因转录水平的检测 | 第39-44页 |
2.3.1 生长曲线的测定 | 第39-40页 |
2.3.2 生化特性的检测 | 第40页 |
2.3.3 运动性能力的检测 | 第40-41页 |
2.3.4 细菌毒力基因转录水平的检测 | 第41-44页 |
2.4 phoP/Q基因缺失对致病力的影响 | 第44-48页 |
2.4.1 细菌黏附入侵CEF细胞能力的比较 | 第44-45页 |
2.4.2 细菌半数致死量(LD50)的测定及病理组织学观察 | 第45-48页 |
3 讨论 | 第48-51页 |
3.1 目的菌株的筛选及序列分析 | 第48页 |
3.2 APEC中phoP和phoQ基因的缺失和回复 | 第48页 |
3.3 phoP和phoQ基因的缺失对APEC运动性的影响 | 第48-49页 |
3.4 phoP和phoQ基因的缺失对毒力基因转录水平的影响 | 第49页 |
3.5 APEC基因的缺失对细胞和鸡体致病力的影响 | 第49-51页 |
4 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |
附作者在读研期间发表的学术论文 | 第58页 |