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虫生真菌几丁质酶基因的克隆、原核共表达及生物活性研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第12-24页
    1.1 球孢白僵菌概述第12-13页
        1.1.1 球孢白僵菌的简介第12页
        1.1.2 球孢白僵菌致病机理第12-13页
    1.2 蜡蚧轮枝菌的概述第13-14页
        1.2.1 蜡蚧轮枝菌的简介第13页
        1.2.2 蜡蚧轮枝菌的致病机制第13-14页
    1.3 融合蛋白技术第14-15页
    1.4 几丁质酶概述第15-16页
    1.5 几丁质酶在作物主要病害防控方面的应用第16-23页
        1.5.1 玉米大斑病生物防治研究进展第16-20页
        1.5.2 大豆核盘菌病生物防治研究进展第20-23页
    1.6 本研究的目的和意义第23-24页
第二章 球孢白僵菌和蜡蚧轮枝菌几丁质酶基因的克隆及原核表达第24-39页
    2.1 实验材料第24-26页
        2.1.1 供试菌株第24页
        2.1.2 载体质粒第24-25页
        2.1.3 常用培养基及抗生素第25页
        2.1.4 主要化学试剂第25页
        2.1.5 主要实验的仪器和设备第25-26页
        2.1.6 常用缓冲液第26页
    2.2 实验方法第26-33页
        2.2.1 球孢白僵菌和蜡蚧轮枝菌几丁质酶基因克隆第26-31页
        2.2.2 球孢白僵菌几丁质酶基因的原核表达第31-33页
    2.3 实验结果与分析第33-38页
        2.3.1 BbCHI 和 VlCHI 基因克隆第33-35页
        2.3.2 重组质粒 pMD-18T:BbCHI 和 pMD-18T:VlCHI 酶切鉴定结果第35-36页
        2.3.3 BbCHI 和 VlCHI 基因序列分析结果第36页
        2.3.4 融合蛋白诱导表达分析第36-38页
    2.4 小结第38-39页
第三章 BBCHI 与 VLCHI 基因的融合构建与原核共表达第39-47页
    3.1 实验材料第39页
        3.1.1 供试材料第39页
        3.1.2 载体质粒第39页
        3.1.3 常用培养基及抗生素第39页
        3.1.4 主要化学试剂第39页
        3.1.5 主要实验的仪器和设备第39页
        3.1.6 常用缓冲液第39页
    3.2 实验方法第39-43页
        3.2.1 BbCHI 基因和 VlCHI 基因的融合第39-42页
        3.2.2 融合基因的原核共表达第42-43页
    3.3 实验结果与分析第43-46页
        3.3.1 基因融合扩增第43-44页
        3.3.2 BVlCHI 基因融合扩增第44-45页
        3.3.3 重组质粒 pMD-18T:BVCHI 酶切鉴定结果第45页
        3.3.4 融合蛋白诱导表达分析第45-46页
    3.4 小结第46-47页
第四章 BBCHI、VLCHI 和 BVCHI 蛋白裂解液生物活性研究第47-54页
    4.1 实验材料第47-48页
        4.1.1 供试菌株第47页
        4.1.2 供试材料第47页
        4.1.3 主要仪器设备第47页
        4.1.4 主要缓冲液第47-48页
        4.1.5 主要化学试剂第48页
        4.1.6 主要培养基第48页
    4.2 实验方法第48-51页
        4.2.1 菌种的活化第48页
        4.2.2 玉米和番茄的种植第48页
        4.2.3 孢子悬浮液制备第48-49页
        4.2.4 三种蛋白裂解液的制备第49页
        4.2.5 三种蛋白裂解液的浓度测定第49页
        4.2.6 三种蛋白裂解液对玉米大斑抑菌活性测定第49-50页
        4.2.7 三种蛋白裂解液对核盘菌抑菌活性的测定第50页
        4.2.8 三种蛋白裂解液在玉米活体离体条件下对玉米大斑病菌的抑制效果的测定第50页
        4.2.9 三种蛋白裂解液在番茄活体离体条件下对核盘病菌的抑制效果测定第50-51页
    4.3 实验结果第51-53页
        4.3.1 三种蛋白裂解液的浓度测定结果第51页
        4.3.2 三种蛋白裂解液对玉米大斑病菌菌丝的抑制效果第51-52页
        4.3.3 三种蛋白裂解液对大豆核盘菌菌丝的抑制效果第52页
        4.3.4 三种蛋白裂解液在玉米活体离体条件下对玉米大斑病菌的抑制效果第52页
        4.3.5 三种蛋白裂解液在番茄活体离体条件下对核盘病菌的抑制效果第52-53页
    4.4 小结第53-54页
第五章 多种药剂对核盘菌和玉米大斑病抑制作用的研究第54-59页
    5.1 实验材料第54页
        5.1.1 供试菌株第54页
        5.1.2 供试药剂第54页
    5.2 试验方法第54-56页
        5.2.1 试验质量浓度设置如下第54-55页
        5.2.2 菌丝生长速率法第55页
        5.2.3 孢子萌发法第55-56页
    5.3 实验结果第56-58页
    5.4 小结第58-59页
全文结论第59-61页
参考文献第61-69页
致谢第69页

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