中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
绪论 | 第16-20页 |
第一篇 文献综述 | 第20-54页 |
第1章 MicroRNA 研究进展 | 第20-28页 |
1 MicroRNA 的发现 | 第20-21页 |
2 MicroRNA 的生物合成与作用机制 | 第21-23页 |
3 MicroRNA 的调控功能 | 第23-28页 |
3.1 MiRNA 对各种生理过程的调节 | 第23-25页 |
3.2 MiRNA 对各种病理过程的调节 | 第25-28页 |
第2章 病毒 microRNA 研究进展 | 第28-36页 |
1 病毒 microRNA 的发现和鉴定 | 第28-30页 |
2 病毒 microRNA 的功能 | 第30-36页 |
2.1 对病毒自身基因表达的调节 | 第31页 |
2.2 延长感染细胞寿命 | 第31-32页 |
2.3 逃避免疫应答 | 第32-33页 |
2.4 调节宿主或病毒基因限制溶细胞性感染 | 第33-34页 |
2.5 其他功能 | 第34-36页 |
第3章 马立克氏病病毒与其编码的 microRNAs | 第36-54页 |
1 马立克氏病 | 第36-37页 |
2 MDV 及其致病机制 | 第37-46页 |
2.1 MDV 的生物学特征 | 第37-38页 |
2.2 MDV 的致病机制 | 第38-46页 |
3 MDV 编码的 microRNA | 第46-52页 |
3.1 发现与鉴定 | 第46-48页 |
3.2 MDV miRNAs 的功能 | 第48-49页 |
3.3 MDV 编码的细胞 miR-155 同源物 | 第49-52页 |
4 本研究的目的与意义 | 第52-54页 |
第二篇 Mdv-miR-M4-5p 调控马立克氏病病毒致瘤的分子机制研究 | 第54-107页 |
第1章 材料和方法 | 第54-76页 |
1 材料 | 第54-58页 |
1.1 实验材料 | 第54-56页 |
1.2 实验设备与试剂 | 第56-58页 |
2 方法 | 第58-76页 |
2.1 生物信息学预测 | 第58-59页 |
2.2 载体构建 | 第59-64页 |
2.3 双荧光素酶报告基因检测 | 第64-65页 |
2.4 实时荧光定量 PCR | 第65-68页 |
2.5 LTBP1 多克隆抗体的制备 | 第68-69页 |
2.6 Western blot 检测 | 第69-70页 |
2.7 TGF-β1 浓度测定 | 第70-72页 |
2.8 PCR array 分析 | 第72-73页 |
2.9 免疫组织化学实验 | 第73-74页 |
2.10 细胞功能实验 | 第74-76页 |
第2章 结果与分析 | 第76-98页 |
1 生物信息学预测 mdv1-miR-M4-5p 候选靶基因 | 第76-78页 |
2 Mdv1-miR-M4-5p 与候选靶基因 3’-UTR 的体外相互作用 | 第78-81页 |
2.1 载体构建 | 第78-80页 |
2.2 双荧光素酶报告实验 | 第80-81页 |
3 候选靶基因的体内表达情况 | 第81-84页 |
3.1 过表达 mdv1-miR-M4-5p 对候选靶基因的抑制 | 第81-83页 |
3.2 病毒感染对候选靶基因的抑制 | 第83-84页 |
4 MDV-1 感染对 LTBP1 蛋白表达的影响 | 第84-87页 |
4.1 LTBP1 多克隆抗体的制备结果 | 第84-87页 |
4.2 MDV-1 感染抑制 LTBP1 蛋白质的表达 | 第87页 |
5 下调 LTBP1 表达可明显抑制 TGF-β1 的分泌 | 第87-88页 |
6 Mdv1-miR-M4-5p 抑制 TGF-β信号通路 | 第88-90页 |
7 过表达 mdv1-miR-M4-5p 或沉默 LTBP1 的表达均可显著活化c-myc | 第90-97页 |
8 Mdv1-miR-M4-5p 靶向下调 LTBP1 的表达可促进细胞增殖 | 第97-98页 |
第3章 讨论 | 第98-107页 |
1 MiRNA 靶基因的预测 | 第98-99页 |
2 Mdv1-miR-M4-5p 和 miR-155 的肿瘤调控模型 | 第99-100页 |
3 TGF-β信号通路与肿瘤形成 | 第100-101页 |
4 参与调控 TGF-β信号通路的其他 miRNAs | 第101-105页 |
5 MDV 致瘤蛋白与肿瘤形成通路 | 第105-107页 |
结论 | 第107-108页 |
参考文献 | 第108-130页 |
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第130-131页 |
导师及作者简介 | 第131-133页 |
致谢 | 第133页 |