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大豆GmFtsH基因的遗传转化及功能分析

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一部分 文献综述第10-30页
 第一章 植物光胁迫及FtsH的分析研究第11-29页
  1 植物光胁迫研究进展第11-24页
   ·植物光抑制的形成第11-17页
     ·PSⅡ的光抑制及其机理第12-14页
     ·PSⅠ的光抑制及其机理第14-16页
     ·光抑制过程中PSⅡ和PSⅠ的关系第16-17页
   ·植物的光破坏第17-19页
   ·植物光胁迫下的防御机制第19-24页
     ·叶黄素循环的光保护机制第20-22页
     ·电子传递第22-23页
     ·活性氧清除机制第23-24页
  2 金属蛋白酶FtsH的研究进展第24-29页
   ·FtsH的发现和同系物的多样性第24页
   ·FtsH结构第24-26页
     ·N端跨膜域第25页
     ·AAA结构域(AAA domain)第25-26页
     ·Zn~(2+)结合结构域(Zinc-binding domain)第26页
   ·FtsH功能和作用机制第26-29页
     ·原核生物中FtsH的功能和作用机制第27-28页
     ·真核生物中FtsH的功能和作用机制第28-29页
 本研究的目的和意义第29-30页
第二部分 实验论文第30-57页
 第二章 GmFtsH的克隆、过表达载体构建及表达分析第31-45页
  1 材料与方法第31-36页
   ·植物材料第31页
   ·材料处理第31页
   ·主要仪器及试剂第31页
   ·菌株和载体第31-32页
   ·方法与步骤第32-36页
     ·大豆总RNA的提取第32页
     ·cDNA第一链的合成第32-33页
     ·GmFtsH基因cDNA克隆第33-34页
     ·GmFtsH基因序列分析第34页
     ·GmFtsH基因多重序列比对与系统进化分析第34页
     ·荧光定量QRT-PCR胁迫分析第34-35页
     ·Gate Way技术体系构建植物过表达载体第35-36页
  2 结果与分析第36-44页
   ·RNA提取和cDNA合成第36-37页
   ·GmFtsH全长cDNA的克隆第37-39页
   ·GmFtsH基因序列生物信息学分析第39-41页
   ·GmFtsH在不同逆境胁迫下的诱导表达分析第41页
   ·Gateway体系构建植物表达载体第41-44页
  3 讨论第44-45页
 第三章 GmFtsH基因的烟草转化与抗性初步分析第45-57页
  1 材料与方法第45-49页
   ·材料第45页
   ·主要仪器及试剂第45页
   ·农杆菌介导法转化烟草第45-47页
     ·受体材料准备第45页
     ·农杆菌的培养第45-46页
     ·农杆菌侵染外植体及培养第46页
     ·转基因烟草植株的PCR和RT-PCR的鉴定第46-47页
   ·转基因烟草的功能初步分析第47-48页
     ·转基因烟草抗光氧化胁迫分析第47-48页
     ·转基因烟草抗干旱胁迫分析第48页
   ·丙二醛(MDA)和可溶性糖含量的测定第48-49页
     ·MDA的提取第48页
     ·显色反应和测定第48页
     ·计算公式第48-49页
  2 结果与分析第49-55页
   ·转基因烟草植株的获得及分子检测(PCR、RT-PCR)第49-50页
     ·转基因烟草植株的获得第49页
     ·转基因烟草植株的分子检测第49-50页
   ·转基因烟草抗光氧化胁迫分析第50-53页
     ·T_0代烟草离体圆叶片的抗光氧化胁迫能力分析第50-52页
     ·T1代烟草连体叶片的抗光氧化胁迫能力分析第52-53页
   ·转基因烟草抗干旱胁迫分析第53-55页
     ·T_1代烟草在干旱条件下的萌发情况第53-54页
     ·T1代烟草在干旱条件下MDA含量和可溶性糖含量的变化第54-55页
  3 讨论第55-57页
全文结论第57-59页
参考文献第59-65页
附录第65-69页
致谢第69页

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