摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一部分 文献综述 | 第10-30页 |
第一章 植物光胁迫及FtsH的分析研究 | 第11-29页 |
1 植物光胁迫研究进展 | 第11-24页 |
·植物光抑制的形成 | 第11-17页 |
·PSⅡ的光抑制及其机理 | 第12-14页 |
·PSⅠ的光抑制及其机理 | 第14-16页 |
·光抑制过程中PSⅡ和PSⅠ的关系 | 第16-17页 |
·植物的光破坏 | 第17-19页 |
·植物光胁迫下的防御机制 | 第19-24页 |
·叶黄素循环的光保护机制 | 第20-22页 |
·电子传递 | 第22-23页 |
·活性氧清除机制 | 第23-24页 |
2 金属蛋白酶FtsH的研究进展 | 第24-29页 |
·FtsH的发现和同系物的多样性 | 第24页 |
·FtsH结构 | 第24-26页 |
·N端跨膜域 | 第25页 |
·AAA结构域(AAA domain) | 第25-26页 |
·Zn~(2+)结合结构域(Zinc-binding domain) | 第26页 |
·FtsH功能和作用机制 | 第26-29页 |
·原核生物中FtsH的功能和作用机制 | 第27-28页 |
·真核生物中FtsH的功能和作用机制 | 第28-29页 |
本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
第二部分 实验论文 | 第30-57页 |
第二章 GmFtsH的克隆、过表达载体构建及表达分析 | 第31-45页 |
1 材料与方法 | 第31-36页 |
·植物材料 | 第31页 |
·材料处理 | 第31页 |
·主要仪器及试剂 | 第31页 |
·菌株和载体 | 第31-32页 |
·方法与步骤 | 第32-36页 |
·大豆总RNA的提取 | 第32页 |
·cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
·GmFtsH基因cDNA克隆 | 第33-34页 |
·GmFtsH基因序列分析 | 第34页 |
·GmFtsH基因多重序列比对与系统进化分析 | 第34页 |
·荧光定量QRT-PCR胁迫分析 | 第34-35页 |
·Gate Way技术体系构建植物过表达载体 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-44页 |
·RNA提取和cDNA合成 | 第36-37页 |
·GmFtsH全长cDNA的克隆 | 第37-39页 |
·GmFtsH基因序列生物信息学分析 | 第39-41页 |
·GmFtsH在不同逆境胁迫下的诱导表达分析 | 第41页 |
·Gateway体系构建植物表达载体 | 第41-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
第三章 GmFtsH基因的烟草转化与抗性初步分析 | 第45-57页 |
1 材料与方法 | 第45-49页 |
·材料 | 第45页 |
·主要仪器及试剂 | 第45页 |
·农杆菌介导法转化烟草 | 第45-47页 |
·受体材料准备 | 第45页 |
·农杆菌的培养 | 第45-46页 |
·农杆菌侵染外植体及培养 | 第46页 |
·转基因烟草植株的PCR和RT-PCR的鉴定 | 第46-47页 |
·转基因烟草的功能初步分析 | 第47-48页 |
·转基因烟草抗光氧化胁迫分析 | 第47-48页 |
·转基因烟草抗干旱胁迫分析 | 第48页 |
·丙二醛(MDA)和可溶性糖含量的测定 | 第48-49页 |
·MDA的提取 | 第48页 |
·显色反应和测定 | 第48页 |
·计算公式 | 第48-49页 |
2 结果与分析 | 第49-55页 |
·转基因烟草植株的获得及分子检测(PCR、RT-PCR) | 第49-50页 |
·转基因烟草植株的获得 | 第49页 |
·转基因烟草植株的分子检测 | 第49-50页 |
·转基因烟草抗光氧化胁迫分析 | 第50-53页 |
·T_0代烟草离体圆叶片的抗光氧化胁迫能力分析 | 第50-52页 |
·T1代烟草连体叶片的抗光氧化胁迫能力分析 | 第52-53页 |
·转基因烟草抗干旱胁迫分析 | 第53-55页 |
·T_1代烟草在干旱条件下的萌发情况 | 第53-54页 |
·T1代烟草在干旱条件下MDA含量和可溶性糖含量的变化 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
全文结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-69页 |
致谢 | 第69页 |