| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-38页 |
| 1.1 油菜的杂种优势及其利用 | 第16-19页 |
| 1.1.1 植物杂种优势利用 | 第16-17页 |
| 1.1.2 油菜杂种优势利用途径 | 第17-19页 |
| 1.2 植物化学杂交剂研究概况 | 第19-26页 |
| 1.2.1 植物化学杂交剂诱导雄性不育研究的发展历史 | 第19-20页 |
| 1.2.2 油菜化学杂交剂的的发展及使用现状 | 第20-23页 |
| 1.2.3 杀雄剂单嘧磺酯钠的化学特性 | 第23-26页 |
| 1.3 油菜雄性不育的发生机理 | 第26-31页 |
| 1.3.1 高等植物花药发育过程 | 第26-27页 |
| 1.3.2 油菜细胞质雄性不育的发生机理 | 第27-28页 |
| 1.3.3 油菜细胞核雄性不育的发生机理 | 第28页 |
| 1.3.4 油菜化学杀雄剂诱导的雄性不育 | 第28-31页 |
| 1.4 植物花药转录组研究概况 | 第31-33页 |
| 1.4.1 正常花药转录组研究概况 | 第31-32页 |
| 1.4.2 不育花药与正常花药的比较转录组研究 | 第32-33页 |
| 1.5 病毒介导的植物基因沉默技术及其应用 | 第33-37页 |
| 1.5.1 VIGS技术的发现及应用 | 第34-35页 |
| 1.5.2 烟草脆裂病毒介导的VIGS | 第35-37页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 第二章 CHA-MES对甘蓝型油菜花药发育的细胞学影响 | 第38-51页 |
| 引言 | 第38页 |
| 2.1 材料、试剂及仪器 | 第38-39页 |
| 2.1.1 材料 | 第38页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第38-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39页 |
| 2.2.1 供试材料的种植 | 第39页 |
| 2.2.2 单嘧磺酯钠溶液的配制 | 第39页 |
| 2.2.3 化学杀雄处理及样品采集 | 第39页 |
| 2.2.4 透射电镜样品制备及观察 | 第39页 |
| 2.3 结果与分析 | 第39-48页 |
| 2.3.1 花粉母细胞时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较 | 第40-41页 |
| 2.3.2 四分体时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较 | 第41-43页 |
| 2.3.3 单核花粉粒时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较 | 第43-45页 |
| 2.3.4 成熟花粉粒时期对照组与处理组花药细胞超微结构比较 | 第45-47页 |
| 2.3.5 单核花粉粒时期对照组与处理组花药外皮层和内皮层细胞超微结构比较 | 第47-48页 |
| 2.4 讨论与结论 | 第48-51页 |
| 第三章 甘蓝型油菜花药正常发育过程中的转录组分析 | 第51-73页 |
| 引言 | 第51页 |
| 3.1 材料、试剂及仪器 | 第51-52页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 3.1.2 试剂、仪器及软件工具 | 第51-52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 3.2.1 供试植物材料的种植及样品采集 | 第52页 |
| 3.2.2 RNA提取、芯片杂交、数据采集以及归一化处理 | 第52-53页 |
| 3.2.3 基因表达的差异显著性分析及功能注释 | 第53页 |
| 3.2.4 差异表达基因的聚类分析 | 第53页 |
| 3.2.5 GO功能富集分析 | 第53-54页 |
| 3.2.6 基因表达调控网络的预测 | 第54页 |
| 3.2.7 实时定量PCR分析 | 第54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-69页 |
| 3.3.1 甘蓝型油菜花药发育过程中各阶段转录组的检测 | 第54-57页 |
| 3.3.2 甘蓝型油菜花药发育过程中各阶段转录组的动态变化情况 | 第57-59页 |
| 3.3.3 甘蓝型油菜花药发育中差异表达基因的注释、聚类以及功能分析 | 第59-63页 |
| 3.3.4 甘蓝型油菜花药发育中脂肪酸及碳水化合物代谢相关基因的表达变化 | 第63-67页 |
| 3.3.5 甘蓝型油菜花药发育过程中的代谢调节网络分析 | 第67-68页 |
| 3.3.6 Real-time PCR验证 | 第68-69页 |
| 3.4 讨论与结论 | 第69-73页 |
| 3.4.1 植物花药发育早期和晚期之间普遍存在着转录组的调整变化 | 第69-70页 |
| 3.4.2 油菜花药转录组功能从早期的脂肪酸代谢到晚期的碳水化合物代谢转变 | 第70-71页 |
| 3.4.3 油菜花药发育过程中的基因表达调控网络 | 第71-73页 |
| 第四章 CHA-MES诱导甘蓝型油菜不育花药的差异转录组分析 | 第73-93页 |
| 引言 | 第73页 |
| 4.1 材料、试剂及仪器 | 第73-74页 |
| 4.1.1 材料 | 第73-74页 |
| 4.1.2 试剂及仪器 | 第74页 |
| 4.2 实验方法 | 第74-76页 |
| 4.2.1 供试植物材料的种植、MES处理及样品采集 | 第74-75页 |
| 4.2.2 RNA提取、芯片杂交、数据采集以及归一化处理 | 第75页 |
| 4.2.3 利用实时定量PCR方法验证基因芯片数据 | 第75页 |
| 4.2.4 差异基因的筛选及功能注释 | 第75页 |
| 4.2.5 差异基因的功能分类、富集分析以及代谢途径分析 | 第75-76页 |
| 4.2.6 碳水化合物含量测定 | 第76页 |
| 4.3 结果与分析 | 第76-89页 |
| 4.3.1 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育的差异表达基因筛选 | 第76-79页 |
| 4.3.2 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育差异表达转录本的注释及功能分析 | 第79-83页 |
| 4.3.3 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育株差异表达基因的代谢途经分析 | 第83页 |
| 4.3.4 碳水化合物和脂肪酸代谢相关基因的表达量变化情况 | 第83-88页 |
| 4.3.5 CHA-MES诱导油菜雄性不育植株叶片及花药中碳水化合物含量的变化 | 第88-89页 |
| 4.4 讨论与结论 | 第89-93页 |
| 4.4.1 CHA-MES可能通过影响质体和线粒体的结构而影响花药的育性 | 第89页 |
| 4.4.2 CHA-MES影响花药发育过程中脂肪酸和碳水化合物代谢相关基因的表达 | 第89-90页 |
| 4.4.3 CHA-MES诱导植物雄性不育过程与ALS抑制剂除草过程的比较 | 第90-92页 |
| 4.4.4 推测CHA-MES诱导甘蓝型油菜发生雄性不育的工作模型 | 第92-93页 |
| 第五章 CHA-MES诱导植物雄性不育靶标的验证及不育候选基因的筛选 | 第93-105页 |
| 引言 | 第93页 |
| 5.1 材料、试剂及仪器 | 第93-94页 |
| 5.1.1 材料 | 第93页 |
| 5.1.2 试剂及仪器 | 第93-94页 |
| 5.2 实验方法 | 第94-95页 |
| 5.2.1 CHA-MES诱导拟南芥雄性不育的处理 | 第94页 |
| 5.2.2 花粉活力显微观察 | 第94页 |
| 5.2.3 TRV-VIGS载体构建及农杆菌处理 | 第94-95页 |
| 5.2.4 目标基因的半定量检测 | 第95页 |
| 5.3 结果与分析 | 第95-103页 |
| 5.3.1 ALS酶作为CHA-MES诱导植物雄性不育作用靶标的验证 | 第95-96页 |
| 5.3.2 TRV-VIGS载体构建及干扰体系建立 | 第96-99页 |
| 5.3.3 TRV介导的ALS基因沉默可诱导拟南芥植株发生雄性不育现象 | 第99-101页 |
| 5.3.4 利用TRV-VIGS技术筛选其他与植物育性相关的候选基因 | 第101-103页 |
| 5.4 讨论与结论 | 第103-105页 |
| 第六章 全文总结与创新点 | 第105-107页 |
| 6.1 全文总结 | 第105-106页 |
| 6.1.1 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育的超微结构观察 | 第105页 |
| 6.1.2 甘蓝型油菜花药发育过程中物质代谢相关基因的调控网络 | 第105页 |
| 6.1.3 CHA-MES诱导甘蓝型油菜雄性不育花药的差异转录组分析 | 第105-106页 |
| 6.1.4 CHA-MES诱导植物雄性不育的靶标验证以及不育候选基因的筛选 | 第106页 |
| 6.2 全文结论 | 第106页 |
| 6.3 创新点 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-118页 |
| 附录 | 第118-126页 |
| 缩略词 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
| 作者简介 | 第128-129页 |
